p53 Rabbit mAb

生物描述

特异性	p53 Rabbit mAb 用于检测内源性 p53 总的蛋白水平。
背景	p53是由TP53 基因编码的肿瘤抑制蛋白，作为转录因子，在细胞周期停滞、凋亡及 DNA 修复中发挥作用，以维持基因组稳定性。结构上，p53 由 393 个氨基酸组成，包含 N 端转录激活域（TAD）、富含脯氨酸的区域（PRD）、中心 DNA 结合域（DBD）、四聚体化域（TET）和 C 端调控域（CTD）。p53 主要定位于细胞核中，其表达水平受到MDM2 和 MDMX等负调控因子的严格控制，它们促进 p53 降解。当DNA 损伤或细胞应激发生时，p53 积累并激活 DNA 修复、凋亡、衰老和代谢相关基因。由于其作为“基因组守护者”的关键角色，p53 成为癌症治疗的主要靶点之一，旨在恢复或增强其抑癌功能。

使用信息

抗体应用	WB, IHC, IF, FCM, ChIP	稀释比例	WB IHC IF FCM CHIP 1:1000 1:80-1:320 1:800-1:1600 1:800-1:3200 1:200
反应性	Human, Monkey
抗体类型	Rabbit	MW	53 kDa
储存液配方	PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
储存条件 (自收到货起)	-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

实验方法
IHC	实验步骤：   脱蜡/补液 1. 脱蜡/水合切片： 2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。 3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。 4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。 5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾； 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。   染色 1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。 2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。 3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。 5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。 6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。 7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。 8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。 9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。 10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。 11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。 12. 将载玻片浸入 dH2O 中。 13. 如果需要，用苏木精复染切片。 14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒； 在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒； 在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。 22. 用盖玻片和封固剂封固切片。
IF

文献参考

[1] Wang H, et al. Signal Transduct Target Ther. 2023 Mar 1;8(1):92.

Application Data

WB