Protein A/G免疫沉淀磁珠

仅限科研使用

Selleck Protein A/G免疫沉淀磁珠使用“纳米表面生物技术(S-TEC),Protein A/G包被在超顺磁性磁珠微球表面,包被密度高达9.3×1013个分子/平方厘米。与同类产品相比,Selleck Protein A/G免疫沉淀磁珠表面具有更多的抗体结合位点。该磁珠可用于蛋白质免疫共沉淀。

Protein A/G免疫沉淀磁珠

产品优势

省时:比亲和凝胶法节省大约80min(以IP实验为例比较);

操作简单:磁性分离,无需离心;

非特异低:亲和凝胶孔径大,容易产生非特异吸附,而磁珠孔径小,不容易产生非特异吸附;

结合量高:磁珠表面PorteinA/G的蛋白包被量高达9.3×1013个分子/平方厘米, 抗体加载量为0.4-0.5 mg/mL磁珠悬液。

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产品描述

Protein A/G免疫沉淀磁珠使用“纳米表面生物技术”(S-TEC),Protein A/G包被在超顺磁性磁珠微球表面, 包被密度高达9.3×1013个分子/平方厘米。与同类产品相比,Selleck Protein A/G免疫沉淀磁珠表面具有更多的抗体结合位点。在Co-IP实验中,只需使用更少的磁珠量,非特异性结合低,使用简便有效。Selleck Protein A/G免疫沉淀磁珠具有大面积特异的表面区域,从而大大缩短抗体吸附和抗原结合的时间。最短时,抗原和抗体的结合时间只需10分钟,可以在30分钟内完成完整的Co-IP实验。Selleck Protein A/G免疫沉淀磁珠适用的范围广泛,例如细胞裂解液、细胞分泌液上清、血清、动物腹水以及其它的免疫抗原等。

特性

Protein A/G磁珠是将Protein A重组蛋白和Protein G重组蛋白分别偶联到磁珠表面制备而成的亲和纯化磁珠。其中,Protein A含有四个IgG的Fc结合区域,而Protein G含有两个IgG的Fc结合区域。Protein A/G磁珠结合了Protein A和Protein G的优点,能够高效捕获和纯化a广泛种属和亚类的IgG抗体。与单独使用Protein A或Protein G相比,Protein A/G磁珠的IgG结合能力更强,且结合过程受pH值影响更小。

产品性质

浓度 10 mg/mL
磁珠大小 100 nm
人IgG结合能力 0.4-0.5 mg/mL
配体 重组蛋白A/G
应用 Protein纯化,免疫沉淀
pH稳定性 6-8 (长期)
运输条件 4°C冰袋

储存条件(自收到货起)

4°C可以储存2年。在缺乏甘油的情况下避免反复冻融。

实验方法

图1展示了免疫共沉淀(Co-IP)的操作方法。可以根据抗体类型和靶蛋白进行进一步的优化。Protein A/G免疫磁珠是进行Co-IP实验的最佳方案。

表1 免疫共沉淀(IP)的操作方法

推荐的缓冲液配方

表2. 推荐的缓冲液配方
缓冲液 推荐配方(自备)
Binding buffer 50 mM Tris, 150 mM NaCl, 0.1%-0.5% detergent (TritonX-100, Tween 20 or NP40), pH 7.5
Wash buffer 50 mM Tris, 150 mM NaCl, 0.1%-0.5% detergent, pH 7.5
Elution buffer 0.1 M -0.2 M Glycine, 0.1%-0.5% detergent, pH 2.5-3.1
(or 0.1 M citric acid, 0.1%-0.5% detergent, pH 2.5-3.1)
Neutralize buffer 1M Tris, pH8.0

实验之前的注意事项

1 进行Co-IP实验之前,请仔细阅读操作说明;
2 该产品需要使用磁力架
3 使用之前,请将Protein A/G免疫磁珠混匀;
4 Protein A/G免疫磁珠应该保持在储存液中避免干掉;
5 Protein A/G免疫磁珠应避免冻融或离心;
6 为保证最佳结果,请选择特异性好的抗体;
7 根据不同的抗体和抗原仅进行实验方法的优化;

表1. 抗体与Protein A/G及Protein A的结合能力比较
Species Antibody class sProtein A/G sProtein A
Human Total IgG +++++ +++++
IgG1, IgG2 +++++ +++++
IgG3 +++++
IgG4 +++++ +++++
IgM
IgD
IgA
IgA1, IgA2
IgE +++ +++
Fab
ScFv
Mouse Total IgG +++++ +++++
IgM
IgG1 +++
IgG2a +++ +++
IgG2b +++ +++
IgG3 +++ +++++
Rat Total IgG +++
IgG 1 +++ +++
IgG2a +++++ +++
IgG2b +++
IgG2c +++++ +++
Cow Total IgG +++++
IgG1 +++++
IgG2 +++++ +++++
Goat Total IgG +++++
IgG1 +++++
IgG2 +++++ +++++
Sheep Total IgG +++++
IgG1 +++++
IgG2 +++++ +++++
Horse Total IgG +++++
IgG(ab), IgG(c)
IgG(T) +++++
Rabbit Total IgG +++++ +++++
Guinea pig Total IgG +++++ +++++
Hamster Total IgG +++ +++
Pig Total IgG +++++ +++++
Donkey Total IgG +++++ +++
Cat Total IgG +++++ +++++
Dog Total IgG +++++ +++++
Monkey Total IgG +++++ +++++
Chicken Total IgG

Notes: "+"= weak binding, "+++"=medium binding, "+++++"=strong binding, "-"=no binding

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