CD163L1 Antibody [C10D1]

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生物描述

特异性 CD163L1 Antibody [C10D1] 可检测内源性 CD163L1 总蛋白水平。
背景 CD163L1,又称CD163分子样蛋白1或M160,是B组清道夫受体富含半胱氨酸(SRCR)超家族的I型膜蛋白,具有多个SRCR结构域(通常为9-12个)、一个跨膜区段和一个胞质尾,该胞质尾通过依赖于网格蛋白的途径介导内吞作用,且该过程不依赖于配体交联。CD163L1源于CD163基因的晚期进化重复,在特定的组织巨噬细胞亚群中高表达(通常与CD163共定位),但在单核细胞、肺泡巨噬细胞、神经胶质细胞和库普弗细胞中表达极低或缺失;两种胞质剪接变体进一步影响其亚细胞定位。 CD163L1作为一种内吞清除受体,可能结合尚未鉴定的配体,通过抗炎信号传导和维持组织稳态来介导清除并促进炎症消退,这使其与特异性清除血红蛋白-触珠蛋白复合物的CD163有所区别。CD163L1对血红蛋白-触珠蛋白或已测试的细菌均无亲和力,也不形成已知的蛋白质复合物。其在单核细胞向巨噬细胞分化过程中的调控表达支持先天免疫调节,在动脉粥样硬化等炎症性疾病中具有疾病相关性,其作用机制可能类似于CD163清除氧化剂;在自身免疫性疾病中,其作用机制则可能通过抑制过度免疫反应发挥作用。

使用信息

抗体应用 IHC 稀释比例
IHC
1:2000
反应性 Human
抗体类型 Rabbit Monoclonal Antibody MW
储存液配方 PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
储存条件
(自收到货起)
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years
IHC
实验步骤:
 
脱蜡/补液
1. 脱蜡/水合切片:
2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次,每次 5 分钟。
3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次,每次 10 分钟。
4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次,每次 10 分钟。
5. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。
6.抗原修复:对于柠檬酸盐:将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中,在微波炉中加热,直至开始沸腾; 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
 
染色
1. 用 dH2O 清洗切片 3 次,每次 5 分钟。
2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
3. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。
4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
6. 除去封闭液,并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
7. 去除抗体溶液,用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次,每次 5 分钟。
8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次,每次 5 分钟。
10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
13. 如果需要,用苏木精复染切片。
14. 用 dH2O 清洗切片两次,每次 5 分钟。
15. 切片脱水:95%乙醇孵育切片两次,每次 10 秒; 在 100% 乙醇中重复,孵育切片两次,每次 10 秒; 在二甲苯中重复,孵育切片两次,每次 10 秒。
16. 用盖玻片和封固剂封固切片。
 

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