Phospho-Rad17 (Ser645) Antibody [D14D16]

目录号：F6403

打印

生物描述

特异性 Phospho-Rad17 (Ser645) Antibody [D14D16] 仅识别 Ser645 处磷酸化的内源性 Rad17 蛋白水平。
背景 Ser645位点的磷酸化Rad17代表了RFC样钳状加载蛋白家族中Rad17检查点蛋白的激活形式，该蛋白对于感知DNA损伤和复制压力以维持细胞周期阻滞至关重要。该蛋白保持着类似于复制因子C的环状结构，具有独特的AAA+ ATPase结构域，这些结构域促进其与Rad9-Rad1-Hus1 (9-1-1)滑动钳的相互作用，并通过ATRIP-RPA识别被募集到ssDNA-dsDNA连接处的染色质上。当受到电离辐射或复制抑制剂等基因毒性损伤时，ATR激酶通过两步过程靶向Ser645位点的SQ基序进行磷酸化：预先结合的Rad17捕获9-1-1复合物，从而增强局部ATR活性，并引发磷酸化Ser645依赖的构象变化，进而稳定钳状加载并传递下游信号。这种修饰使Rad17能够作为支架蛋白，在双链断裂处组装MRN复合物（MRE11-RAD50-NBS1），引导ATM/ATR激活，进而引发CHK1/CHK2磷酸化级联反应，最终通过Cdc25失活阻断S期进程和G2/M期转换。在未受干扰的复制过程中，磷酸化Ser645的峰值出现在G1期晚期至G2/M期，但在损伤条件下，其在G1期早期迅速升高，这反映了细胞周期调控的基础启动与可诱导的ATR/ATM反应叠加。Ser645和Ser635同时突变为丙氨酸会消除G1/S期和G2期检查点的执行，使细胞对致断裂剂和复制毒素高度敏感。ATM缺陷型细胞中Ser645的磷酸化水平虽不理想，但仍能维持，这凸显了ATR在此过程中的主导作用。

使用信息

抗体应用 WB, IP 稀释比例
WB IP
1:1000 1:200
反应性 Human
抗体类型 Rabbit Monoclonal Antibody MW 80 kDa
储存液配方 PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
储存条件
(自收到货起)		 -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

Application Data

WB

Validated by Selleck

  • Lane 1: Hela, Lane 2: Hela (CIP and λ phosphatase treated)