Dnmt3L Antibody (Rabbit mAb) [N11C3]

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生物描述

特异性 Dnmt3L Antibody (Rabbit mAb) [N11C3] 可检测内源性 Dnmt3L 总蛋白水平。
背景 DNMT3L（DNA甲基转移酶3样蛋白）是DNMT3家族中催化活性缺失的成员，它作为从头甲基转移酶DNMT3A和DNMT3B的调节辅助因子，整合组蛋白H3尾部状态和Polycomb蛋白的占位情况，从而调控生殖细胞和胚胎干细胞中的DNA甲基化模式。DNMT3L包含一个富含半胱氨酸的N端结构域，该结构域可结合组蛋白H3的N端；以及一个C端甲基转移酶样结构域，该结构域可与DNMT3A和DNMT3B的催化C端结构域相互作用，形成复合物。在复合物中，DNMT3L可加速DNA和S-腺苷-L-蛋氨酸的结合，并刺激甲基转移酶活性，而自身并不修饰胞嘧啶。 DNMT3L 可将 DNMT3A 和 DNMT3B 的催化活性提高 1.5-15 倍，通过其自身的 C 端直接结合它们的催化结构域，降低 DNA 和 AdoMet 的 Km 值，并作为瞬时“底物交换因子”打开活性位点以促进底物结合，然后在 DNA 结合后解离，使 DNMT3A 或 DNMT3B 处于闭合构象，缓慢释放 DNA，有利于进行性甲基化。 DNMT3L还能读取组蛋白H3第4位赖氨酸的甲基化状态：它特异性地结合于第4位赖氨酸未甲基化的H3尾部（H3K4me0），而这种相互作用会被H3K4甲基化强烈抑制。因此，DNMT3L与H3的结合能够识别缺乏活性H3K4标记的染色质区域，并将其与DNMT3A2的募集或激活偶联，从而启动从头DNA甲基化。这种机制是生殖细胞中甲基化印记建立和逆转录转座子沉默的基础。DNMT3L主要与DNMT3A2、DNMT3B和核心组蛋白结合，这支持了这样一种模型：DNMT3L位于核小体H3K4me0位点，并成核形成包含DNMT3A/3B的复合物，这些复合物在配子发生过程中将甲基化引入印记基因座和转座元件中富含CpG的DNA上。在胚胎干细胞中，DNMT3L 发挥双重作用：它作为管家基因基因体 DNA 甲基化的正调控因子，与 DNMT3A 和 DNMT3B 共同促进组成型表达位点的甲基化；同时，它作为 H3K4me3/H3K27me3 标记的双价发育基因启动子甲基化的负调控因子。在这些双价启动子处，DNMT3L 与 PRC2 组分 EZH2 相互作用，并通过与 DNMT3A/3B 竞争结合 PRC2/H3K27me3 区域，帮助维持启动子低甲基化状态，从而保持低甲基化、Polycomb 抑制但具有激活能力的基因表达状态；当 DNMT3L 水平降低时，双价启动子发生高甲基化，发育基因表达程序受到干扰。 DNMT3L对于胚胎干细胞分化为原始生殖细胞也至关重要，它通过抑制同源异型基因RHOX5启动子区域的DNA甲基化，激活RHOX5的转录，从而支持生殖细胞的特化。这凸显了DNMT3L在不同基因组靶点上作为甲基化促进因子和拮抗因子的双重作用具有情境依赖性。DNMT3L表达的调控进一步将其与甲基化机制联系起来：在胚胎发育过程中，DNMT3A、DNMT3B和DNMT3L自身都会对其启动子进行甲基化，形成一个自调控回路。在该回路中，如ICF综合征模型所示，DNMT3B的缺陷会导致DNMT3L启动子低甲基化、DNMT3L转录增加以及甲基化平衡紊乱，进而影响基因印记和基因组稳定性。甲基转移酶样 C 端结构、H3K4me0 敏感的组蛋白结合域、直接激活 DNMT3A/3B 催化、与二价启动子处的 PRC2 相互作用，以及在印记建立、逆转录转座子沉默、管家基因甲基化和生殖细胞分化中的作用，使得 DNMT3L 成为理解染色质信号和 DNMT3 酶如何协同作用以在发育、疾病和相关免疫病理中塑造新的 DNA 甲基化模式的机制中心调节因子。

使用信息

抗体应用 WB, IP, IHC, IF 稀释比例
WB IP IHC IF
1:1000 1:50 1:50 1:250
反应性 Mouse, Human
抗体类型 Rabbit Monoclonal Antibody MW 44 kDa
储存液配方 PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
储存条件
(自收到货起)		 -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

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