ETP-46464

目录号：S8050 批次号：S805002

化学数据

	别名	N/A	储存条件 (自收到货起)	3年 / -20°C / 粉状 1年 / -80°C / 溶于溶剂
	化学式	C₃₀H₂₂N₄O₂
	分子量	470.52	CAS号	1345675-02-6
Solubility (25°C)*	体外	DMSO	14 mg/mL (29.75 mM)
		Water	Insoluble
		Ethanol	Insoluble
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble. * Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

制备储备液

生物活性

产品描述

ETP-46464是一种有效的，选择性ATR抑制剂，IC50为25 nM。

靶点

mTOR ^[1]	ATR ^[1]	DNA-PK ^[1]	PI3Kα ^[1]	ATM ^[1]
0.6 nM	14 nM	36 nM	170 nM	545 nM

体外研究

ETP-46464在100nM几乎完全抑制ATR活性。ETP-46464抑制PI3Kα，mTOR和DNA-PKcs蛋白的活性，IC50值分别为170，0.6和36 nM。ETP-46464能够促进复制叉停滞的破损。ETP-46464导致在复制细胞中产生大量DNA损伤。 1μM ETP-46464抑制电离辐射诱导的G2 / M期检查点出现，并导致在细胞中微核或完全破碎的细胞核的存在。ETP-46464对p53缺陷的细胞尤其有毒性，这为复制应力产生的条件加剧，如细胞周期蛋白E的表达。^[1]

特征

ATR选择性抑制剂，特别对p53缺失的肿瘤细胞有毒性。由于其理想的药理特性，经常被用来作为探针药物。

推荐的实验操作(此推荐来自于公开的文献所以Selleck并不保证其有效性)

激酶实验	ATR激酶活性实验
激酶实验	用于体外激酶测定的Flag标记的ATR激酶选自293T细胞用抗-FLAG M2亲和凝胶免疫沉淀。作为底物，p53/1-101肽与GST融合蛋白是通过常规的GST纯化方法从IPTG刺激的BL21细菌里纯化的。简单地说，pBJF-flag-ATR质粒（野生型和激酶）转染入293T细胞。转染48小时后，细胞被溶解在TGN缓冲液（50 mM的Tris（pH值7.5），50 mM的甘油磷酸盐，150 mM氯化钠，10％甘油，1％吐温-20和蛋白酶抑制剂混合物）中，在冰上15分钟，之后离心分离，将上清液用非特异的兔IgG和蛋白A在旋转器上4度预清除1小时。接下来，将上清液置于M2-浆液4℃孵育2小时。对293T细胞融合的p100板，400μL缓冲液中，10微克的IgG，蛋白30μL的蛋白A浆液，和25μL M2磁珠被使用。抗FLAG M2磁珠在冰冷TNG中洗涤5次，在冰冷的LiCl缓冲液洗3次（100 mM pH值7.5的Tris，0.5M的LiCl）和冰冷的激酶缓冲液洗5次（10 mM HEPES（pH 7.5），50 mM氯化钠，10mM MgCl ₂，10mM Mn₂，1mM DTT）。最后一次洗涤后，IPs被分在适当数量的管中测定（每使用情况下约1块 293T P100）。100 μM的“冷”ATP被添加到缓冲液中进行激酶反应。只使用新鲜的IPs。在此之前制备含2微克的GST-p53和10 μ Ci of ³²P-γATP的混合物。抑制剂首先加入到珠。最后，25μL加入到每个管中。在30度反应进行20分钟，并通过添加15毫升4× NuPAGE SDS缓冲液，并煮沸5分钟停止。磁珠沉淀，上清液通过SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶回收。放射性凝胶略洗，直接暴露在基色荧光粉成像2小时至16小时。然后用STORM扫描仪检测其放射性。最后，凝胶染色，考马斯亮蓝检查蛋白水平。

参考文献

[1] Toledo LI, et al. Nat Struct Mol Biol, 2011, 18(6), 721-727.

ETP-46464在文献中得到引用

Calpain-2 mediates SARS-CoV-2 entry via regulating ACE2 levels [ mBio, 2024, e0228723.]	PubMed: 38349185
A function for ataxia telangiectasia and Rad3-related (ATR-kinase in cytokinetic abscission. [ iScience, 2023, 25(7)]	PubMed: None
Increased replication origin firing links replication stress to whole chromosomal instability in human cancer [ Cell Rep, 2022, 41(11):111836]	PubMed: 36516748
A function for ataxia telangiectasia and Rad3-related (ATR) kinase in cytokinetic abscission [ iScience, 2022, 25(7):104536]	PubMed: 35754741
ATAD5 promotes replication restart by regulating RAD51 and PCNA in response to replication stress. [ Nat Commun, 2019, 10(1):5718]	PubMed: 31844045
Mild replication stress causes chromosome mis-segregation via premature centriole disengagement. [ Nat Commun, 2019, 10(1):3585]	PubMed: 31395887
Targeting the cell cycle in head and neck cancer by Chk1 inhibition: a novel concept of bimodal cell death. [ Oncogenesis, 2019, 8(7):38]	PubMed: 31209198
DNA Damage Signaling Instructs Polyploid Macrophage Fate in Granulomas [Herrtwich L Cell, 2016, 167(5):1264-1280]	PubMed: 28084216

特定的存储和包装每个产品的信息在产品说明书上都有注明。大多数Selleck产品，在推荐的条件下存储可稳定保存两年。产品有时建议的储存温度不同，大多数建议储存在-20°C，抑制剂属于化学试剂，可在常温下运输储存两周左右。即使如此，我们保证产品的出货量将保持产品质量的条件下，一般都会放入冰袋。望阁下收到产品后，请按照产品数据表建议适当存储。

如果需要长期保存，请于零下二十度低温保存。禁止用于人体及治疗！

退换货政策

Selleck提供宽松的退换货承诺，努力为您营造最优的购物体验。每个订单Selleck只提供一次退换货服务，为了确保您的权益，请您仔细阅读以下内容：

1. 请在返还样品之前事先与我们取得联系，以确保产品是直接向我们或者当地代理商购买的；

2. 自收到货物起七天内，如因运输过程有问题或其他任何问题，您可以提出退换货要求；自收到货物起365天内，如因产品质量有问题，您可以提出退换货要求。

3. 请使用我们的快递账号进行退换货，您无需为此承担任何费用。

4. 如您已收到由Selleck开具的发票，则办理退货或订单金额发生变更的换货时，请将发票随商品一同返还给Selleck。请您妥善保管发票，如发票丢失，将无法办理退换货手续。

5. 对于合理的退换货要求，我们会在5个工作日内处理完成您的款项退还和新换货物的运输等，请耐心等待。