Rad50 Antibody [C10K20] Datasheet

生物描述

特异性	Rad50 Antibody [C10K20] 可检测内源性 Rad50 总蛋白水平。
背景	RAD50 是一种进化上保守的染色体结构维持 (SMC) 相关 ATPase，它作为 MRE11–RAD50–NBS1 (MRN) 复合物的中心 DNA 连接和信号传导成分发挥作用，该复合物协调 DNA 双链断裂 (DSB) 的检测、处理和修复，激活 ATM/ATR 依赖性检查点信号传导，端粒维持和减数分裂重组。该蛋白质包含 N 端和 C 端 Walker A 和 B ATPase 基序，折叠成球状 ABC-ATPase 头部、延伸的中央卷曲螺旋臂，以及位于卷曲螺旋顶端的 C 端 Cys-His-His-Cys 锌钩基序，该基序可协调 Zn²⁺ 离子并介导二聚体-二聚体相互作用，使 MRN 复合物中的 RAD50 二聚体能够桥接远端 DNA 末端并形成动态 DNA 环，这对于末端锚定和损伤位点的高级染色质结构至关重要。 RAD50头部结构域的ATP结合驱动头对头相互作用，并将MRN从开放构象（此时MRE11核酸酶位点暴露于溶剂）转变为闭合构象（此时断裂的DNA末端并排排列并定位到MRE11核酸酶活性位点），从而实现对末端切除的ATP依赖性控制，并实现DNA锚定和核酸酶激活之间的构象耦合。在MRN中，RAD50的卷曲螺旋结构域和头部结构域结合DNA末端并使其保持紧密靠近，而MRE11则执行3′→5′外切酶和内切酶活性，启动5′末端切除并产生3′单链DNA突出端，这些突出端在同源重组过程中被RPA和随后的RAD51包裹；NBS1提供磷酸化依赖性相互作用基序，用于募集ATM和其他修复因子。 MRN在DNA损伤反应中发挥着传感器和转换器的作用：它识别双链断裂（DSB），通过直接相互作用募集并激活ATM，刺激ATM的自身磷酸化和单体化，并支持切除末端的ATR激活，从而触发磷酸化级联反应，稳定停滞的复制叉，强化S期和G2/M期检查点，并协调同源重组、经典非同源末端连接和替代末端连接之间的修复途径选择。RAD50也通过与染色体末端结合、促进t环形成和末端保护以及参与端粒DNA的加工来维持端粒稳态；而在减数分裂中，MRN-RAD50复合物促进程序性DSB加工，这是同源染色体配对和交叉形成所必需的。 RAD50基因的种系双等位基因功能减弱突变会导致一种类似奈梅亨断裂综合征的疾病，其特征为小头畸形、生长迟缓、免疫缺陷和放射敏感性。患者细胞表现出DNA双链断裂修复受损和检查点激活缺陷，凸显了RAD50在基因组稳定性中的关键作用。在多种癌症中均检测到体细胞RAD50改变，包括错义突变、无义突变和移码突变，而MRN功能障碍与染色体不稳定和对DNA损伤疗法的敏感性改变相关。

特异性

Rad50 Antibody [C10K20] 可检测内源性 Rad50 总蛋白水平。

背景

RAD50 是一种进化上保守的染色体结构维持 (SMC) 相关 ATPase，它作为 MRE11–RAD50–NBS1 (MRN) 复合物的中心 DNA 连接和信号传导成分发挥作用，该复合物协调 DNA 双链断裂 (DSB) 的检测、处理和修复，激活 ATM/ATR 依赖性检查点信号传导，端粒维持和减数分裂重组。该蛋白质包含 N 端和 C 端 Walker A 和 B ATPase 基序，折叠成球状 ABC-ATPase 头部、延伸的中央卷曲螺旋臂，以及位于卷曲螺旋顶端的 C 端 Cys-His-His-Cys 锌钩基序，该基序可协调 Zn²⁺ 离子并介导二聚体-二聚体相互作用，使 MRN 复合物中的 RAD50 二聚体能够桥接远端 DNA 末端并形成动态 DNA 环，这对于末端锚定和损伤位点的高级染色质结构至关重要。 RAD50头部结构域的ATP结合驱动头对头相互作用，并将MRN从开放构象（此时MRE11核酸酶位点暴露于溶剂）转变为闭合构象（此时断裂的DNA末端并排排列并定位到MRE11核酸酶活性位点），从而实现对末端切除的ATP依赖性控制，并实现DNA锚定和核酸酶激活之间的构象耦合。在MRN中，RAD50的卷曲螺旋结构域和头部结构域结合DNA末端并使其保持紧密靠近，而MRE11则执行3′→5′外切酶和内切酶活性，启动5′末端切除并产生3′单链DNA突出端，这些突出端在同源重组过程中被RPA和随后的RAD51包裹；NBS1提供磷酸化依赖性相互作用基序，用于募集ATM和其他修复因子。 MRN在DNA损伤反应中发挥着传感器和转换器的作用：它识别双链断裂（DSB），通过直接相互作用募集并激活ATM，刺激ATM的自身磷酸化和单体化，并支持切除末端的ATR激活，从而触发磷酸化级联反应，稳定停滞的复制叉，强化S期和G2/M期检查点，并协调同源重组、经典非同源末端连接和替代末端连接之间的修复途径选择。RAD50也通过与染色体末端结合、促进t环形成和末端保护以及参与端粒DNA的加工来维持端粒稳态；而在减数分裂中，MRN-RAD50复合物促进程序性DSB加工，这是同源染色体配对和交叉形成所必需的。 RAD50基因的种系双等位基因功能减弱突变会导致一种类似奈梅亨断裂综合征的疾病，其特征为小头畸形、生长迟缓、免疫缺陷和放射敏感性。患者细胞表现出DNA双链断裂修复受损和检查点激活缺陷，凸显了RAD50在基因组稳定性中的关键作用。在多种癌症中均检测到体细胞RAD50改变，包括错义突变、无义突变和移码突变，而MRN功能障碍与染色体不稳定和对DNA损伤疗法的敏感性改变相关。

使用信息

抗体应用

WB, IP

稀释比例

WB	IP
1:1000	1:200

反应性

Human

抗体类型

Rabbit Monoclonal Antibody

MW

153 kDa

储存液配方

PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件
(自收到货起)

-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

实验方法

文献参考

Application Data

WB

Validated by Selleck

Lane 1: PANC-1, Lane 2: 293T, Lane 3: K562