Anti-Monocyte + Macrophage Rat Antibody [E17C4]

目录号: F3741

抗体应用：反应性：Mouse

Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded mouse carotid artery tissue with F3741 at 1:100 dilution.,
Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded mouse carotid artery tissue with F3741 at 1:100 dilution.,

规格	价格	库存
20uL	790	现货
50uL	1240	现货
100uL	1990	现货
100uL*2	3790	现货
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使用信息

稀释比例

抗体应用
IHC, FCM

反应性
Mouse

抗体类型
Rat

储存液配方
PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件(自收到货起)
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

实验方法

IHC
实验步骤：脱蜡/补液 1. 脱蜡/水合切片： 2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。 3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。 4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。 5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾；在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。在工作台上冷却玻片 30 分钟。染色 1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。 2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。 3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。 5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。 6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。 7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。 8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。在加湿室中室温孵育 30 分钟。 9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。 10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。 11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。 12. 将载玻片浸入 dH2O 中。 13. 如果需要，用苏木精复染切片。 14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒；在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。 16. 用盖玻片和封固剂封固切片。

IHC

实验步骤：

脱蜡/补液

1. 脱蜡/水合切片：

2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。

3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。

4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。

5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾；在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。在工作台上冷却玻片 30 分钟。

染色

1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。

2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。

3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。

5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。

6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。

7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。

8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。在加湿室中室温孵育 30 分钟。

9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。

10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。

11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。

12. 将载玻片浸入 dH2O 中。

13. 如果需要，用苏木精复染切片。

14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒；在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。

16. 用盖玻片和封固剂封固切片。

Datasheet & SDS

生物描述

特异性
Anti-Monocyte + Macrophage Rat Antibody [E17C4] 可检测内源性单核细胞和巨噬细胞总抗原。该抗体可识别小鼠巨噬细胞和单核细胞的胞内抗原。它与所有小鼠品系淋巴器官中的巨噬细胞均有强烈反应。

克隆号
E17C4

背景
单核细胞和巨噬细胞是先天免疫系统的重要组成部分，在启动和协调炎症反应中发挥着核心作用。除了促进炎症介质的产生和塑造先天性和适应性免疫之外，它们在消解炎症和恢复组织稳态方面也同样至关重要。因此，其功能失调是慢性感染、自身免疫性疾病和严重无菌性炎症疾病发病机制的共同特征。单核细胞占循环白细胞的5-10%，是骨髓来源的单核细胞，寿命较短，仅为1-3天。在稳态条件下，它们支持稳态，并保留分化为组织巨噬细胞的能力。在炎症期间，单核细胞被主动募集到受累部位，在那里分化为炎症巨噬细胞或树突状细胞。巨噬细胞分布于全身所有组织，并表现出显著的功能异质性。它们对于组织发育、免疫监视和维持局部稳态至关重要。许多巨噬细胞群是在胚胎发生过程中建立的，源自卵黄囊或胎儿肝脏祖细胞，并且在正常条件下可以独立于单核细胞补充而存在。相比之下，皮肤、心脏和肠道等组织中的巨噬细胞最初由胚胎祖细胞接种，但在出生后迅速被源自造血干细胞的单核细胞取代。重要的是，组织驻留巨噬细胞既具有增殖能力，又具有自我更新潜力。单核细胞和巨噬细胞的活化和极化都是由它们通过模式识别受体 (PRR) 识别病原体相关或损伤相关的分子模式 (PAMP 和 DAMP) 而触发的，这使得它们能够调整其对各种生理和病理信号的反应。

背景

单核细胞和巨噬细胞是先天免疫系统的重要组成部分，在启动和协调炎症反应中发挥着核心作用。除了促进炎症介质的产生和塑造先天性和适应性免疫之外，它们在消解炎症和恢复组织稳态方面也同样至关重要。因此，其功能失调是慢性感染、自身免疫性疾病和严重无菌性炎症疾病发病机制的共同特征。单核细胞占循环白细胞的5-10%，是骨髓来源的单核细胞，寿命较短，仅为1-3天。在稳态条件下，它们支持稳态，并保留分化为组织巨噬细胞的能力。在炎症期间，单核细胞被主动募集到受累部位，在那里分化为炎症巨噬细胞或树突状细胞。巨噬细胞分布于全身所有组织，并表现出显著的功能异质性。它们对于组织发育、免疫监视和维持局部稳态至关重要。许多巨噬细胞群是在胚胎发生过程中建立的，源自卵黄囊或胎儿肝脏祖细胞，并且在正常条件下可以独立于单核细胞补充而存在。相比之下，皮肤、心脏和肠道等组织中的巨噬细胞最初由胚胎祖细胞接种，但在出生后迅速被源自造血干细胞的单核细胞取代。重要的是，组织驻留巨噬细胞既具有增殖能力，又具有自我更新潜力。单核细胞和巨噬细胞的活化和极化都是由它们通过模式识别受体 (PRR) 识别病原体相关或损伤相关的分子模式 (PAMP 和 DAMP) 而触发的，这使得它们能够调整其对各种生理和病理信号的反应。

参考文献
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35741108/

PVDF膜孔径规格选择参照表

Protein Size (kDa)	PVDF Transfer Membrane Pore Size (μm)
< 10	0.22
10-20	0.22
20-30	0.45
30-45	0.45
45-70	0.45
80-100	0.45
100-140	0.45
> 140	0.45

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* 必填项

Protein Size (kDa)	Separating Gel Percentage
4-40	20%
12-45	15%
10-70	12.5%
15-100	10%
25-100	8%
60-210	5%