REST Antibody [B2F15] Datasheet

生物描述

特异性	REST Antibody [B2F15] 可检测内源性 REST 总蛋白水平。
背景	REST（RE1沉默转录因子），又称NRSF，是一种Kruppel型锌指转录抑制因子，它结合保守的21-23 bp RE1/NRSE基序，并在发育、成年脑可塑性和神经退行性疾病中作为神经元基因表达的主要负调控因子发挥作用。该蛋白包含八个Cys2-His2锌指，排列成一个中央DNA结合域，该结合域与启动子和增强子区域的RE1元件接触。其两侧是N端和C端抑制结构域，这些结构域可募集不同的共抑制因子平台，包括mSin3A-HDAC1/2和CoREST-HDAC1/2-LSD1-G9a复合物，从而协调组蛋白去乙酰化、H3K4去甲基化和H3K9三甲基化，以压缩染色质并沉默靶基因位点。 REST蛋白占据胚胎干细胞、神经祖细胞和分化神经元中数千个基因组位点，直接抑制编码离子通道、突触囊泡蛋白、神经递质受体、转运蛋白和神经元特异性microRNA的基因，从而调节突触形成、轴突导向、膜兴奋性和结构可塑性，同时还靶向人脑中的非神经元通路，例如JAK-STAT和HIF-1信号通路。REST在多能干细胞和神经祖细胞中高表达，维持非神经元转录程序并阻止过早的神经发生；在终末神经元分化过程中，REST表达以时空控制的方式下降，从而解除对神经元基因的抑制并获得成熟神经元表型；祖细胞中持续存在的REST会使细胞命运偏向胶质细胞谱系并影响胶质细胞生成。 REST 的丰度和活性受酪蛋白激酶 1-βTrCP 依赖的泛素-蛋白酶体降解、溶酶体-自噬周转以及核质转运的动态调控。在缺血、癫痫和亨廷顿病等情况下，成熟神经元中 REST 会发生依赖于环境的核内积累；而在基础状态下，亨廷顿蛋白-HAP1-RILP 复合物则将其隔离于细胞质中。在衰老的人类皮层和海马中，兴奋性神经元中的 REST 以低水平重新激活，并结合促凋亡、氧化应激和阿尔茨海默病相关基因（包括编码 BAX、PUMA、TNF 通路衔接蛋白、γ-分泌酶组分和 CDK5 调节因子的基因）的启动子，抑制它们的表达，从而赋予神经元抗应激能力，降低其对淀粉样蛋白和 tau 蛋白病理的易感性，并使其即使在存在阿尔茨海默病样病变的情况下也能保持认知功能和延长寿命。衰老神经元中REST的缺失或减少与神经元寿命缩短以及认知功能从正常向轻度认知障碍和阿尔茨海默病转变相关；额颞叶痴呆和路易体痴呆中也观察到REST的耗竭，这支持了REST在晚年生活中普遍存在的神经保护作用。相反，缺血后海马神经元或颞叶癫痫中REST的过度激活会导致部分REST靶基因（如GluA2、GluN2B、KCC2和HCN通道）的表观遗传沉默，从而促进Ca²⁺通透性AMPA受体的表达、氯离子稳态的改变以及神经网络的过度兴奋，最终导致兴奋性毒性神经元死亡和癫痫发生。 REST依赖性重塑也延伸至非编码RNA网络，抑制神经元特异性microRNA（这些microRNA本身靶向多个非神经元和凋亡基因），从而扩大REST在代谢、炎症和存活通路中的作用范围；唐氏综合征脑组织、类器官和神经细胞的转录组分析发现，REST靶基因集富集于JAK-STAT、HIF-1、轴突导向和脂肪酸代谢通路，表明REST水平的改变与神经源性向胶质源性转变、星形胶质细胞活化和代谢失衡有关。在神经退行性疾病中，REST整合缺氧和炎症信号与表观遗传输出：在缺氧和缺血条件下，核内REST被诱导并与神经元存活基因的RE1位点结合，同时还与TET3和NSD3相互作用，促进特定位点的5-羟甲基胞嘧啶和H3K36me3修饰，表明REST具有抑制或激活转录的双重能力，具体取决于辅助因子的组装。

特异性

REST Antibody [B2F15] 可检测内源性 REST 总蛋白水平。

背景

REST（RE1沉默转录因子），又称NRSF，是一种Kruppel型锌指转录抑制因子，它结合保守的21-23 bp RE1/NRSE基序，并在发育、成年脑可塑性和神经退行性疾病中作为神经元基因表达的主要负调控因子发挥作用。该蛋白包含八个Cys2-His2锌指，排列成一个中央DNA结合域，该结合域与启动子和增强子区域的RE1元件接触。其两侧是N端和C端抑制结构域，这些结构域可募集不同的共抑制因子平台，包括mSin3A-HDAC1/2和CoREST-HDAC1/2-LSD1-G9a复合物，从而协调组蛋白去乙酰化、H3K4去甲基化和H3K9三甲基化，以压缩染色质并沉默靶基因位点。 REST蛋白占据胚胎干细胞、神经祖细胞和分化神经元中数千个基因组位点，直接抑制编码离子通道、突触囊泡蛋白、神经递质受体、转运蛋白和神经元特异性microRNA的基因，从而调节突触形成、轴突导向、膜兴奋性和结构可塑性，同时还靶向人脑中的非神经元通路，例如JAK-STAT和HIF-1信号通路。REST在多能干细胞和神经祖细胞中高表达，维持非神经元转录程序并阻止过早的神经发生；在终末神经元分化过程中，REST表达以时空控制的方式下降，从而解除对神经元基因的抑制并获得成熟神经元表型；祖细胞中持续存在的REST会使细胞命运偏向胶质细胞谱系并影响胶质细胞生成。 REST 的丰度和活性受酪蛋白激酶 1-βTrCP 依赖的泛素-蛋白酶体降解、溶酶体-自噬周转以及核质转运的动态调控。在缺血、癫痫和亨廷顿病等情况下，成熟神经元中 REST 会发生依赖于环境的核内积累；而在基础状态下，亨廷顿蛋白-HAP1-RILP 复合物则将其隔离于细胞质中。在衰老的人类皮层和海马中，兴奋性神经元中的 REST 以低水平重新激活，并结合促凋亡、氧化应激和阿尔茨海默病相关基因（包括编码 BAX、PUMA、TNF 通路衔接蛋白、γ-分泌酶组分和 CDK5 调节因子的基因）的启动子，抑制它们的表达，从而赋予神经元抗应激能力，降低其对淀粉样蛋白和 tau 蛋白病理的易感性，并使其即使在存在阿尔茨海默病样病变的情况下也能保持认知功能和延长寿命。衰老神经元中REST的缺失或减少与神经元寿命缩短以及认知功能从正常向轻度认知障碍和阿尔茨海默病转变相关；额颞叶痴呆和路易体痴呆中也观察到REST的耗竭，这支持了REST在晚年生活中普遍存在的神经保护作用。相反，缺血后海马神经元或颞叶癫痫中REST的过度激活会导致部分REST靶基因（如GluA2、GluN2B、KCC2和HCN通道）的表观遗传沉默，从而促进Ca²⁺通透性AMPA受体的表达、氯离子稳态的改变以及神经网络的过度兴奋，最终导致兴奋性毒性神经元死亡和癫痫发生。 REST依赖性重塑也延伸至非编码RNA网络，抑制神经元特异性microRNA（这些microRNA本身靶向多个非神经元和凋亡基因），从而扩大REST在代谢、炎症和存活通路中的作用范围；唐氏综合征脑组织、类器官和神经细胞的转录组分析发现，REST靶基因集富集于JAK-STAT、HIF-1、轴突导向和脂肪酸代谢通路，表明REST水平的改变与神经源性向胶质源性转变、星形胶质细胞活化和代谢失衡有关。在神经退行性疾病中，REST整合缺氧和炎症信号与表观遗传输出：在缺氧和缺血条件下，核内REST被诱导并与神经元存活基因的RE1位点结合，同时还与TET3和NSD3相互作用，促进特定位点的5-羟甲基胞嘧啶和H3K36me3修饰，表明REST具有抑制或激活转录的双重能力，具体取决于辅助因子的组装。

使用信息

抗体应用

IHC, IF

稀释比例

IHC	IF
1:50 - 1:200	1:150-1:700

反应性

Human

抗体类型

Mouse Monoclonal Antibody

MW

122 kDa

储存液配方

PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件
(自收到货起)

-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

实验方法

文献参考

Application Data

IHC

Validated by Selleck

Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human tonsils tissue with F4056 at 1:50 dilution.