UFM1 Rabbit mAb

目录号：F3636

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生物描述

特异性 UFM1 Rabbit mAb 用于检测内源性 UFM1 总的蛋白水平。
背景 UFM1（泛素折叠修饰因子 1） 是一种泛素样蛋白，参与 UFMylation 这一翻译后修饰过程，调节内质网（ER）稳态、应激反应和蛋白质质量控制。UFM1 在结构上类似于泛素，以无活性前体形式合成，并通过 UFM1 特异性蛋白酶（UFSP1/UFSP2）激活，暴露其 C 端的功能性甘氨酸。UFM1 在肝脏、心脏和大脑等代谢活跃的器官中高度表达，并通过 UBA5（E1）、UFC1（E2）和 UFL1（E3）介导的三级酶连接过程进行修饰。UFMylation 在维持 ER 自噬、造血、神经发生和 DNA 损伤修复方面起关键作用，其可逆性由 UFSP 蛋白酶保证。这一修饰对细胞稳态至关重要，并在神经退行性疾病和癌症机制中日益受到关注。

使用信息

抗体应用 WB, IP, IHC 稀释比例
WB IP IHC
1:1000 1:10-1:40 1:250-1:1000
反应性 Human, Mouse, Rat
抗体类型 Rabbit MW 9 kDa
储存液配方 PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3
储存条件
(自收到货起)		 -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years
IHC
实验步骤：
 
脱蜡/补液
1. 脱蜡/水合切片：
2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。
3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。
4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。
5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾； 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
 
染色
1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。
2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
13. 如果需要，用苏木精复染切片。
14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒； 在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒； 在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。
22. 用盖玻片和封固剂封固切片。
 

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