Phospho-PLK1 (Thr210) Antibody [K10L6] Datasheet

生物描述

特异性	Phospho-PLK1 (Thr210) Antibody [K10L6] 仅识别 Thr210 处磷酸化的内源性 PLK1 蛋白水平。
背景	磷酸化PLK1 (Thr210) 指的是polo样激酶1的激活形式，其中N端催化结构域激活环内的苏氨酸残基被磷酸化，使PLK1从自身抑制状态转变为有丝分裂主激酶，协调多种G2/M期和有丝分裂过程，包括CDK1激活、中心体成熟、双极纺锤体组装、染色体分离和胞质分裂。PLK1属于丝氨酸/苏氨酸激酶的CDC5/Polo亚家族，其结构由N端激酶结构域和C端polo盒结构域组成。polo盒结构域识别底物和支架上预先磷酸化的对接基序，一旦Thr210磷酸化激活了激活环并解除了分子内抑制，PLK1便能赋予其空间精确性和底物选择性。在G2/M期转换时，Aurora A激酶与辅因子Bora形成复合物，通过CDK1依赖性开关磷酸化Thr210位点。这种T环磷酸化是中心体和有丝分裂结构上产生具有催化活性的PLK1的主要事件，而该位点的去磷酸化则使PLK1恢复到低活性状态。活性的、Thr210磷酸化的PLK1磷酸化CDC25C和细胞周期蛋白B1，促进它们在细胞核内积累并激活CDK1；同时，PLK1磷酸化并灭活PKMYT1/Myt1和Wee1等抑制性激酶；此外，PLK1还修饰后期促进复合物/细胞周期蛋白体（包括Apc1、CDC16和CDC27）的组成成分，从而将CDK1激活、检查点满足和APC/C依赖性蛋白水解连接成一个连贯的有丝分裂进入和退出程序。 PLK1 还能磷酸化中心体、着丝粒、中心纺锤体和中体上的多种底物，包括 NEDD1、KIZ、NINL、CEP55、PRC1、RACGAP1、BUB1B、SGOL1、STAG2 和 CEP55，从而支持中心体成熟、附着错误纠正、姐妹染色单体黏连动力学、纺锤体中区组织和胞质分裂完成，并且磷酸化 Thr210 PLK1 在特定的有丝分裂阶段于这些结构中表现出特征性的富集。 PLK1活性的额外调控叠加在Thr210磷酸化之上，例如Ser99位点。Ser99在PI3K-Akt下游被磷酸化，形成14-3-3γ对接界面，进一步提升PLK1的催化活性，而这对于及时的中期-后期转换至关重要。这表明Thr210磷酸化建立了一种核心的活性激酶状态，该状态可被平行信号通路调控。Thr210的磷酸化状态对DNA损伤信号敏感，检查点激活会抑制T环磷酸化和PLK1活性，从而阻止细胞进入有丝分裂。而模拟磷酸化的Thr210变体即使在DNA损伤的情况下也能维持激酶活性，这表明磷酸化PLK1（Thr210）是转化细胞中检查点失控或非计划性有丝分裂的直接指标。 PLK1 表达和 Thr210 磷酸化水平在许多实体瘤和血液恶性肿瘤中升高，与高增殖指数和不良预后相关。

特异性

Phospho-PLK1 (Thr210) Antibody [K10L6] 仅识别 Thr210 处磷酸化的内源性 PLK1 蛋白水平。

背景

磷酸化PLK1 (Thr210) 指的是polo样激酶1的激活形式，其中N端催化结构域激活环内的苏氨酸残基被磷酸化，使PLK1从自身抑制状态转变为有丝分裂主激酶，协调多种G2/M期和有丝分裂过程，包括CDK1激活、中心体成熟、双极纺锤体组装、染色体分离和胞质分裂。PLK1属于丝氨酸/苏氨酸激酶的CDC5/Polo亚家族，其结构由N端激酶结构域和C端polo盒结构域组成。polo盒结构域识别底物和支架上预先磷酸化的对接基序，一旦Thr210磷酸化激活了激活环并解除了分子内抑制，PLK1便能赋予其空间精确性和底物选择性。在G2/M期转换时，Aurora A激酶与辅因子Bora形成复合物，通过CDK1依赖性开关磷酸化Thr210位点。这种T环磷酸化是中心体和有丝分裂结构上产生具有催化活性的PLK1的主要事件，而该位点的去磷酸化则使PLK1恢复到低活性状态。活性的、Thr210磷酸化的PLK1磷酸化CDC25C和细胞周期蛋白B1，促进它们在细胞核内积累并激活CDK1；同时，PLK1磷酸化并灭活PKMYT1/Myt1和Wee1等抑制性激酶；此外，PLK1还修饰后期促进复合物/细胞周期蛋白体（包括Apc1、CDC16和CDC27）的组成成分，从而将CDK1激活、检查点满足和APC/C依赖性蛋白水解连接成一个连贯的有丝分裂进入和退出程序。 PLK1 还能磷酸化中心体、着丝粒、中心纺锤体和中体上的多种底物，包括 NEDD1、KIZ、NINL、CEP55、PRC1、RACGAP1、BUB1B、SGOL1、STAG2 和 CEP55，从而支持中心体成熟、附着错误纠正、姐妹染色单体黏连动力学、纺锤体中区组织和胞质分裂完成，并且磷酸化 Thr210 PLK1 在特定的有丝分裂阶段于这些结构中表现出特征性的富集。 PLK1活性的额外调控叠加在Thr210磷酸化之上，例如Ser99位点。Ser99在PI3K-Akt下游被磷酸化，形成14-3-3γ对接界面，进一步提升PLK1的催化活性，而这对于及时的中期-后期转换至关重要。这表明Thr210磷酸化建立了一种核心的活性激酶状态，该状态可被平行信号通路调控。Thr210的磷酸化状态对DNA损伤信号敏感，检查点激活会抑制T环磷酸化和PLK1活性，从而阻止细胞进入有丝分裂。而模拟磷酸化的Thr210变体即使在DNA损伤的情况下也能维持激酶活性，这表明磷酸化PLK1（Thr210）是转化细胞中检查点失控或非计划性有丝分裂的直接指标。 PLK1 表达和 Thr210 磷酸化水平在许多实体瘤和血液恶性肿瘤中升高，与高增殖指数和不良预后相关。

使用信息

抗体应用

WB, IHC

稀释比例

WB	IHC
1:1000	1:500

反应性

Mouse, Human

抗体类型

Rabbit Monoclonal Antibody

MW

68 kDa

储存液配方

PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件
(自收到货起)

-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

实验方法

文献参考

Application Data

WB

Validated by Selleck

Lane 1: Hela, Lane 2: Hela (thymidine, 2mM, 16 h; nocodazole, 10nM, 24 h), Lane 3: Hela (thymidine, 2mM, 16 h; nocodazole, 10nM, 24 h; phosphatase treated)