CHMP4B Antibody [P12D13] Datasheet

生物描述

特异性	CHMP4B Antibody [P12D13] 可检测内源性 CHMP4B 总蛋白水平。
背景	CHMP4B（带电多泡体蛋白4B）是内体分选转运复合物III（ESCRT-III）的核心组分，该复合物在多种细胞过程中执行膜裂解事件，包括多泡体形成、胞质分裂、病毒出芽、核膜密封和质膜修复。CHMP4B属于高度保守的ESCRT-III蛋白家族，是酵母Snf7的人类同源蛋白，具有相似的分子结构：带正电荷的N端区域由两个螺旋组成，形成一个70埃的发夹结构，该结构对于膜结合和寡聚化至关重要；中央螺旋形成一个不对称的反平行四螺旋束；带负电荷的C端自抑制区域包含MIT相互作用基序，用于募集VPS4 ATPase。该蛋白主要以折叠的封闭构象存在于细胞质中，其C端酸性区域通过分子内结合N端发夹结构维持自身抑制状态，直至激活信号触发构象变化，解除抑制并暴露膜相互作用位点。CHMP4B通过不同的上游衔接蛋白募集到靶膜，具体情况取决于细胞环境——在多泡体生物发生过程中，ESCRT-II通过与CHMP6（Vps20）相互作用介导CHMP4B的激活；在胞质分裂过程中，衔接蛋白CEP55将ESCRT-I和ALIX募集到中体，ALIX通过结合CHMP4B的C端自身抑制区域直接激活CHMP4B；在HIV-1出芽过程中，病毒Gag蛋白劫持ALIX和ESCRT-I至质膜出芽位点，启动CHMP4B的组装。激活后，CHMP4B聚合形成膜附着丝状体，这些丝状体根据生物学环境的不同，组装成环状支架、螺旋结构或延伸的聚合物。这些丝状体促进或稳定膜的负曲率，而负曲率对于向外出芽和膜颈收缩至关重要。在胞质分裂过程中，CHMP4B丝状体组织成两个不同的池状结构——初始组装发生在位于中体中心两侧的皮质环中，与ESCRT-I的定位重叠；然后在胞质分裂前，CHMP4B迅速重新分布到距离中体约1微米的次级收缩位点，在那里形成点状结构，这些点状结构在空间和时间上与微管变窄和膜断裂相对应。该蛋白通过同源寡聚化形成延伸的Snf7/CHMP4聚合物来启动ESCRT-III的组装，这些聚合物随后被CHMP3 (Vps24) 封端，并募集CHMP2 (Vps2)，从而建立有序的组装途径。其中，CHMP4B是ESCRT-III的主要组分，决定了丝状体的大小和化学计量比。CHMP4B丝状体优先结合于扁平膜或正弯曲的膜管，通过逐渐收缩使膜颈变形。随着丝状体形成逐渐变窄的螺旋结构，膜颈直径减小到临界阈值以下，从而促进膜的自发裂变。 AAA-ATPase VPS4 通过其 MIT 结构域与 C 端 MIM 基序的直接相互作用被募集到 CHMP4B 丝状体上，组装成活性十二聚体复合物。该复合物通过 VPS4 中心孔转运亚基，消耗 ATP，从而解离 CHMP4B 聚合物，并将 CHMP4B 重置到其自身抑制的胞质状态，以进行后续的膜裂解。CC2D1A 作为 CHMP4B 活性的负调控因子，以纳摩尔级亲和力结合 N 端螺旋发夹结构，形成一对一复合物。这种相互作用抑制 CHMP4B 聚合，并构成控制 ESCRT-III 丝状体形成的调控检查点。CHMP4B 通过与 ESCRT-III 蛋白 CHMP1B 相互作用募集微管切割酶 spastin，协调胞质分裂，将膜裂解与微管切割偶联，从而实现子细胞的完全分离。该蛋白对于外泌体释放货物蛋白（包括聚糖结合蛋白、CD63 和聚糖蛋白）至关重要，它通过介导多囊泡体内腔内囊泡的形成，最终与质膜融合，释放外泌体。CHMP4B 与 spastin 协同作用，促进后期分裂过程中核膜的密封和纺锤体的解体，使其功能超越了经典的膜裂解，延伸至核膜动力学。该蛋白定位于初级纤毛，维持纤毛的结构完整性，CHMP4B 的缺失会干扰正常的纤毛形成和功能，这体现了其不同于内体分选的作用。在调控性坏死和坏死性凋亡过程中，CHMP4B 通过被募集到膜破裂位点参与质膜修复，ESCRT-III 的组装维持膜的完整性，从而使细胞即使在坏死过程中也能继续进行信号传导和细胞因子分泌。 HIV-1 和其他慢病毒利用 CHMP4B 进行病毒颗粒释放。它们通过 ALIX 介导的与病毒辅助蛋白 p6 的相互作用，引导 CHMP4B 在出芽位点组装。CHMP4B 在连接出芽病毒颗粒的膜颈处形成环状条纹，这些条纹在 VPS4 介导的 ESCRT-III 解体时断裂。缺乏自身抑制区域的显性负性 C 端截短的 CHMP4B 突变体能够组成性聚合，并通过形成对 VPS4 解体具有抵抗力的超稳定丝状结构，有效抑制 HIV-1 的出芽、多泡体形成和胞质分裂。CHMP4B 在肝细胞癌中表达升高，与增殖增加和阿霉素耐药性相关；此外，CHMP4B 水平升高与脑出血后神经元凋亡相关，这表明 CHMP4B 表达可能是一个潜在的预后标志物和治疗靶点。

特异性

CHMP4B Antibody [P12D13] 可检测内源性 CHMP4B 总蛋白水平。

背景

CHMP4B（带电多泡体蛋白4B）是内体分选转运复合物III（ESCRT-III）的核心组分，该复合物在多种细胞过程中执行膜裂解事件，包括多泡体形成、胞质分裂、病毒出芽、核膜密封和质膜修复。CHMP4B属于高度保守的ESCRT-III蛋白家族，是酵母Snf7的人类同源蛋白，具有相似的分子结构：带正电荷的N端区域由两个螺旋组成，形成一个70埃的发夹结构，该结构对于膜结合和寡聚化至关重要；中央螺旋形成一个不对称的反平行四螺旋束；带负电荷的C端自抑制区域包含MIT相互作用基序，用于募集VPS4 ATPase。该蛋白主要以折叠的封闭构象存在于细胞质中，其C端酸性区域通过分子内结合N端发夹结构维持自身抑制状态，直至激活信号触发构象变化，解除抑制并暴露膜相互作用位点。CHMP4B通过不同的上游衔接蛋白募集到靶膜，具体情况取决于细胞环境——在多泡体生物发生过程中，ESCRT-II通过与CHMP6（Vps20）相互作用介导CHMP4B的激活；在胞质分裂过程中，衔接蛋白CEP55将ESCRT-I和ALIX募集到中体，ALIX通过结合CHMP4B的C端自身抑制区域直接激活CHMP4B；在HIV-1出芽过程中，病毒Gag蛋白劫持ALIX和ESCRT-I至质膜出芽位点，启动CHMP4B的组装。激活后，CHMP4B聚合形成膜附着丝状体，这些丝状体根据生物学环境的不同，组装成环状支架、螺旋结构或延伸的聚合物。这些丝状体促进或稳定膜的负曲率，而负曲率对于向外出芽和膜颈收缩至关重要。在胞质分裂过程中，CHMP4B丝状体组织成两个不同的池状结构——初始组装发生在位于中体中心两侧的皮质环中，与ESCRT-I的定位重叠；然后在胞质分裂前，CHMP4B迅速重新分布到距离中体约1微米的次级收缩位点，在那里形成点状结构，这些点状结构在空间和时间上与微管变窄和膜断裂相对应。该蛋白通过同源寡聚化形成延伸的Snf7/CHMP4聚合物来启动ESCRT-III的组装，这些聚合物随后被CHMP3 (Vps24) 封端，并募集CHMP2 (Vps2)，从而建立有序的组装途径。其中，CHMP4B是ESCRT-III的主要组分，决定了丝状体的大小和化学计量比。CHMP4B丝状体优先结合于扁平膜或正弯曲的膜管，通过逐渐收缩使膜颈变形。随着丝状体形成逐渐变窄的螺旋结构，膜颈直径减小到临界阈值以下，从而促进膜的自发裂变。 AAA-ATPase VPS4 通过其 MIT 结构域与 C 端 MIM 基序的直接相互作用被募集到 CHMP4B 丝状体上，组装成活性十二聚体复合物。该复合物通过 VPS4 中心孔转运亚基，消耗 ATP，从而解离 CHMP4B 聚合物，并将 CHMP4B 重置到其自身抑制的胞质状态，以进行后续的膜裂解。CC2D1A 作为 CHMP4B 活性的负调控因子，以纳摩尔级亲和力结合 N 端螺旋发夹结构，形成一对一复合物。这种相互作用抑制 CHMP4B 聚合，并构成控制 ESCRT-III 丝状体形成的调控检查点。CHMP4B 通过与 ESCRT-III 蛋白 CHMP1B 相互作用募集微管切割酶 spastin，协调胞质分裂，将膜裂解与微管切割偶联，从而实现子细胞的完全分离。该蛋白对于外泌体释放货物蛋白（包括聚糖结合蛋白、CD63 和聚糖蛋白）至关重要，它通过介导多囊泡体内腔内囊泡的形成，最终与质膜融合，释放外泌体。CHMP4B 与 spastin 协同作用，促进后期分裂过程中核膜的密封和纺锤体的解体，使其功能超越了经典的膜裂解，延伸至核膜动力学。该蛋白定位于初级纤毛，维持纤毛的结构完整性，CHMP4B 的缺失会干扰正常的纤毛形成和功能，这体现了其不同于内体分选的作用。在调控性坏死和坏死性凋亡过程中，CHMP4B 通过被募集到膜破裂位点参与质膜修复，ESCRT-III 的组装维持膜的完整性，从而使细胞即使在坏死过程中也能继续进行信号传导和细胞因子分泌。 HIV-1 和其他慢病毒利用 CHMP4B 进行病毒颗粒释放。它们通过 ALIX 介导的与病毒辅助蛋白 p6 的相互作用，引导 CHMP4B 在出芽位点组装。CHMP4B 在连接出芽病毒颗粒的膜颈处形成环状条纹，这些条纹在 VPS4 介导的 ESCRT-III 解体时断裂。缺乏自身抑制区域的显性负性 C 端截短的 CHMP4B 突变体能够组成性聚合，并通过形成对 VPS4 解体具有抵抗力的超稳定丝状结构，有效抑制 HIV-1 的出芽、多泡体形成和胞质分裂。CHMP4B 在肝细胞癌中表达升高，与增殖增加和阿霉素耐药性相关；此外，CHMP4B 水平升高与脑出血后神经元凋亡相关，这表明 CHMP4B 表达可能是一个潜在的预后标志物和治疗靶点。

使用信息

抗体应用

WB, IP

稀释比例

WB	IP
1:1000	1:50

反应性

Human, Mouse, Rat

抗体类型

Rabbit Monoclonal Antibody

MW

19 kDa

储存液配方

PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件
(自收到货起)

-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

实验方法

文献参考

Application Data

WB

Validated by Selleck

Lane 1: 293T, Lane 2: 293T (CHMP4A(human) transfected)