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别名 | Nec-1 | 储存条件 (自收到货起) |
3年 / -20°C / 粉状 1年 / -80°C / 溶于溶剂 |
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化学式 | C13H13N3OS |
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分子量 | 259.33 | CAS号 | 4311-88-0 | |
Solubility (25°C)* | 体外 | DMSO | 51 mg/mL (196.66 mM) | |
Water | Insoluble | |||
Ethanol | Insoluble | |||
* <1 mg/ml means slightly soluble or insoluble. * Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations. |
产品描述 | Necrostatin-1 (Nec-1)是一种特异性RIP1 (RIPK1)抑制剂,抑制TNF-α诱导的细胞坏死,在293T细胞中EC50为490 nM。Necrostatin-1也可抑制 IDO、细胞自噬和凋亡。 | ||
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靶点 |
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体外研究 | Necrostatin-1 (1-100 μM) 抑制过表达和内源性的RIP1发生自磷酸化。RIP1是初级细胞靶点,负责Necrostatin-1的抗细胞坏死活性。[1] Necrostatin-1有效抑制多种类型细胞触发的坏死性细胞死亡。Necrostatin-1作为细胞坏死的小分子抑制剂, 作用于jurkat细胞,抑制RIP激酶的诱导细胞坏死,抑制TNF-α诱导的细胞坏死,EC50为490 nM。[2] |
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特征 | Necrostatin-1是抑制细胞坏死的有力工具。 |
激酶实验 | RIP1 激酶检测 | |
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RIP1 的磷酸化需要其激酶活性。FLAG标记的野生型(WT)或RIP1(K45M) 突变体失活激酶的表达结构转染到293T细胞中,在有[γ-32P]ATP存在时,RIP1激酶实验在30°C下进行30分钟。样品进行SDS-PAGE,通过放射自显影可观察到RIP1带。对放射性带的相对强度进行量化,并显示比率。在激酶反应的同时,珠样本使用anti-RIP1抗体进行Western Blot分析,确保与激酶反应中等量的蛋白。 | ||
细胞实验 | 细胞系 | Jurkat, BALB/c 3T3, SV40-转化的MEF, L929 |
浓度 | 0.01-100 μM | |
处理时间 | -- | |
方法 | 细胞接种在96孔板中(白色板进行发光检测;黑色板进行荧光检测;空白板进行MTT实验)贴壁细胞按每孔5000-10000个细胞的密度接种,悬浮细胞按每孔20,000-50,000个细胞的密度接种,孔中含100 μl合适的无酚红培养基。温育后,使用如下方法之一测定细胞存活率。ATP 实验中,使用购买的发光试剂盒,并使用Wallac Victor II酶标仪分析发光值。Sytox实验中,细胞与 1 μM Sytox Green试剂在37°C下温育30分钟,然后进行荧光读数。随后,增加5 μl 20% Triton X-100溶液到每孔中,产生最大溶解,细胞37°C下温育1小时,然后进行二次读数。Triton处理前和后,计算值的比率。MTT实验,使用CellTiter 96 AQueous 非放射性细胞增殖检测试剂盒。PI排除实验中, 加入2 μg/ml PI 到培养基中,立即使用FACSCalibur分析样品。PI-膜联蛋白V 实验中,使用ApoAlert Annexin V-EGFP 凋亡试剂盒。进行DioC6染色, 细胞与40 nM DiOC6 在37°C下温育30分钟, 洗涤一次,使用FACSCalibur分析。ROS分析中, 细胞与5 μM Dihydroethidium在37°C下温育30分钟, 洗涤一次,使用FACSCalibur分析。 |
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数据来源于[Data independently produced by , , J Cell Mol Med, 2015, 19(5): 1042-54 ]
数据来源于[Data independently produced by , , PLoS One, 2015, 10(3): e0122083]
数据来源于[Data independently produced by , , Mutation Research, 2016, 789:1-8.]
Synergism of non-thermal plasma and low concentration RSL3 triggers ferroptosis via promoting xCT lysosomal degradation through ROS/AMPK/mTOR axis in lung cancer cells [ Cell Commun Signal, 2024, 22(1):112] | PubMed: 38347507 |
PKCiota Inhibits the Ferroptosis of Esophageal Cancer Cells via Suppressing USP14-Mediated Autophagic Degradation of GPX4 [ Antioxidants (Basel), 2024, 13(1)114] | PubMed: 38247539 |
CASK Mediates Oxidative Stress-Induced Microglial Apoptosis-Inducing Factor-Independent Parthanatos Cell Death via Promoting PARP-1 Hyperactivation and Mitochondrial Dysfunction [ Antioxidants (Basel), 2024, 13(3)343] | PubMed: 38539876 |
The cell fate regulator DACH1 modulates ferroptosis through affecting P53/SLC25A37 signaling in fibrotic disease [ Hepatol Commun, 2024, 8(3)e0396] | PubMed: 38437058 |
VDAC1, as a downstream molecule of MLKL, participates in OGD/R-induced necroptosis by inducing mitochondrial damage [ Heliyon, 2024, 10(1):e23426] | PubMed: 38173512 |
Berberine-mediated Ferroptosis through System Xc-/GSH/GPX4 Axis Inhibits Metastasis of Nasopharyngeal Carcinoma [ J Cancer, 2024, 15(3):685-698] | PubMed: 38213727 |
Norovirus MLKL-like protein initiates cell death to induce viral egress [ Nature, 2023, 616(7955):152-158] | PubMed: 36991121 |
Cooperative sensing of mitochondrial DNA by ZBP1 and cGAS promotes cardiotoxicity [ Cell, 2023, 186(14):3013-3032.e22] | PubMed: 37352855 |
Metformin potentiates nephrotoxicity by promoting NETosis in response to renal ferroptosis [ Cell Discov, 2023, 9(1):104] | PubMed: 37848438 |
Metformin potentiates nephrotoxicity by promoting NETosis in response to renal ferroptosis [ Cell Discov, 2023, 9(1):104] | PubMed: 37848438 |
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