Pevonedistat (MLN4924)

目录号：S7109 批次号：S710902

化学数据

	别名		储存条件 (自收到货起)	3年 / -20°C / 粉状 1年 / -80°C / 溶于溶剂
	化学式	C₂₁H₂₅N₅O₄S
	分子量	443.52	CAS号	905579-51-3
Solubility (25°C)*	体外	DMSO	88 mg/mL (198.41 mM)
		Ethanol	88 mg/mL (198.41 mM)
		Water	Insoluble
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble. * Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

制备储备液

生物活性

产品描述

Pevonedistat (MLN4924)是Nedd8激活酶(NAE)的小分子抑制剂，IC50为4 nM。

靶点

NAE ^[1]
(Cell-free assay)

4 nM

体外研究

MLN4924在结构上与59-磷酸腺苷（AMP）相关，是NAE反应的紧密结合产物。MLN4924 (3 μM) 作用于HCT-116细胞裂解液，选择性抑制NAE。MLN4924 (3 μM) 作用于HCT-116细胞，抑制<9％的整体蛋白质周转。MLN4924作用于 HCT-116细胞，降低Ubc12-NEDD8硫酯和NEDD8-Cullin的结合物，这种作用存在剂量依赖性， IC50<0.1 μM，使CRL底物CDT1, p27 和 NRF2, 而不是非-CRL底物大量增加。MLN4924(3 μM)处理HCT-116细胞，在早期8小时，导致细胞在S期累积，在24小时的时候使含4N DNA含量的细胞具有显著比例。^[1] MLN4924 (3 μM) 作用于ABC DLBCL细胞，导致pIkappaBalpha的快速累积, 降低核p65含量, 降低核转录因子-kappaB (NF-kappaB) 转录活性, 和G(1) 期停滞, 最终导致诱导细胞凋亡,这些与有效抑制NF-kappaB 通路相一致。^[2] MLN4924 (1 μM) 通过稳定DNA复制因子Cdt 1，而触发DNA的复制，且抑制细胞增殖，Cdt 1是cullins 1 和 4的一种底物。MLN4924 (1 μM) 足够提升Cdt1长达4-5小时，足够诱导DNA复制，并激活细胞凋亡和衰老途径。^[3]MLN4924处理，诱导衰老表型的特性，如放大和扁平的细胞形态，证明与衰老相关的β-Gal染色阳性。MLN4924诱导的衰老与细胞对DNA损伤的反应相关，DNA损伤由DNA沉默蛋白CDT1和ORC1的积累导致，是CRL/SCF E3s失活的结果。MLN4924诱导的衰老是不可逆的，伴随着p21的持续积累，和持续激活的DNA损伤反应。^[4]

体内研究

MLN4924 (60 mg/kg)处理携带HCT-116肿瘤的小鼠，在早期30分钟，就降低NEDD8-cullin水平，这种作用存在剂量和时间依赖性，且处理1-2小时后维持最大作用效果。MLN4924 (60 mg/kg) 作用于携带HCT-116肿瘤的小鼠，提高NRF2 和 CDT1的稳态水平，这种作用存在剂量和时间依赖性。MLN4924(60 mg/kg) MLN4924 (60 mg/kg) 作用于携带HCT-116肿瘤的小鼠，导致DNA损伤，提高磷酸化的CHK1水平。MLN4924 按BID schedule at 按30 mg/kg 和 60 mg/kg 剂量处理携带HCT-116肿瘤的小鼠，每天处理2次，抑制肿瘤生长，T/C值分别为0.36 和 0.15。^[1]MLN4924 (60 mg/kg)处理携带人类移植瘤ABC-和GCB-DLBCL的小鼠，抑制NAE 通路生物标志物，且完全抑制肿瘤生长。MLN4924 (60 mg/kg)处理携带人类移植瘤ABC-DLBCL的小鼠，抑制NF-kappaB通路，且伴随着肿瘤衰退。^[2]

特征

MLN4924是NAE抑制剂，并产生一个酶催化的共价的NEDD8-MLN4924加合物。

激酶实验	在体外E1激活酶实验
使用时间分辨荧光能量转移实验格式测量体外NAE活性。酶促反应（包含50 μL 50 mM HEPES, pH 7.5, 0.05% BSA, 5 mM MgCl₂, 20 μM ATP, 250 μM 谷胱甘肽,10 nM Ubc12-GST, 75 nM NEDD8–Flag和 0.3 nM 重组人类NAE酶）在384孔板中24°C下温育90分钟，然后加入25 μL终止/检测Buffer(0.1 M HEPES, pH 7.5, 0.05% Tween20, 20 mM EDTA, 410 mM KF, 0.53 nM Europium-Cryptate-标记的单克隆Flag-M2特异性抗体和8.125 μg/mL PHYCOLINK别藻蓝蛋白(XL-APC)-标记的GST-特异性抗体)终止反应。在24°C下温育2小时后，在LJL分析仪HT多模式仪器上使用时间分辨荧光法读取。使用相似的实验方法测量其他 E1 酶。
细胞实验	细胞系	HCT-116 细胞
浓度	3 μM
处理时间	72小时
方法	细胞悬浮液按每孔3,000-8,000个细胞接种在96孔培养板中，在37°C下温育过夜。在完全生长培养基中加入MLN4924，与细胞在37°C下温育72小时。使用 ATPlite法测量细胞数。
动物实验	动物模型	携带 HCT-116移植瘤的小鼠
剂量	60 mg/kg
给药处理	皮下注射

参考文献

[4] Jia L, et al. Neoplasia, 2011, 13(6), 561-569.

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客户使用selleck产品的实验数据

: 数据来源于[Data independently produced by , , Leukemia, 2019, 33(1):171-180]

: 数据来源于[Data independently produced by , , J Exp Clin Cancer Res, 2018, 37(1):165]

: 数据来源于[Data independently produced by , , J Immunol, 2016, 196(7):3117-23]