Tozasertib (VX-680)

目录号：S1048 批次号：S104806

化学数据

	别名	MK-0457	储存条件 (自收到货起)	3年 / -20°C / 粉状 1年 / -80°C / 溶于溶剂
	化学式	C₂₃H₂₈N₈OS
	分子量	464.59	CAS号	639089-54-6
Solubility (25°C)*	体外	DMSO	49 mg/mL (105.46 mM)
		Ethanol	49 mg/mL (105.46 mM)
		Water	3 mg/mL (6.45 mM)
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble. * Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

制备储备液

生物活性

产品描述

Tozasertib (VX-680)是一种pan-Aurora抑制剂，对Aurora A作用最强，无细胞试验中K_iapp为0.6 nM，而对Aurora B/Aurora C的作用较弱，对Aurora A选择性比其他55种激酶高100倍。唯二的例外是 Fms-related tyrosine kinase-3 (FLT-3) 和 BCR-ABL tyrosine kinase，也可被 Tozasertib 抑制，对应的Ki值均为30 nM和30 nM。Tozasertib 可诱导凋亡和自噬。Phase 2。

靶点

Aurora A ^[1] (Cell-free assay)	Aurora C ^[1] (Cell-free assay)	Aurora B ^[1] (Cell-free assay)	FLT3 ^[4] (Cell-free assay)	Bcr-Abl ^[4] (Cell-free assay)
0.6 nM(Ki app)	4.6 nM(Ki app)	18 nM(Ki app)	30 nM(Ki)	30 nM(Ki)

体外研究

虽然VX-680具有多激酶特性，VX-680却诱导相似的细胞毒性，IC50约为300 nM，在G2/M期，核内复制期，及转染ABL或FLT-3激酶的BaF3细胞凋亡时，显示一个Aurora B 类似的抑制表现型。VX-680抑制CAL-62细胞增殖，这种作用存在时间依赖性。用VX-680处理14天，明显降低群体的数量和大小，处理8305C下降达到70%，处理CAL-62, 8505C,和BHT-101下降达到90%。用VX-680处理不同ATC细胞，抑制细胞增殖，IC50为25到150 nM，这种作用存在时间和剂量依赖性。在软琼脂中，VX-680明显削弱不同细胞系形成群落的能力。caspase-3的活性分析显示VX-680诱导不同细胞凋亡。VX-680处理CAL-62 细胞12小时，形成DNA含量≥4N细胞累积物。微速摄影分析显示VX-680处理的CAL-62细胞离开细胞中期。VX-680可以抑制组蛋白H3的磷酸化作用。^[2] VX-680作用于携带T315I突变的BCR-Abl的病人样本，具有明显抑制活性。^[3]

体内研究

VX-680作用于人类AML(HL-60)移植瘤模型明显降低肿瘤尺寸。VX-680按75 mg/kg剂量给药实验鼠,每天腹腔注射两次，持续13天,与对照组相比，平均肿瘤体积下降达98%。肿瘤体积比实验之前初始体积小很多。按12.5 mg/kg剂量每天给药两次，肿瘤生长也明显降低，这种作用存在剂量依赖性。VX-680耐受性很好，只有在使用高剂量时可以观察到实验动物体重稍微降低。通过比较cisplatin,按5.4 mg/kg剂量给药，每四天腹腔注射一次，一共进行三次，抑制肿瘤生长只达9%。VX-680作用于胰脏和结肠移植瘤，也引起肿瘤衰退。VX-680静脉注射给药携带HCT116肿瘤的实验鼠，显示很强的抗癌活性。使用高剂量VX-680(每小时2 mg/kg)处理，明显提高效果，比实验钱的初始肿瘤平均尺寸下降56%。^[1]

激酶实验	激酶抑制实验
丙酮酸激酶/乳酸脱氢酶催化NADH的氧化，伴随着ATP的消耗，观察340 nm 处吸光值的降低。反应包括100 mM Tris (pH 为 8), 10 mM MgCl₂, 2.2 mM ATP, 1 mM磷酸烯醇丙酮酸, 0.6 mg/ml NADH, 75 ml丙酮酸激酶, 105 ml 乳酸脱氢酶,和0.5 mM 基底肽(序列为EAIYAAPFAKKK)。加入足够的激酶开始反应，反应的激酶浓度达到30 nM，用微量滴定板分光光度计在30^oC进行30分钟，观察吸收率的降低。通过加入3.75 μl 溶于100% DMSO的VX-680 或单独DMSO，获得抑制常数。按如下公式计算K_i值，K_i = IC50/(1+[S]/K_d),[S]=[ATP]=2.2 mM, K_d=70 μM。假定作用于野生型和H396P Abl 激酶域的K_d(ATP)为70 μM，计算以上各值。
细胞实验	细胞系	CAL-62细胞
浓度	5-500 nM
处理时间	4天
方法	对照组CAL-62细胞培养在二甲亚砜和DMSO中，实验组加入500 nM VX-680，处理1到5天。加入不同浓度(5到500 nM) Aurora抑制剂处理不同ATC细胞4天，用来测定VX-680作用于细胞增殖的剂量依赖性。细胞在温育结束前加30 mM BrdU标记，脉冲2小时。通过比色免疫分析使用细胞增殖ELISA试剂盒分析BrdU的合并率。通过比较VX-680处理的细胞和对照组细胞得到结果，
动物实验	动物模型	右侧腋窝处皮下注射107 HL-60白血病细胞的雌性无胸腺NCr-nu鼠
剂量	50 mg/kg, 75 mg/kg
给药处理	腹腔注射

参考文献

[4] Cheetham GM, et al. Cancer Lett. 2007, 251(2), 323-329.

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客户使用selleck产品的实验数据

: 数据来源于[, 31, 3584-96]

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: 数据来源于[, 23, 244-53]

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