PTPN14 Antibody [H23F7] Datasheet

生物描述

特异性	PTPN14 Antibody [H23F7] 可检测内源性 PTPN14 总蛋白水平。
背景	PTPN14（酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型14；Pez/PTPD2/PTP36）是一种胞质非受体蛋白酪氨酸磷酸酶，属于4.1/FERM结构域亚家族，它通过直接调控Hippo效应蛋白YAP1和黏附相关底物，整合细胞间接触、细胞骨架组织和生长控制。该蛋白包含一个与4.1/ezrin/radixin/moesin相关的N端FERM结构域，该结构域将PTPN14锚定于质膜和皮质肌动蛋白网络；其后是延伸的低复杂度连接区，该连接区含有串联的PPXY (PY)基序，介导与WW结构域蛋白的结合；以及一个C端经典的PTP催化结构域，该结构域决定了PTPN14的磷酸酶活性，但对于其一些关键的支架功能并非必需。 PTPN14 通过其两个 PY 基序与 YAP1 直接结合，这两个 PY 基序分别与 YAP1 的两个 WW 结构域结合，其中第二个 WW 结构域对这种相互作用起主导作用；这种结合在细胞密度较高的情况下将 YAP1 从细胞核转移到细胞质中，仅间接地通过上游 LATS 激酶降低 YAP1 在 Ser127 位的磷酸化，并抑制 YAP1 对增殖和抗凋亡靶点（如 CTGF 和 AREG）的转录共激活活性，从而增强接触抑制并限制乳腺上皮 3D 培养中的腺泡生长。与 YAP1 的相互作用以及驱动其从细胞核到细胞质的转位的能力依赖于完整的 PY 基序和物理复合物的形成，但不需要 PTPN14 的催化活性，因为 Cys1121Ser 磷酸酶失活突变体保留了将 YAP1 隔离在细胞质中并挽救由 PTPN14 缺失引起的异常腺泡形成的能力，而 PY 基序缺失突变体则无法结合 YAP1，不能纠正 YAP1 的核积累，也不能恢复正常的腺泡结构。 PTPN14 水平及其对 YAP1 的抑制作用受细胞密度通过 CRL2^LRR1^ E3 泛素连接酶复合物进行翻译后调控：在低密度下，含有 LRR1 的 CRL2 结合 PTPN14，促进其多聚泛素化和蛋白酶体降解，维持较低的 PTPN14 丰度，同时 YAP1 主要位于细胞核内，并具有较高的增殖潜能；在汇合时，LRR1 表达降低，PTPN14 泛素化和周转减少，PTPN14 积累，YAP1 滞留在细胞质中，其方式与经典的 Hippo 激酶-14-3-3 依赖性隔离类似，但机制不同。 PTPN14 也定位于黏附连接和皮质肌动蛋白，其 FERM 结构域支持与 E-钙黏蛋白/β-连环蛋白复合物的结合。在内皮细胞中，PTPN14 介导黏附连接处 β-连环蛋白的去磷酸化，从而稳定 E-钙黏蛋白-β-连环蛋白的连接，并有助于维持屏障完整性和调节细胞运动。此外，PTPN14 与 VEGFR3 的相互作用以及在淋巴管生成中的作用，使其与血管和淋巴管的发育密切相关。在非转化乳腺上皮细胞中，通过 shRNA 敲低 PTPN14 会导致细胞发生锚定非依赖性生长，破坏极化腺泡结构，导致过度增殖和多腺泡结构形成。而同时敲低 YAP1 则可逆转这些致癌表型，表明 YAP1 是 PTPN14 抑癌活性的关键下游效应因子。

特异性

PTPN14 Antibody [H23F7] 可检测内源性 PTPN14 总蛋白水平。

背景

PTPN14（酪氨酸蛋白磷酸酶非受体型14；Pez/PTPD2/PTP36）是一种胞质非受体蛋白酪氨酸磷酸酶，属于4.1/FERM结构域亚家族，它通过直接调控Hippo效应蛋白YAP1和黏附相关底物，整合细胞间接触、细胞骨架组织和生长控制。该蛋白包含一个与4.1/ezrin/radixin/moesin相关的N端FERM结构域，该结构域将PTPN14锚定于质膜和皮质肌动蛋白网络；其后是延伸的低复杂度连接区，该连接区含有串联的PPXY (PY)基序，介导与WW结构域蛋白的结合；以及一个C端经典的PTP催化结构域，该结构域决定了PTPN14的磷酸酶活性，但对于其一些关键的支架功能并非必需。 PTPN14 通过其两个 PY 基序与 YAP1 直接结合，这两个 PY 基序分别与 YAP1 的两个 WW 结构域结合，其中第二个 WW 结构域对这种相互作用起主导作用；这种结合在细胞密度较高的情况下将 YAP1 从细胞核转移到细胞质中，仅间接地通过上游 LATS 激酶降低 YAP1 在 Ser127 位的磷酸化，并抑制 YAP1 对增殖和抗凋亡靶点（如 CTGF 和 AREG）的转录共激活活性，从而增强接触抑制并限制乳腺上皮 3D 培养中的腺泡生长。与 YAP1 的相互作用以及驱动其从细胞核到细胞质的转位的能力依赖于完整的 PY 基序和物理复合物的形成，但不需要 PTPN14 的催化活性，因为 Cys1121Ser 磷酸酶失活突变体保留了将 YAP1 隔离在细胞质中并挽救由 PTPN14 缺失引起的异常腺泡形成的能力，而 PY 基序缺失突变体则无法结合 YAP1，不能纠正 YAP1 的核积累，也不能恢复正常的腺泡结构。 PTPN14 水平及其对 YAP1 的抑制作用受细胞密度通过 CRL2^LRR1^ E3 泛素连接酶复合物进行翻译后调控：在低密度下，含有 LRR1 的 CRL2 结合 PTPN14，促进其多聚泛素化和蛋白酶体降解，维持较低的 PTPN14 丰度，同时 YAP1 主要位于细胞核内，并具有较高的增殖潜能；在汇合时，LRR1 表达降低，PTPN14 泛素化和周转减少，PTPN14 积累，YAP1 滞留在细胞质中，其方式与经典的 Hippo 激酶-14-3-3 依赖性隔离类似，但机制不同。 PTPN14 也定位于黏附连接和皮质肌动蛋白，其 FERM 结构域支持与 E-钙黏蛋白/β-连环蛋白复合物的结合。在内皮细胞中，PTPN14 介导黏附连接处 β-连环蛋白的去磷酸化，从而稳定 E-钙黏蛋白-β-连环蛋白的连接，并有助于维持屏障完整性和调节细胞运动。此外，PTPN14 与 VEGFR3 的相互作用以及在淋巴管生成中的作用，使其与血管和淋巴管的发育密切相关。在非转化乳腺上皮细胞中，通过 shRNA 敲低 PTPN14 会导致细胞发生锚定非依赖性生长，破坏极化腺泡结构，导致过度增殖和多腺泡结构形成。而同时敲低 YAP1 则可逆转这些致癌表型，表明 YAP1 是 PTPN14 抑癌活性的关键下游效应因子。

使用信息

抗体应用

WB

稀释比例

WB

1:1000

反应性

Human, Mouse, Rat

抗体类型

Rabbit Monoclonal Antibody

MW

160 kDa

储存液配方

PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件
(自收到货起)

-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

实验方法

文献参考

Application Data

WB

Validated by Selleck

Lane 1: ACHN, Lane 2: MDA-MB-231, Lane 3: HT-1080