PLX-4720

目录号：S1152 批次号：S115206

化学数据

	别名	N/A	储存条件 (自收到货起)	3年 / -20°C / 粉状 1年 / -80°C / 溶于溶剂
	化学式	C₁₇H₁₄ClF₂N₃O₃S
	分子量	413.83	CAS号	918505-84-7
Solubility (25°C)*	体外	DMSO	82 mg/mL (198.14 mM)
		Water	Insoluble
		Ethanol	Insoluble
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble. * Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

制备储备液

生物活性

产品描述

PLX-4720是一种有效的，选择性的B-Raf^V600E抑制剂，无细胞试验中IC50为13 nM，同样有效地作用于c-Raf-1(Y340D和Y341D突变型)，作用于B-RafV600E比作用于野生型B-Raf选择性高10倍。

靶点

C-Raf-1 (Y340D/Y341D) ^[1] (Cell-free assay)	B-Raf (V600E) ^[1] (Cell-free assay)	BRK ^[1] (Cell-free assay)	B-Raf ^[1] (Cell-free assay)
6.7 nM	13 nM	130 nM	160 nM

体外研究

PLX-4720高亲和力与活性B-Raf^V600E和c-Raf-1Y340D/Y341D结合，作用于野生型B-Raf选择性>10倍,作用于其他激酶如Frk, Src, Fak, FGFR, 和Aurora A 选择性>100倍，IC50为1.3-3.4 μM。与有效的选择性相一致, PLX-4720作用于携带B-Raf^V600E的细胞系，显著抑制ERK磷酸化，IC50为14-46 nM, 但是对携带野生型B-Raf的细胞没有作用效果。PLX-4720 作用于携带B-Raf^V600E致癌基因（如COLO205, A375, WM2664, 和 COLO829）的肿瘤细胞系，显著抑制细胞生长，GI50 分别为 0.31 μM, 0.50 μM, 1.5 μM, 和 1.7 μM。此外, 1 μM PLX-4720 只有作用于B-Raf^V600E-阳性1205Lu细胞, 诱导细胞周期停滞和凋亡，而作用于B-Raf 野生型C8161细胞则无此效果。^[1]10 μM PLX-4720 处理PTEN⁺细胞，诱导BIM表达，比PTEN^-细胞系(4倍-fold)高14倍，说明PTEN^-细胞系抗PLX-4720诱导的凋亡。^[2]

体内研究

PLX-4720每天按20 mg/kg剂量口服给药依赖B-Raf^V600E的COLO205移植瘤，显著延迟肿瘤生长，且引起肿瘤衰退, 即使按1 g/kg剂量处理也不会对小鼠造成明显的不利影响。PLX-4720按 100 mg/kg剂量处理携带B-Raf^V600E的1205Lu 移植瘤，每天两次，几乎完全消除肿瘤, 而对携带野生型B-Raf的C8161 移植瘤则没有作用活性。PLX-4720 作用于含V600E突变细胞的抗癌效果与阻断MAPK通路相关。^[1] PLX-4720每天按30 mg/kg剂量处理8505c肿瘤，显著抑制肿瘤生长，抑制达90%以上,也显著降低远处肺转移。^[3]

推荐的实验操作(此推荐来自于公开的文献所以Selleck并不保证其有效性)

激酶实验	体外Raf激酶活性实验
激酶实验	通过测量生物素-MEK蛋白，使用Perkin-Elmer's AlphaScreen 技术测定体外野生型和突变型Raf的激酶活性。在20 mM Hepes (pH 7.0), 10 mM MgCl₂, 1 mM DTT, 0.01% Tween-20, 100 nM 生物素-MEK 蛋白,多种ATP浓度,及浓度不断增高的PLX-4720混合物中在室温下进行每组酶(0.1 ng)反应，反应体积为20-μL。在 2, 5, 8, 10, 20,和 30分钟加入5 μL含20 mM Hepes (pH 7.0), 200 mM NaCl, 80 mM EDTA, 和 0.3% BSA的溶液终止反应。终止液包括磷酸-MEK抗体, 链霉亲和素包被的供体珠，和AlphaScreen蛋白 A检测试剂盒中的蛋白A受体珠。抗体和小株在终止液中在室温下黑暗温育30分钟。抗体最终按 1:2,000稀释,每个小珠终浓度为 10 μg/mL。实验板在室温下温育1小时，然后在 PerkinElmer AlphaQuest 读数器上读数。
细胞实验	细胞系	COLO205, A375, WM2664, COLO829, HT716, SW620, H460, Calu-6, HCT116, SK-MEL2, SK-MEL3, Lovo, H1299, 1205Lu, 和C8161
	浓度	溶于DMSO, 终浓度为~1 mM
	处理时间	24, 48, 和 72小时
	方法	使用不同浓度PLX-4720 for处理细胞 24, 48,和72小时通过 CellTiter-GLO荧光细胞活性检测或MTT实验测定细胞增殖。为了分析细胞周期, 收集上清液和细胞, 制成颗粒，与70%乙醇混合。在使用碘化丙啶 (10 μg/mL)染色前,细胞在0.5 mg/mL RNase I 中37^oC下温育1小时，除去残留RNA污染样本。使用EPICS XL仪分析样本。为了测定凋亡, 获得培养基和细胞，制成颗粒，然后使用膜联蛋白-FITC和碘化丙啶染色。然后再使用EPICS XL仪分析样本。
动物实验	动物模型	皮下移植 COLO205 细胞的雌性无胸腺NCr nu/nu小鼠, 携带1205Lu或C8161 细胞的SCID小鼠
	剂量	5, 20, 或100 mg/kg
	给药处理	口服饲喂，每天一次或两次

参考文献

客户使用selleck产品的实验数据

: 数据来源于[Data independently produced by Cancer Discov, 2013, 3, 350-62]

: 数据来源于[Data independently produced by Genes Dev, 2012, 26, 1055-69]

: 数据来源于[, 108, 6067-6072]

: 数据来源于[, 71, 2750-2760]

PLX-4720在文献中得到引用

Tracking the EMT-like phenotype switching during targeted therapy in melanoma by analyzing extracellular vesicle phenotypes [ Biosens Bioelectron, 2024, 10.1016/j.bios.2023.115819]	PubMed: 37952322
Executioner caspases restrict mitochondrial RNA-driven Type I IFN induction during chemotherapy-induced apoptosis [ Nat Commun, 2023, 14(1):1399]	PubMed: 36918588
Executioner caspases restrict mitochondrial RNA-driven Type I IFN induction during chemotherapy-induced apoptosis [ Nat Commun, 2023, 14(1):1399]	PubMed: 36918588
TFEB inhibition induces melanoma shut-down by blocking the cell cycle and rewiring metabolism [ Cell Death Dis, 2023, 14(5):314]	PubMed: 37160873
Inhibition of TGF-β signaling, invasion, and growth of cutaneous squamous cell carcinoma by PLX8394 [ Oncogene, 2023, 10.1038/s41388-023-02863-8]	PubMed: 37864034
Dual VEGFA/BRAF targeting boosts PD-1 blockade in melanoma through GM-CSF-mediated infiltration of M1 macrophages [ Mol Oncol, 2023, 10.1002/1878-0261.13450]	PubMed: 37183363
WNT5A-ROR2 axis mediates VEGF dependence of BRAF mutant melanoma [ Cell Oncol (Dordr), 2023, 46(2):391-407]	PubMed: 36539575
High-Content and High-Throughput Clonogenic Survival Assay Using Fluorescence Barcoding [ Cancers -Basel), 2023, 15(19)4772]	PubMed: 37835466
The adaptor protein VEPH1 interacts with the kinase domain of ERBB2 and impacts EGF signaling in ovarian cancer cells [ Cell Signal, 2023, 106:110634]	PubMed: 36828346
Mycobacterium tuberculosis resides in lysosome-poor monocyte-derived lung cells during persistent infection [ bioRxiv, 2023, 2023.01.19.524758]	PubMed: 36711606

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