Mirin

Mirin是有效的Mre11–Rad50–Nbs1(MRN)复合体抑制剂,能够抑制Mre11相关的外切酶活性。Mirin 可抑制MRN依赖的ATM的激活。

Mirin Chemical Structure

Mirin Chemical Structure

CAS: 1198097-97-0

规格 价格 库存 购买数量
10mM (1mL in DMSO) RMB 1040.13 现货
10mg RMB 794.41 现货
50mg RMB 2432.33 现货
200mg RMB 5626.23 现货
1g RMB 16298.17 现货
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ATM/ATR抑制剂选择性比较

生物活性

产品描述 Mirin是有效的Mre11–Rad50–Nbs1(MRN)复合体抑制剂,能够抑制Mre11相关的外切酶活性。Mirin 可抑制MRN依赖的ATM的激活。
靶点
MRN [1] ATM [1]
体外研究(In Vitro)
体外研究活性

Mirin抑制了DSB诱导的ATM活化,ATM依赖性的下游靶点Nbs1和Chk2的磷酸化以及MRN依赖性的ATM在Ser1981位点的自磷酸化。Mirin还抑制了TOSA4细胞的G2检查点以及HEK293细胞中同源依赖性的DNA修复。[1] 在整合有HPV16 (SiHa)的细胞中,Mirin增加了HPV episomes对PA25的敏感性,使PA25的IC50降低了5倍。[2] mirin的预处理还降低了cisplatin处理的293细胞的细胞活性并且抑制了增殖细胞核抗原的表达。[3]

激酶实验 核酶试验
寡聚核苷酸非发卡底物的反应液包含25 mM MOPS (pH 7.0,60 mM KCl,0.2% Tween 20,2 mM DTT,1 mM或5 nM MnCl2 (或者5 mM MgCl2,或者5 mM CaCl2),0.1 pmol的DNA底物,以及0.3 pmol的Mre11 (或者相等数量的Mre11和Rad50混合物)终体积10 μl,37°C孵育30 min。然后加入SDS,EDTA和proteinase K使其终浓度分别达到0.2%,5 mM和0.1 mg/ml,继续孵育15 min。取4 μl的反应液与4 μl的甲酰胺loading buffer混合,然后放到含有10%丙烯酰胺和7 M尿素的凝胶中。电泳之后,用荧光成像系统分析。寡聚核苷酸发卡底物的反应液与非发卡底物基本相同,不同的是要加入3 pmolMre11以及反应条件是室温孵育过夜。非同源末端反应液包含25 mM MOPS (pH 7.0),60 mM KCl,0.2% Tween 20,2 mM DTT,4 mM MgCl2,2 mM MnCl2,0.5 mM ATP,4 ng质粒DNA 10%聚乙烯乙二醇,0.01 pmol人源DNA连接酶I,以及0.06 pmol Mre11或者0.1单位E. coli 外切酶 III,终体积10 μl。在37°C孵育25 min后,加入Tween 20使其终浓度达到0.5%,用引物DAR5和DAR147进行PCR扩增。PCR的产物用TA cloning kit克隆并且用自动的ABI Capillary Genetic Analyzer进行测序。
细胞实验 细胞系 HEK 293 cells
浓度 100 μM
孵育时间 24 h
方法

人源胚胎肾细胞HEK293用添加有5热灭活胎牛血清,青霉素(100 U/mL),链霉素(100 mg/mL)的RPMI-1640培养基在含有5% CO2,37 °C的条件下进行培养。每个48小时更换新的培养基。细胞接种到96-孔板上,用mirin(100 μM)预处理一小时,然后加入cisplatin后再孵育8小时和24小时。然后利用EZ-Cytox cell viability assay kit进行MTT测试,MTT的降低值用酶标仪在450 nm波长下进行测定。

实验图片 检测方法 检测指标 实验图片 PMID
Growth inhibition assay Cell viability 18176557

化学信息&溶解度

分子量 220.25 分子式

C10H8N2O2S

CAS号 1198097-97-0 SDF Download Mirin SDF
Smiles OC1=CC=C(C=C1)\C=C2/SC(=N)NC2=O
储存条件(自收到货起)

体外溶解度
批次:

DMSO : 44 mg/mL ( (199.77 mM); DMSO吸湿会降低化合物溶解度,请使用新开封DMSO)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

摩尔浓度计算器

体内溶解度
批次:

现配现用,请按从左到右的顺序依次添加,澄清后再加入下一溶剂

动物体内配方计算器

实验计算

摩尔浓度计算器

质量 浓度 体积 分子量

动物体内配方计算器(澄清溶液)

第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)

mg/kg g μL

第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系Selleck为您提供正确的澄清溶液配方)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

计算结果:

工作液浓度: mg/ml;

DMSO母液配制方法: mg 药物溶于μL DMSO溶液(母液浓度mg/mL,:如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请先联系Selleck);

体内配方配制方法:μL DMSO母液,加入μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入μL ddH2O,混匀澄清。

体内配方配制方法:μL DMSO母液,加入μL Corn oil,混匀澄清。

注意:1. 首先保证母液是澄清的;
2.一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。

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