pro Caspase3 Antibody (Rabbit mAb) [D14C8]

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生物描述

特异性 pro Caspase3 Antibody (Rabbit mAb) [D14C8] 可检测内源性 pro Caspase3 总蛋白水平。
背景 前体caspase-3是caspase-3的无活性酶原前体，caspase-3是一种执行caspase，在细胞中以组成型二聚体的形式存在，由一个N端前结构域连接到一个大亚基和一个较小的C端亚基，两者通过亚基间连接子连接。激活需要该连接子的蛋白水解切割，而不是在没有切割的情况下发生的任何构象变化。这种切割是由上游起始caspase完成的，主要是caspase-9，它在凋亡体中发挥作用。凋亡体是一个七聚体平台，当细胞色素c和dATP在胞质溶胶中与Apaf-1结合时组装而成，每个Apaf-1亚基通过各自的CARD结构域与一个前体caspase-9亚基非共价偶联；被募集到该平台的 caspase-9 特异性地在 172IETD-S 位点切割 procaspase-3，而这种 ISL 切割事件是生成具有催化活性的 caspase-3 所必需的。caspase-3 的完全成熟还需要去除其 N 端前结构域，这一过程通过两次连续的切割事件完成：首先在 Asp9 位点快速切割，随后在 Asp28 位点进行较慢的切割。仅 Asp9 位点的突变就足以阻断前结构域的去除和下游 caspase 的激活。而表达经基因工程改造以完全缺失前结构域的 caspase-3 的细胞，虽然不会持续激活，但却更容易受到死亡信号的刺激。这表明前结构域抑制 caspase-3 的激活，但并非其在去除后维持激活的必要条件。一旦被激活，caspase-3 对其自身的激活因子发挥直接的反馈作用：caspase-3 在不同的位点 Asp330 切割 procaspase-9，生成较小的 p10 亚基，该亚基去除 p12 片段的 15 个 N 端氨基酸，包括 XIAP BIR3 结合基序。与仅在 caspase-9 的主要加工位点进行切割相比，这种 Asp330 切割使凋亡体驱动的 caspase-3 激活增加高达八倍。而无法在 Asp330 处被切割的点突变体则表现出凋亡体介导的 caspase-3 活性的几乎完全丧失，这表明 caspase-3 到 caspase-9 的放大环是凋亡体整体催化输出的一个明确组成部分，而不是 caspase-9 激活的被动下游结果。 Asp330 的切割事件暴露了生成的 p10 片段上的一个新的 N 端肽序列，该序列保留了被 XIAP 抑制的能力，从而将 caspase-3 反馈切割步骤直接与 caspase-9 水平上而不是 caspase-3 本身上运作的明确的细胞凋亡制动机制联系起来。

使用信息

抗体应用 WB, IHC, IF, FCM 稀释比例
WB IHC IF FCM
1:5000-1:10000 1:250 1:60 1:50
反应性 Mouse, Human
抗体类型 Rabbit Monoclonal Antibody MW 32 kDa
储存液配方 PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
储存条件
(自收到货起)		 -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

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