Ghrelin Antibody [F2E5]
目录号: F3727
抗体应用：
反应性：
-
Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded mouse stomach tissue with F3727 at 1:8000 dilution.
使用信息
| 稀释比例 |
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| 抗体应用 |
|---|
| IHC |
| 反应性 |
|---|
| Mouse, Rat, Human |
| 抗体类型 |
|---|
| Rabbit Monoclonal Antibody |
| 储存液配方 |
|---|
| PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3 |
| 储存条件(自收到货起) |
|---|
| -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years |
| 阳性对照 | Mouse stomach tissue; Human stomach tissue; Rat stomach tissue |
|---|---|
| 阴性对照 | Rat liver tissue; Mouse liver tissue; Human liver tissue |
实验方法
| IHC |
|---|
实验步骤：
脱蜡/补液
1. 脱蜡/水合切片：
2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。
3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。
4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。
5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾； 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
染色
1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。
2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
13. 如果需要，用苏木精复染切片。
14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒； 在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒； 在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。
16. 用盖玻片和封固剂封固切片。
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生物描述
| 特异性 |
|---|
| Ghrelin Antibody [F2E5] 可检测内源性 Ghrelin 总蛋白水平。 |
| 蛋白定位 |
|---|
| 细胞外环境 |
| Uniprot ID |
|---|
| Q9UBU3 |
| 克隆号 |
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| F2E5 |
| 别名 |
|---|
| MTLRP; UNQ524/PRO1066; GHRL; Appetite‑regulating hormone; Growth hormone secretagogue; Growth hormone‑releasing peptide; Motilin‑related peptide; Protein M46 |
| 背景 |
|---|
| 胃饥饿素是一种酰化肽类激素，主要由胃肠内分泌细胞合成，在胰腺、肺和下丘脑神经元中也有表达。它作为能量稳态、生长激素释放和奖赏相关摄食行为的关键外周和中枢调节因子发挥作用。成熟的胃饥饿素配体与生长激素促分泌素受体（GHSR/GHS R1a）结合，GHSR/GHS R1a是一种AG类蛋白偶联受体，在下丘脑弓状核、垂体和中脑多巴胺通路中高表达。GHSR/GHS R1a可激活多种G蛋白家族，包括Gαq/11、Gαi/o和Gα12/13，分别激活磷脂酶C-肌醇三磷酸-钙信号通路、抑制腺苷酸环化酶和募集Rho A依赖性通路。此外，β-阻遏蛋白还介导GHSR内化和MAPK激活。在弓状核中，生长素释放肽-生长激素释放肽受体（GHSR）信号通路刺激表达神经肽Y和刺鼠相关肽的食欲刺激神经元，增加AMP激活蛋白激酶的活性，并解除多巴胺奖赏通路的抑制，从而促进饥饿感、预期性进食以及对高热量食物的偏好。而在垂体中，相同的受体配体对驱动钙依赖性生长激素的分泌，将生长素释放肽与生长激素轴的控制和代谢适应联系起来。生长素释放肽还调节胃动力、胃酸分泌和胰岛功能。生长素释放肽介导的Gαi信号通路减弱葡萄糖刺激的胰岛素释放，从而在空腹状态下协调能量摄入、储存和燃料利用。相反，其循环水平通常在餐后下降，以解除由瘦素和胰岛素调控的饱腹通路的抑制。在肥胖症中，胃饥饿素抑制会减弱进食引起的食欲抑制，并损害代谢灵活性。相反，在恶病质和慢性疾病中，胃饥饿素水平降低可能会加剧负能量平衡和肌肉萎缩，最终导致在过度摄食和分解代谢状态下，胃饥饿素-生长激素释放肽受体（GHSR）信号传导失调。 |
| 参考文献 |
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