ARF4 Antibody (Mouse mAb) [M2B13]

目录号: F5212

抗体应用：反应性：Mouse, Rat, Human

规格	价格	库存
20uL	790	现货
50uL	1240	现货
100uL	1990	现货
100uL*2	3790	现货
400-668-6834 info@selleck.cn

使用信息

稀释比例
WB1:5000-1:50000 IHC1:1000-1:4000 IF1:400-1:1600 FCM1:5000

抗体应用
WB, IHC, IF, FCM, ELISA

反应性
Mouse, Rat, Human

抗体类型
Mouse Monoclonal Antibody

储存液配方
PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件(自收到货起)
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

预测分子量实际分子量
21 kDa 18 kDa
^*为什么预测分子量和实际分子量会有不同？以下原因可能会导致蛋白分子量与预测不同：翻译后修饰（磷酸化/糖基化）；剪接变体和异构体；相对电荷；多聚体。

Datasheet & SDS

生物描述

特异性
ARF4 Antibody (Mouse mAb) [M2B13] 可检测内源性 ARF4 总蛋白水平。

克隆号
M2B13

别名
ADP-ribosylation factor 4, ARF4, ARF2

背景
ARF4，也称为ARF2，属于Ras超家族小GTP酶中的ADP核糖基化因子家族，作为II类Arf发挥作用，在非活性GDP结合状态和活性GTP结合构象之间循环，后者决定其与膜的结合和效应蛋白的结合。激活的GTP结合ARF4与反式高尔基网络结合，并直接结合位于感觉受体视紫红质胞质C端尾部的特定纤毛靶向序列——VxPx基序。这种直接的受体-GTP酶相互作用在产生高尔基体后运输载体的位点启动特定纤毛膜靶向复合物的组装。该运输复合物还包含小 GTP 酶 Rab11、Rab11/Arf 效应蛋白 FIP3 和 Arf GTP 酶激活蛋白 ASAP1。ASAP1 既作为 ARF4 GTP 酶激活蛋白，驱动 ARF4 上的 GTP 水解，又作为 ARF4 效应蛋白，调节运输载体从反式高尔基网络的出芽，将 ARF4 失活直接与囊泡裂解偶联，而不是将 GTP 水解视为纯粹的末端复合物解体事件。该GTP酶循环的基因破坏会导致明确的运输缺陷：ARF4点突变体特异性地损害了ASAP1介导的GTP水解，导致视紫红质运输异常，并伴有细胞骨架和形态异常，最终导致转基因动物视网膜退化。这表明ARF4-ASAP1 GTP水解步骤与感光细胞的结构完整性直接相关，而不仅仅是与视紫红质的运输相关。由于ARF4识别的VxPx基序存在于视紫红质以外的其他纤毛膜蛋白中，因此人们认为这种基于ARF4的靶向复合物作为一种保守机制，用于选择和包装最终递送至初级纤毛的货物。这扩展了ARF4的相关性，使其不仅局限于感光细胞生物学，还扩展到与多种涉及初级纤毛功能障碍的人类疾病相关的纤毛运输通路。在货物结合的上游，Arf鸟嘌呤核苷酸交换因子GBF1通过与小GTP酶Rab6相互作用定位于反式高尔基膜。货物结合以及ARF4与GBF1的调控结构域DCB-HUS的结合，刺激活性GTP结合的ARF4快速积累，从而建立一个正反馈回路：进入的货物本身促进GTP酶的激活，而激活是货物自身包装到运输载体所必需的。这种货物刺激的激活机制，以及下游ASAP1依赖的载体出芽所需的水解步骤，使ARF4成为纤毛导向膜运输中的一个关键检查点。任何一个步骤的功能障碍都足以导致感觉受体错位和视网膜退行性表型。

背景

ARF4，也称为ARF2，属于Ras超家族小GTP酶中的ADP核糖基化因子家族，作为II类Arf发挥作用，在非活性GDP结合状态和活性GTP结合构象之间循环，后者决定其与膜的结合和效应蛋白的结合。激活的GTP结合ARF4与反式高尔基网络结合，并直接结合位于感觉受体视紫红质胞质C端尾部的特定纤毛靶向序列——VxPx基序。这种直接的受体-GTP酶相互作用在产生高尔基体后运输载体的位点启动特定纤毛膜靶向复合物的组装。该运输复合物还包含小 GTP 酶 Rab11、Rab11/Arf 效应蛋白 FIP3 和 Arf GTP 酶激活蛋白 ASAP1。ASAP1 既作为 ARF4 GTP 酶激活蛋白，驱动 ARF4 上的 GTP 水解，又作为 ARF4 效应蛋白，调节运输载体从反式高尔基网络的出芽，将 ARF4 失活直接与囊泡裂解偶联，而不是将 GTP 水解视为纯粹的末端复合物解体事件。该GTP酶循环的基因破坏会导致明确的运输缺陷：ARF4点突变体特异性地损害了ASAP1介导的GTP水解，导致视紫红质运输异常，并伴有细胞骨架和形态异常，最终导致转基因动物视网膜退化。这表明ARF4-ASAP1 GTP水解步骤与感光细胞的结构完整性直接相关，而不仅仅是与视紫红质的运输相关。由于ARF4识别的VxPx基序存在于视紫红质以外的其他纤毛膜蛋白中，因此人们认为这种基于ARF4的靶向复合物作为一种保守机制，用于选择和包装最终递送至初级纤毛的货物。这扩展了ARF4的相关性，使其不仅局限于感光细胞生物学，还扩展到与多种涉及初级纤毛功能障碍的人类疾病相关的纤毛运输通路。在货物结合的上游，Arf鸟嘌呤核苷酸交换因子GBF1通过与小GTP酶Rab6相互作用定位于反式高尔基膜。货物结合以及ARF4与GBF1的调控结构域DCB-HUS的结合，刺激活性GTP结合的ARF4快速积累，从而建立一个正反馈回路：进入的货物本身促进GTP酶的激活，而激活是货物自身包装到运输载体所必需的。这种货物刺激的激活机制，以及下游ASAP1依赖的载体出芽所需的水解步骤，使ARF4成为纤毛导向膜运输中的一个关键检查点。任何一个步骤的功能障碍都足以导致感觉受体错位和视网膜退行性表型。

参考文献
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19153612/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29025970/

PVDF膜孔径规格选择参照表

Protein Size (kDa)	PVDF Transfer Membrane Pore Size (μm)
< 10	0.22
10-20	0.22
20-30	0.45
30-45	0.45
45-70	0.45
80-100	0.45
100-140	0.45
> 140	0.45

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* 必填项

Protein Size (kDa)	Separating Gel Percentage
4-40	20%
12-45	15%
10-70	12.5%
15-100	10%
25-100	8%
60-210	5%