Anti-Nav1.8/SCN10A Mouse Antibody [F24B8]

目录号: F3462

抗体应用：反应性：Mouse, Rat

Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded mouse skin tissue with F3462 at 1:100 dilution.,
Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded mouse skin tissue with F3462 at 1:100 dilution.,

规格	价格	库存
20uL	790	现货
50uL	1240	现货
100uL	1990	现货
100uL*2	3790	现货
400-668-6834 info@selleck.cn

使用信息

稀释比例
IHC1:100

抗体应用
IHC

反应性
Mouse, Rat

抗体类型
Mouse

储存液配方
PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件(自收到货起)
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

阳性对照	Mouse dorsal root ganglia; Rat dorsal root ganglia
阴性对照

实验方法

IHC
实验步骤：脱蜡/补液 1. 脱蜡/水合切片： 2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。 3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。 4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。 5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾；在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。在工作台上冷却玻片 30 分钟。染色 1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。 2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。 3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。 5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。 6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。 7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。 8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。在加湿室中室温孵育 30 分钟。 9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。 10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。 11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。 12. 将载玻片浸入 dH2O 中。 13. 如果需要，用苏木精复染切片。 14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒；在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。 16. 用盖玻片和封固剂封固切片。

IHC

实验步骤：

脱蜡/补液

1. 脱蜡/水合切片：

2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。

3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。

4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。

5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾；在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。在工作台上冷却玻片 30 分钟。

染色

1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。

2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。

3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。

5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。

6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。

7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。

8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。在加湿室中室温孵育 30 分钟。

9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。

10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。

11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。

12. 将载玻片浸入 dH2O 中。

13. 如果需要，用苏木精复染切片。

14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒；在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。

16. 用盖玻片和封固剂封固切片。

Datasheet & SDS

生物描述

特异性
Anti-Nav1.8/SCN10A Mouse Antibody [F24B8] 可检测内源性 Nav1.8/SCN10A 总蛋白水平。

蛋白定位
细胞膜，内膜系统

Uniprot ID
Q9Y5Y9

克隆号
F24B8

别名
Sodium channel protein type 10 subunit alpha, Peripheral nerve sodium channel 3, Sodium channel protein type X subunit alpha, Voltage-gated sodium channel subunit alpha Nav1.8, PN3, hPN3, SCN10A

背景
Nav1.8/SCN10A由SCN10A基因编码，是一个电压门控钠通道α亚基，属于河豚毒素抗性类，其特征是其孔区发生半胱氨酸取代，从而对纳摩尔浓度的河豚毒素抑制产生抗性。从结构上讲，它是一个大型跨膜蛋白，具有四个同源结构域（I-IV），每个结构域包含六个跨膜片段（S1-S6），构成电压感应区和成孔区。NaV1.8通常与调节门控和运输的β亚基相关。NaV1.8主要在背根神经节（DRG）和颅神经节的小直径和中等直径的痛性感觉神经元中表达，但也存在于心脏的周围神经元件中，尤其是心内神经节，而在心肌细胞中则不存在。功能上，NaV1.8 在相对去极化的电位下激活，缓慢失活，并将钠电流维持在亚阈值电压，从而实现重复动作电位放电和持续兴奋性，尤其是在低温下。在背根神经节 (DRG) 神经元中，它通过放大动作电位阈值附近的兴奋性并与 NaV1.7 相互作用，在疼痛信号传导中发挥关键作用；而在心内神经元中，它调节放电频率和神经递质释放，可能通过神经控制而非直接影响心肌细胞去极化来调节心脏传导。

背景

Nav1.8/SCN10A由SCN10A基因编码，是一个电压门控钠通道α亚基，属于河豚毒素抗性类，其特征是其孔区发生半胱氨酸取代，从而对纳摩尔浓度的河豚毒素抑制产生抗性。从结构上讲，它是一个大型跨膜蛋白，具有四个同源结构域（I-IV），每个结构域包含六个跨膜片段（S1-S6），构成电压感应区和成孔区。NaV1.8通常与调节门控和运输的β亚基相关。NaV1.8主要在背根神经节（DRG）和颅神经节的小直径和中等直径的痛性感觉神经元中表达，但也存在于心脏的周围神经元件中，尤其是心内神经节，而在心肌细胞中则不存在。功能上，NaV1.8 在相对去极化的电位下激活，缓慢失活，并将钠电流维持在亚阈值电压，从而实现重复动作电位放电和持续兴奋性，尤其是在低温下。在背根神经节 (DRG) 神经元中，它通过放大动作电位阈值附近的兴奋性并与 NaV1.7 相互作用，在疼痛信号传导中发挥关键作用；而在心内神经元中，它调节放电频率和神经递质释放，可能通过神经控制而非直接影响心肌细胞去极化来调节心脏传导。

参考文献
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/39378238/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22723301/

PVDF膜孔径规格选择参照表

Protein Size (kDa)	PVDF Transfer Membrane Pore Size (μm)
< 10	0.22
10-20	0.22
20-30	0.45
30-45	0.45
45-70	0.45
80-100	0.45
100-140	0.45
> 140	0.45

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* 必填项

Protein Size (kDa)	Separating Gel Percentage
4-40	20%
12-45	15%
10-70	12.5%
15-100	10%
25-100	8%
60-210	5%