EPZ004777

目录号：S7353 批次号：S735301

化学数据

	别名	N/A	储存条件 (自收到货起)	3年 / -20°C / 粉状 1年 / -80°C / 溶于溶剂
	化学式	C₂₈H₄₁N₇O₄
	分子量	539.67	CAS号	1338466-77-5
Solubility (25°C)*	体外	DMSO	100 mg/mL (185.29 mM)
		Ethanol	100 mg/mL (185.29 mM)
		Water	Insoluble
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble. * Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.

制备储备液

生物活性

产品描述

EPZ004777是一种有效的，选择性的DOT1L抑制剂，无细胞试验中IC50为0.4 nM。

靶点

DOT1L ^[1]
(Cell-free assay)

0.4 nM

体外研究

EPZ004777选择性抑制细胞H3K79甲基化，并抑制关键MLL融合靶基因的表达。DOT1L受抑制后，EPZ004777选择性抑制MLL基因重排的细胞系和MLL-AF9转化的小鼠造血细胞增殖。此外, EPZ004777作用于MLL基因重排的细胞系，也诱导分化和凋亡。^[1] EPZ004777选择性抑制MLL-AF10和CALM-AF10转化的小鼠造血细胞增殖。^[2]EPZ004777 抑制DOT1L后，显著降低增殖，降低MLL-AF6靶基因表达，和MLL-AF6转化的小鼠造血细胞的细胞周期停滞。^[3]

体内研究

EPZ004777处理MLL白血病小鼠移植瘤模型，产生有效的抗肿瘤功效，且显著提高平均寿命。^[1]

推荐的实验操作(此推荐来自于公开的文献所以Selleck并不保证其有效性)

激酶实验	测定抑制剂IC50值
激酶实验	EPZ004777在DMSO中连续稀释3倍，起始浓度为1 mM，形成全部10种浓度。1 μL 等份的每种抑制剂稀释液接种到384孔微量滴定板中。100％抑制对照包括2.5 mM 终浓度的产品抑制剂S-adenosyl-L-homocysteine(SAH)。化合物与每孔40 ml 0.25 nM DOT1L(1-416) 在实验缓冲液(20 mM TRIS [pH 8.0] 10 mM NaCl, 0.002% Tween 20, 0.005% Bovine Skin Gelatin, 100 mM KCl, 和 0.5 mM DTT)中温育30分钟。每孔加入10 ml 底物开始反应，底物包括实验缓冲液（含200 nM ³H-SAM(80 Ci/mmol), 600 nM 未标记的SAM）和 20 nM 核小体 (终反应混合物中的底物都处于其各自K_m值)。反应在室温下进行120分钟，然后每孔使用10 ml 800 mM SAM淬火。测量渗透进核小体的放射性。在类似的平衡试验条件下，使用处于其各自K_m值的SAM和蛋白质/肽底物，测量一组组蛋白甲基转移酶的IC50值。
细胞实验	细胞系	人类白血病细胞系 MV4-11, THP-1, RS4;11, Kasumi-1, HL-60, REH, 和 Jurkat. SEM, KOPN-8, 697, U937 和 MOLM-13 细胞
	浓度	~50 μM
	处理时间	14-18 天
	方法	测评人类细胞系增殖和活力，呈指数生长的细胞接种按一式三份接种在96孔板中，终体积为150 ml。在3 μM (增殖曲线), 或浓度不断增加(测定IC50) EPZ004777（高达50 μM）时，进行细胞温育。每隔3-4天，通过Guava Viacount实验测定活存细胞，最多至18天，然后使用Guava EasyCyte Plus 仪器分析。进行细胞计数时，更换生长培养基和EPZ004777，细胞分裂回每孔5×10⁴。总细胞数表现为每孔分裂调整后的活细胞。根据浓度依赖性曲线每个时间点，使用Graphpad Prism 软件，测定每种细胞系的IC50值。测定IC50值直到IC50值稳定（THP-1细胞需18天，所有其它细胞系需14天）。测评EPZ004777对转化的小鼠造血祖细胞的作用效果，两个独立转导各自病毒的细胞按每孔0.5-1×10⁵个细胞接种在24孔板，孔中含1 ml 培养基，然后使用浓度高达30 mM EPZ004777处理。进行细胞计数，每隔3-4天，在含新鲜化合物的新鲜培养基中再接种等量细胞数。MTT法检测中，第10天，收获成排再接种的细胞，然后按每孔 2×10⁴各细胞一式三份接种在含适当浓度EPZ004777的100 ml培养基中。细胞温育2.5天，然后使用10 ml MTT试剂处理3小时，在100 ml MTT-增溶缓冲液 (来自Cell Proliferation Kit I [MTT])中裂解过夜。
动物实验	动物模型	患MLL小鼠的移植瘤MV4-11模型
	剂量	含100 和 150 mg/mL EPZ004777溶液的微型泵
	给药处理	渗透泵

参考文献

客户使用selleck产品的实验数据

: , FEBS J, 2017, 284(9):1309-1323

EPZ004777在文献中得到引用

Histone H3K79 methylation by DOT1L promotes Aurora B localization at centromeres in mitosis [ Cell Rep, 2023, 42(8):112885]	PubMed: 37494186
Transcriptome-based chemical screens identify CDK8 as a common barrier in multiple cell reprogramming systems [ Cell Rep, 2023, 42(6):112566]	PubMed: 37235474
Nuclear Translocation of LDHA Promotes the Catabolism of BCAAs to Sustain GBM Cell Proliferation through the TxN Antioxidant Pathway [ Int J Mol Sci, 2023, 24(11)9365]	PubMed: 37298317
Genome-wide DNA methylation changes upon DOT1L inhibition in hormone-responsive breast cancer cells [ Front Cell Dev Biol, 2023, 11:1308025.]	PubMed: 38099289
Derivation of totipotent-like stem cells with blastocyst-like structure forming potential [ Cell Res, 2022, 10.1038/s41422-022-00668-0]	PubMed: 35508506
Combinatorial targeting of a chromatin complex comprising Dot1L, menin and the tyrosine kinase BAZ1B reveals a new therapeutic vulnerability of endocrine therapy-resistant breast cancer [ Breast Cancer Res, 2022, 24(1):52]	PubMed: 35850772
3-deazaadenosine (3DA) alleviates senescence to promote cellular fitness and cell therapy efficiency in mice [ Nat Aging, 2022, 2:851-866]	PubMed: 36438588
Role of Dot1L and H3K79 methylation in regulating somatic hypermutation of immunoglobulin genes [ Proc Natl Acad Sci U S A, 2021, 118(29)e2104013118]	PubMed: 34253616
Permissive epigenomes endow reprogramming competence to transcriptional regulators [ Nat Chem Biol, 2020, 10.1038/s41589-020-0618-6]	PubMed: 32807969
BCL2 Amplicon Loss and Transcriptional Remodeling Drives ABT-199 Resistance in B Cell Lymphoma Models [ Cancer Cell, 2019, 35(5):752-766]	PubMed: 31085176

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