Alisertib (MLN8237)

目录号：S1133 批次号：S113311

化学数据

	别名	N/A	储存条件 (自收到货起)	3年 / -20°C / 粉状 1年 / -80°C / 溶于溶剂
	化学式	C₂₇H₂₀ClFN₄O₄
	分子量	518.92	CAS号	1028486-01-2
Solubility (25°C)*	体外	DMSO	35 mg/mL (67.44 mM)
		Water	Insoluble
		Ethanol	Insoluble
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble. * Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

制备储备液

生物活性

产品描述

Alisertib (MLN8237)是一种选择性Aurora A抑制剂，无细胞试验中IC50为1.2 nM，作用于Aurora A比作用于Aurora B选择性强200倍以上。Alisertib 可诱导细胞周期阻滞、细胞凋亡与自噬。Phase 3。

靶点

Aurora A ^[1]
(Cell-free assay)

1.2 nM

体外研究

MLN8237作用于Aurora A选择性比作用于结构相关的Aurora B 高200多倍，IC50为396.5 nM, 而对205种其他激酶则没有显著活性。^[1] 0.5 μM MLN8237处理MM1.S和 OPM1 细胞，抑制 Aurora A磷酸化，而不影响 Aurora B调节的组蛋白H3磷酸化。MLN8237作用于多发性骨髓瘤(MM) 细胞系，显著抑制细胞增殖，IC50为0.003-1.71 μM。在BM 基质细胞，IL-6和 IGF-1 存在时，MLN8237作用于原代MM 细胞和MM细胞系，抗增殖活性比只有MLN8237单独作用时高很多。0.5 μM MLN8237 作用于原代MM细胞和细胞系，使G2/M 期细胞提高2到6倍，且显著诱导凋亡和衰老，涉及p53, p21 和p27的上调,及 PARP,caspase 3,和 caspase 9的裂解。此外, MLN8237和 Hexadecadrol联用具有协同作用，具有强抗MM 功效, 而和Doxorubicin 及LDP-341联用则具有另外的功能。^[2] 0.5 μM MLN8237处理 FLO-1, OE19, 和OE33 食管腺癌细胞系，抑制集落形成，且显著提高多倍体细胞百分数,随后提高G1期细胞百分数,而与 NSC 119875(2.5 μM)联用则效果进一步提高，与单独用药相比，诱导产生更多, TAp73β, PUMA, NOXA, cleaved caspase-3, 和cleaved PARP。^[3]

体内研究

MLN8237口服处理，显著降低肿瘤负担，按15 mg/kg 和30 mg/kg剂量处理肿瘤生长抑制率(TGI) 分别为42%和80%,且与对照组相比，延迟小鼠寿命。^[2] MLN8237 (30 mg/kg) 与NSC 119875(2 mg/kg) 联用作用于FLO-1移植瘤，与单独用药相比，抗癌活性增强，伴随着Ki-67表达受抑制，细胞核p73蛋白和cleaved caspase 3表达增强。^[3]

特征

MLN8237 是第一个口服有效的小分子Aurora A激酶选择性抑制剂。

激酶实验	Aurora A放射性闪光板酶实验
进行Aurora A放射性闪光板酶实验，测定体外MLN8237抑制程度。在Sf9细胞中表达重组Aurora A，然后使用GST亲和层析进行纯化。Aurora A 肽底物与生物素联合形成生物素-GLRRASLG。在50 mM Hepes (pH 7.5), 10 mM MgCl₂, 5 mM DTT, 0.05% Tween-20, 2 μM 肽底物, 3.3 μCi/mL [γ-³³ P]ATP 2 μM, 和浓度不断增高的MLN8237 的混合物中进行Aurora A激酶 (5 nM)实验。
细胞实验	细胞系	MM1.S, MM.1R, LR5, RPMI 8226, DOX40, OPM1, OPM2, INA6, 和U266
浓度	溶于DMSO,终浓度为~10 μM
处理时间	24, 48, 和72小时
方法	使用不同浓度MLN8237处理细胞24, 48,和72小时。通过MTT实验测定细胞活力，通过测定 3[³H]-胸甘渗透而测定细胞增殖。为了分析细胞周期，使用70%乙醇在-20^oC下使细胞通透，然后与50 μg/mL PI 和20 单位/mL RNase-A温育。通过流式细胞仪使用 BDFACS-Canto II和FlowJo软件分析DNA含量。为了测定凋亡和衰老，使用异硫氰酸荧光素-annexin V和PI对细胞进行染色。通过流式细胞仪使用 BDFACS-Canto II和FlowJo软件测定凋亡细胞。
动物实验	动物模型	皮下接种 MM1.S 细胞的SCID鼠
剂量	~30 mg/kg/day
给药处理	口服处理

参考文献

客户使用selleck产品的实验数据

: 数据来源于[, 33, 3550-60]

: 数据来源于[Data independently produced by EMBO Mol Med, 2013, 5(1), 149-66]

: 数据来源于[Data independently produced by Cell Stem Cell, 2012, 11, 179-94]

: 数据来源于[, 30, 906-19]