DLAT Antibody [L23H19]

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生物描述

特异性 DLAT Antibody [L23H19] 可检测内源性 DLAT 总蛋白水平。
背景 DLAT（丙酮酸脱氢酶E2，PDH-E2，二氢硫辛酰乙酰转移酶）构成哺乳动物丙酮酸脱氢酶复合物（PDC）的内部催化核心，它将糖酵解碳流整合到线粒体乙酰辅酶A的生成中，从而将碳水化合物氧化与柠檬酸循环和下游脂质生物合成偶联起来。PDH-E2属于2-酮酸脱氢酶家族，由多个相同的内部核心结构域组成十二面体结构，这些结构域为外周的E1（丙酮酸脱氢酶）和E3（二氢硫辛酰胺脱氢酶）以及哺乳动物PDC特有的E3结合蛋白（E3BP）提供支架，E3BP也嵌入到相同的核心结构中。每个E2多肽包含N端硫辛酰结构域和一个E1结合片段，这些片段通过柔性连接子与C端内部核心结构域相连。内核部分采用保守的α/β折叠，沿每个三重轴形成三聚体，这些三聚体沿二重轴进一步连接成一个空心十二面体笼状结构，使活性位点朝向内部和外部溶剂通道。在每个三聚体内部，两个相邻的E2亚基协同作用形成一个复合乙酰转移酶活性位点。其中一个亚基的丝氨酸残基和顺时针方向另一个亚基的组氨酸残基共同协调二氢硫辛酰基和辅酶A的结合和定位，引导乙酰基从还原的硫辛赖氨酸臂转移到辅酶A上，这一过程由E1启动的氧化脱羧反应进行。硫辛赖氨酸“摆臂”从外表面通过螺旋H1附近的狭窄通道接近E2通道，而辅酶A则通过另一个入口从内部空腔进入同一活性位点；外部、通道和内部表面的特定静电场有利于硫辛酰化结构域和辅酶A的有效引导，避免底物或产物的非特异性捕获。活性位点通道核心的βE和βF之间的可移动β转角缺乏有序密度，其位置使其能够作为动态闸门，调节脂酰和CoA配体的进入和释放，从而支持乙酰基转移与上游脱羧和下游NADH生成的紧密偶联。在双重界面上，C端螺旋形成疏水性“旋钮”，与配对三聚体上的互补“孔”对接；在人E2中，直的H2螺旋和末端H7螺旋重塑了这种相互作用，使其有利于更大的三聚体间角度，从而形成十二面体几何结构，而非其他家族成员中常见的立方体几何结构，这一特征决定了E1、E3和E3BP围绕核心的排列和调控方式。决定十二面体结构的结构表面也决定了脂酰结构域和调控蛋白如何接近核心，因此E2的内部结构直接影响底物通道效率、对丙酮酸脱氢酶激酶和磷酸酶的响应性，以及E1和E3活性整合到单个催化组装体中。E3BP中一个密切相关的核心结构域与E2具有高度的序列和结构相似性，并且可以在异源三聚体中占据等效位置，但缺少催化组氨酸；因此，E3BP保留了脂酰臂和CoA的底物结合决定簇，但改变了三聚体中一个活性位点的催化构型，从而形成混合的E2/E3BP三聚体，这些三聚体改变了局部乙酰转移酶活性和E3在核心周围的分布。建模和界面分析表明，含有两个E2和一个E3BP核心结构域的异源三聚体在能量上更有利，富含E3BP的界面比E2-E2接触更弱。这种结构支撑着一个核心，其中E3BP亚基以有限的、有规律的方式插入，既保持了整体十二面体几何结构，又调节了E3的募集和局部催化环境。通过这种模块化结构，PDH-E2不仅催化乙酰转移，还决定了催化中心和E3对接的空间模式，从而塑造了丙酮酸氧化的通量，并影响了PDC对营养物质供应、氧化还原平衡以及通过丙酮酸脱氢酶激酶和磷酸酶传递信号的激素输入的响应。由E2核心支持的丙酮酸不可逆转化为乙酰辅酶A是哺乳动物能量代谢中的一个主要调控点，而由于E2、E3BP或其组装缺陷导致的PDC整体功能下降，会导致氧化代谢受损、丙酮酸和乳酸积累，以及与乳酸性酸中毒和其他代谢紊乱相关的神经功能障碍。

使用信息

抗体应用 WB, IP, IHC, IF, FCM 稀释比例
WB IP IHC IF FCM
1:1000-1:10000 1:10-1:100 1:500-1:1000 1:50-1:100 1:10-1:100
反应性 Human
抗体类型 Rabbit Monoclonal Antibody MW 69 kDa
储存液配方 PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
储存条件
(自收到货起)		 -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

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