VEGF165b Antibody [B10E21] Datasheet

生物描述

特异性	VEGF165b Antibody [B10E21] 可检测内源性 VEGF165b 总蛋白水平。
背景	VEGF165b 是由血管内皮生长因子 A (VEGF-A) 基因第 8 外显子的选择性剪接产生的，与促血管生成的 VEGF165a 亚型相比，其 C 端存在六个氨基酸的差异——VEGF165a 的末端序列为 CDKPRR，而 VEGF165b 的末端序列为 SLTRKD，该序列来源于第 8b 外显子的远端剪接受体位点。这种结构差异改变了受体结合特性和下游信号传导，但并未改变受体结合的整体拓扑结构，因此 VEGF165b 是一种内源性调节因子，它能够调节而非完全阻断 VEGF 介导的血管生成。 VEGF165b 作为一种促血管生成因子 VEGF165a 的拮抗剂，优先结合 VEGF 受体 1 (VEGFR1) 而非 VEGFR2，从而阻止 VEGF165a 激活驱动外周动脉疾病 (PAD) 和其他缺血性疾病中血管生成和灌注恢复的 VEGFR1-STAT3 信号通路。与对照组织相比，该蛋白在人类 PAD 肌肉活检组织中表达升高，且与 VEGFR1 的结合亲和力高于 VEGF165a。VEGF165b 水平与 VEGFR1 激活状态呈负相关，但与 VEGFR2 激活状态无关，这挑战了 VEGF165b 主要拮抗 VEGFR2 信号的传统观点。通过亚型特异性单克隆抗体抑制VEGF165b可增强重度外周动脉疾病（PAD）的灌注恢复，且不激活VEGFR2信号通路，而是增加VEGFR1的激活，并促进VEGFR1-STAT3结合，从而触发STAT3磷酸化和核转位，且该过程不依赖于Janus激酶1/2（JAK1/JAK2）的激活。该蛋白与VEGF165a具有相似的VEGFR2亲和力，但无法诱导受体磷酸化以及下游丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）和磷脂酶Cγ（PLCγ）的激活，而是竞争性抑制VEGF165a介导的VEGFR2在酪氨酸残基Y1175和Y1214处的自身磷酸化，而这两个残基对于内皮细胞的增殖和迁移至关重要。 VEGF165b抑制VEGF165a刺激的内皮细胞增殖、迁移和毛细血管形成，其IC50值约为VEGF165a浓度的十分之一，即使其表达水平低于促血管生成异构体，也表现出强大的抑制能力。该剪接变体在多种人类恶性肿瘤中表达下调，包括肾细胞癌、前列腺癌和黑色素瘤，VEGF165b表达缺失与肿瘤血管生成、进展和转移潜能增加相关，而外源性VEGF165b给药则抑制肿瘤生长和血管密度。 VEGF165b 的表达受多种因子调控，包括转化生长因子-β1 (TGF-β1) 和胰岛素样生长因子1 (IGF-1)。TGF-β1 和 IGF-1 促进近端剪接位点的选择，从而有利于 VEGF165a 的生成；而富含丝氨酸-精氨酸的剪接因子1 (SRSF1) 则促进远端剪接位点的使用，从而生成 VEGF165b。因此，剪接因子的可用性和活性是决定 VEGF165a/VEGF165b 表达比例的关键因素。该蛋白除了对内皮细胞产生影响外，还能调节免疫细胞功能，通过激活 VEGFR1-磷脂酶 C (PLC) 通路，上调穿孔素和颗粒酶 B 的表达，从而增强自然杀伤细胞对白血病细胞的细胞毒活性。这表明 VEGF165b 具有不同于单纯抗血管生成机制的免疫调节能力。 VEGF165b 表现出组织特异性表达模式，在健康的肾小球和视网膜色素上皮中检测到高水平，维持血管基础静止状态并防止病理性新生血管形成，而在糖尿病视网膜病变和年龄相关性黄斑变性中表达降低与异常血管生成有关。

特异性

VEGF165b Antibody [B10E21] 可检测内源性 VEGF165b 总蛋白水平。

背景

VEGF165b 是由血管内皮生长因子 A (VEGF-A) 基因第 8 外显子的选择性剪接产生的，与促血管生成的 VEGF165a 亚型相比，其 C 端存在六个氨基酸的差异——VEGF165a 的末端序列为 CDKPRR，而 VEGF165b 的末端序列为 SLTRKD，该序列来源于第 8b 外显子的远端剪接受体位点。这种结构差异改变了受体结合特性和下游信号传导，但并未改变受体结合的整体拓扑结构，因此 VEGF165b 是一种内源性调节因子，它能够调节而非完全阻断 VEGF 介导的血管生成。 VEGF165b 作为一种促血管生成因子 VEGF165a 的拮抗剂，优先结合 VEGF 受体 1 (VEGFR1) 而非 VEGFR2，从而阻止 VEGF165a 激活驱动外周动脉疾病 (PAD) 和其他缺血性疾病中血管生成和灌注恢复的 VEGFR1-STAT3 信号通路。与对照组织相比，该蛋白在人类 PAD 肌肉活检组织中表达升高，且与 VEGFR1 的结合亲和力高于 VEGF165a。VEGF165b 水平与 VEGFR1 激活状态呈负相关，但与 VEGFR2 激活状态无关，这挑战了 VEGF165b 主要拮抗 VEGFR2 信号的传统观点。通过亚型特异性单克隆抗体抑制VEGF165b可增强重度外周动脉疾病（PAD）的灌注恢复，且不激活VEGFR2信号通路，而是增加VEGFR1的激活，并促进VEGFR1-STAT3结合，从而触发STAT3磷酸化和核转位，且该过程不依赖于Janus激酶1/2（JAK1/JAK2）的激活。该蛋白与VEGF165a具有相似的VEGFR2亲和力，但无法诱导受体磷酸化以及下游丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）和磷脂酶Cγ（PLCγ）的激活，而是竞争性抑制VEGF165a介导的VEGFR2在酪氨酸残基Y1175和Y1214处的自身磷酸化，而这两个残基对于内皮细胞的增殖和迁移至关重要。 VEGF165b抑制VEGF165a刺激的内皮细胞增殖、迁移和毛细血管形成，其IC50值约为VEGF165a浓度的十分之一，即使其表达水平低于促血管生成异构体，也表现出强大的抑制能力。该剪接变体在多种人类恶性肿瘤中表达下调，包括肾细胞癌、前列腺癌和黑色素瘤，VEGF165b表达缺失与肿瘤血管生成、进展和转移潜能增加相关，而外源性VEGF165b给药则抑制肿瘤生长和血管密度。 VEGF165b 的表达受多种因子调控，包括转化生长因子-β1 (TGF-β1) 和胰岛素样生长因子1 (IGF-1)。TGF-β1 和 IGF-1 促进近端剪接位点的选择，从而有利于 VEGF165a 的生成；而富含丝氨酸-精氨酸的剪接因子1 (SRSF1) 则促进远端剪接位点的使用，从而生成 VEGF165b。因此，剪接因子的可用性和活性是决定 VEGF165a/VEGF165b 表达比例的关键因素。该蛋白除了对内皮细胞产生影响外，还能调节免疫细胞功能，通过激活 VEGFR1-磷脂酶 C (PLC) 通路，上调穿孔素和颗粒酶 B 的表达，从而增强自然杀伤细胞对白血病细胞的细胞毒活性。这表明 VEGF165b 具有不同于单纯抗血管生成机制的免疫调节能力。 VEGF165b 表现出组织特异性表达模式，在健康的肾小球和视网膜色素上皮中检测到高水平，维持血管基础静止状态并防止病理性新生血管形成，而在糖尿病视网膜病变和年龄相关性黄斑变性中表达降低与异常血管生成有关。

使用信息

抗体应用

WB, IHC, IF

稀释比例

WB	IP	IHC	IF	FCM	CHIP
1:1000	1:50	1:60	1:50	1:50	1:50

反应性

Human

抗体类型

Mouse Monoclonal Antibody

MW

44 kDa

储存液配方

PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件
(自收到货起)

-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

实验方法

文献参考

Application Data

IHC

Validated by Selleck

Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human placenta tissue with F5992 at 1:50 dilution.