D-Luciferin Potassium Salt

目录号：S6580 批次号：S658001

化学数据

	别名	N/A	储存条件 (自收到货起)	3年 -20°C(避光) 粉状
	化学式	C₁₁H₇KN₂O₃S₂
	分子量	318.41	CAS号	115144-35-9
Solubility (25°C)*	体外	Water	16 mg/mL (50.24 mM)
		DMSO	4 mg/mL (12.56 mM)
		Ethanol	Insoluble
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble. * Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

制备储备液

生物活性

产品描述	D-Luciferin 是荧光素酶 (Luc) 的天然底物，对萤火虫产生典型的黄绿光进行催化。该反应产生的 560 nm 化学发光在几秒钟内达到峰值，当底物荧光素过量时，光输出与荧光素酶浓度成正比。荧光素酶 (luc) 基因是研究和活性分子筛选的常用报告基因。化学发光技术实际上是无背景的，使得 luc 报告基因成为检测低水平基因表达的理想选择。除了用于基因表达的外，荧光素酶还用于 ATP 的检测。
体外研究	1.体外生物发光图像测定实验方案示例 a) 在无菌水中制备 100 mM (100-200X) 萤光素储备溶液。搅拌均匀。立即使用，或一次性分装，-20℃保存，避免冻融循环，避光。 b) 在预热的组织培养基中制备 0.5-1 mM D-荧光素工作溶液。 c) 从培养的细胞中吸出培养基。 d) 向细胞中加入荧光素工作液，成像前37℃孵育细胞5-10分钟。 2.体内生物发光图像测定的示例方案 a) 在 DPBS 中制备 15 mg/mL 荧光素储备溶液，不含 Mg2+ 和 Ca2+。搅拌均匀。 b) 通过0.2μm过滤器对溶液进行过滤除菌。立即使用，或一次性分装，-20℃保存，避免冻融循环，避光。 c) 在成像前 10-15 分钟以动物体重的 150 mg/kg（或 10 μL/g 荧光素储备溶液）腹膜内 (i.p.) 注射荧光素。注意：应对每种动物模型进行荧光素动力学研究，以确定峰值信号时间。 3.荧光素报告基因检测的示例方案 a) 在无菌水中制备 100 mM 荧光素储备溶液。立即使用，或一次性分装，-20℃保存，避免冻融循环，避光。 b) 在 25 mM tricine 缓冲液 pH 7.8 中制备 1 mM D-荧光素工作溶液，其中含有 3 mM ATP、1 mM DTT 和 15 mM MgSO4。 c) 将 5-10 μL 细胞裂解液移入微孔板中。使用不含裂解液的裂解试剂或缓冲液作为空白。 d) 用荧光素工作溶液灌注光度计。 e) 立即注入 200 μL 荧光素工作溶液，积分时间为 10 秒。

产品描述

D-Luciferin 是荧光素酶 (Luc) 的天然底物，对萤火虫产生典型的黄绿光进行催化。该反应产生的 560 nm 化学发光在几秒钟内达到峰值，当底物荧光素过量时，光输出与荧光素酶浓度成正比。荧光素酶 (luc) 基因是研究和活性分子筛选的常用报告基因。化学发光技术实际上是无背景的，使得 luc 报告基因成为检测低水平基因表达的理想选择。除了用于基因表达的外，荧光素酶还用于 ATP 的检测。

体外研究

1.体外生物发光图像测定实验方案示例
a) 在无菌水中制备 100 mM (100-200X) 萤光素储备溶液。搅拌均匀。立即使用，或一次性分装，-20℃保存，避免冻融循环，避光。
b) 在预热的组织培养基中制备 0.5-1 mM D-荧光素工作溶液。
c) 从培养的细胞中吸出培养基。
d) 向细胞中加入荧光素工作液，成像前37℃孵育细胞5-10分钟。
2.体内生物发光图像测定的示例方案
a) 在 DPBS 中制备 15 mg/mL 荧光素储备溶液，不含 Mg2+ 和 Ca2+。搅拌均匀。
b) 通过0.2μm过滤器对溶液进行过滤除菌。立即使用，或一次性分装，-20℃保存，避免冻融循环，避光。
c) 在成像前 10-15 分钟以动物体重的 150 mg/kg（或 10 μL/g 荧光素储备溶液）腹膜内 (i.p.) 注射荧光素。
注意：应对每种动物模型进行荧光素动力学研究，以确定峰值信号时间。
3.荧光素报告基因检测的示例方案
a) 在无菌水中制备 100 mM 荧光素储备溶液。立即使用，或一次性分装，-20℃保存，避免冻融循环，避光。
b) 在 25 mM tricine 缓冲液 pH 7.8 中制备 1 mM D-荧光素工作溶液，其中含有 3 mM ATP、1 mM DTT 和 15 mM MgSO4。
c) 将 5-10 μL 细胞裂解液移入微孔板中。使用不含裂解液的裂解试剂或缓冲液作为空白。
d) 用荧光素工作溶液灌注光度计。
e) 立即注入 200 μL 荧光素工作溶液，积分时间为 10 秒。

参考文献