CFSE

目录号:S8269 批次号:S826902

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化学数据

化学结构式 别名 Carboxyfluorescein succinimidyl ester, 5(6)-Carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester, CFDA-SE, 5(6)-CFDA N-succinmidyl ester 储存条件
(自收到货起)
3年 -20°C(避光) 粉状
化学式

C29H19NO11

分子量 557.46 CAS号 150347-59-4
Solubility (25°C)* 体外 DMSO 100 mg/mL (179.38 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
体内(现配现用)
澄清溶液
5% DMSO 95% Corn oil
0.5mg/ml (0.90mM) 以1 mL工作液为例,取50μL 10mg/ml的澄清DMSO储备液加到950μL玉米油中,混合均匀。工作液请现配现用!
澄清溶液
5%DMSO 40%PEG300 5%Tween80 50%ddH2O
2.5mg/ml (4.48mM) 以 1 mL 工作液为例,取50μL50mg/ml的澄清DMSO储备液加到400μLPEG300中,混合均匀使其澄清;向上述体系中加入50μLTween80,混合均匀使其澄清;然后继续加入500μLddH2O定容至1mL。工作液请现配现用!
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble.
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

制备储备液

生物活性

产品描述 Carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE, 5(6)-Carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester, CFDA-SE, 5(6)-CFDA N-succinmidyl ester)是一种荧光细胞染料。CFSE常用于检测细胞增殖和迁移。CFSE具有细胞可透过性,通过其琥珀酰亚胺基团,与细胞内赖氨酸残基及其他胺来源共价结合。
体外研究

CFSE工作液的制备
1.1 原液的制备
将 1 mg CFSE 溶解在 0.1794 mL DMSO 中,以获得 10 mM CFSE。
注意:建议将储备液保存在-20℃或-80℃避光条件下,并避免反复冻融。
1.2 CFSE工作液的配制
用无血清细胞培养基或 PBS 稀释储备液,得到 5-10 μM 的 CFSE 工作液。
注:请根据实际情况调整CFSE工作液浓度。
细胞染色
2.1 对于悬浮细胞:4℃、1000g离心3-5分钟,弃上清。 用PBS清洗两次,每次5分钟。
对于贴壁细胞:弃去细胞培养基,加入胰蛋白酶解离细胞,制成单细胞悬液。 4℃ 1000 g 离心 3-5 分钟,弃上清。 用PBS清洗两次,每次5分钟。
2.2 加入1 mL CFSE工作液,室温孵育30分钟。
2.3 400 g、4℃离心3-4分钟,弃上清。
2.4 用PBS洗涤两次,每次5分钟。
2.5 用无血清细胞培养基或PBS重悬细胞,然后用荧光显微镜或流式细胞仪检测。

体内研究

体内实验中,用CFSE标记细胞是可行的,并且对标记细胞及邻近细胞几乎没有毒性。通过外周淋巴器官的T细胞恢复证明,CFSE在相对长期的迁移实验中具有一定优势[2]

推荐的实验操作(此推荐来自于公开的文献所以Selleck并不保证其有效性)

细胞实验 细胞系 人类红白血病细胞系K562, 小鼠淋巴瘤细胞株YAC-1, 人类乳腺癌细胞系MCF-7和人类黑色素瘤细胞系A375
浓度 2 µM, 3 µM, 4 µM, 5 µM, 10 µM和20 µM
处理时间 5, 6, 7, 8, 10 和 15分钟
方法

将储存于DMSO中的5 mM CFDA-SE用PBS稀释至不同的浓度(2 µM, 3 µM, 4 µM, 5 µM, 10 µM和20 µM),其总体积为1 mL。收集细胞系,用PBS洗涤细胞三次。向细胞中加入不同浓度的CFDA-SE,在37℃培养5, 6, 7, 8, 10和15分钟(置于摇床)。通过加入等体积的热失活胎牛血清1 min以终止标记反应。用PBS冲洗CFDA-SE标记的细胞两次,重新计数。

动物实验 动物模型 C57Bl/6小鼠
剂量 10 μM
给药处理 注射到胸腺叶中

CFSE在文献中得到引用

NLRC5 potentiates anti-tumor CD8+ T cells responses by activating interferon-β in endometrial cancer [ Transl Oncol, 2023, 36:101742] PubMed: 37531863
NLRC5 potentiates anti-tumor CD8+ T cells responses by activating interferon-β in endometrial cancer [ Transl Oncol, 2023, 10.1016/j.tranon.2023.101742] PubMed: 37531863
A Temporal PROTAC Cocktail-Mediated Sequential Degradation of AURKA Abrogates Acute Myeloid Leukemia Stem Cells [ Adv Sci (Weinh), 2022, e2104823] PubMed: 35652200
ATF3 Positively Regulates Antibacterial Immunity by Modulating Macrophage Killing and Migration Functions [ Front Immunol, 2022, 13:839502] PubMed: 35370996
Viperin deficiency promotes dendritic cell activation and function via NF-kappaB activation during Mycobacterium tuberculosis infection [ Inflamm Res, 2022, 10.1007/s00011-022-01638-3] PubMed: 36315280
Venetoclax enhances NK cell killing sensitivity of AML cells through the NKG2D/NKG2DL activation pathway [ Int Immunopharmacol, 2022, 104:108497] PubMed: 34999394
Chrysin Enhances Anti-tumor Immunity Response through IL-12-STAT4 Signal Pathway in B16F10 Melanoma Mouse Model [ Scand J Immunol, 2022, e13177] PubMed: 35484925
Blockade of AIM2 inflammasome or α1-AR ameliorates IL-1β release and macrophage-mediated immunosuppression induced by CAR-T treatment [ J Immunother Cancer, 2021, 9(1)e001466] PubMed: 33414262
Erythropoietin Promotes Infection Resolution and Lowers Antibiotic Requirements in E. coli- and S. aureus-Initiated Infections [ Front Immunol, 2021, 12:658715] PubMed: 33927725
Protective effect of isopsoralen on UVB-induced injury in HaCaT cells via the ER and p38MAPK signaling pathways [ Cancers (Basel), 2021, 13(21)5574] PubMed: 34771735

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