α-Internexin Rabbit mAb
目录号: F3295
使用信息
| 稀释比例 |
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| 抗体应用 |
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| WB, IP, IHC, IF, FCM |
| 抗体类型 |
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| Rabbit |
| 反应性 |
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| Human, Rat, Mouse |
| 储存液配方 |
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| PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3 |
| 储存条件(自收到货起) |
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| -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years |
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预测分子量
实际分子量
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52 kDa, 55 kDa
60 kDa, 66 kDa
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| *为什么预测分子量和实际分子量会有不同？ 以下原因可能会导致蛋白分子量与预测不同：翻译后修饰（磷酸化/糖基化）；剪接变体和异构体；相对电荷；多聚体。 |
实验方法
| IF |
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| IHC |
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实验步骤：
脱蜡/补液
1. 脱蜡/水合切片：
2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。
3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。
4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。
5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾； 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
染色
1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。
2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
13. 如果需要，用苏木精复染切片。
14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒； 在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒； 在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。
22. 用盖玻片和封固剂封固切片。
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生物描述
| 特异性 |
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| α Internexin Rabbit mAb 用于检测内源性 α Internexin 总的蛋白水平。 |
| 别名 |
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| alpha Internexin |
| 克隆号 |
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| M10F17 |
| 背景 |
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| α‑Internexin是一种IV型中间纤维蛋白，主要在中枢神经系统（CNS）的神经元中表达，对维持细胞骨架结构和功能起关键作用。其结构由一个保守的α螺旋杆状结构域和两侧的头部及尾部区域构成，通过二聚体、四聚体形成及纤维延伸的逐步过程组装成约10纳米的纤维。α‑Internexin既可形成同聚体，也可与神经纤维三聚体蛋白（NF-L、NF-M和NF-H）整合形成异聚体，从而有助于轴突稳定、直径调控及树突棘维持。它在神经元早期发育中高表达，成熟神经元中与神经纤维共存并保持固定比例，支持轴突运输，并与如Jacob和ERK等信号分子相互作用，将细胞骨架动态与突触信号相联系。其失调会导致神经元中间纤维包涵病（NIFID）、阿尔茨海默病及与HTLV-1相关的脊髓病等神经退行性疾病。 |
| 参考文献 |
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