BRAF (mutated V600E) Antibody (Mouse mAb) [M8P1]

目录号: F2152

抗体应用：反应性：Human

规格	价格	库存
20uL	790	现货
50uL	1240	现货
100uL	1990	现货
100uL*2	3790	现货
400-668-6834 info@selleck.cn

使用信息

稀释比例
WB1:1000 IHC1:1000

抗体应用
WB, IHC

反应性
Human

抗体类型
Mouse Monoclonal Antibody

储存液配方
PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件(自收到货起)
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

预测分子量实际分子量
84 kDa 85 kDa,36 kDa
^*为什么预测分子量和实际分子量会有不同？以下原因可能会导致蛋白分子量与预测不同：翻译后修饰（磷酸化/糖基化）；剪接变体和异构体；相对电荷；多聚体。

Datasheet & SDS

生物描述

特异性
BRAF (mutated V600E) Antibody (Mouse mAb) [M8P1] 可检测 V600E 突变的内源性 BRAF 总蛋白水平。

克隆号
M8P1

别名
BRAF1, RAFB1, BRAF, Serine/threonine-protein kinase B-raf, Proto-oncogene B-Raf, p94, v-Raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1

背景
BRAF V600E 是 RAF 家族丝氨酸/苏氨酸激酶 BRAF 的一种致癌变体，其激酶结构域激活区第 600 位密码子上的缬氨酸被谷氨酸取代，产生一种组成型活性酶，该酶能够持续驱动 MAPK/ERK 信号通路，且不依赖于上游 RAS 信号输入。该激酶保留了 RAF 蛋白典型的调控和催化结构，包括 N 端 RAS 结合和调控区以及 C 端激酶结构域；V600E 突变模拟了激活区内的磷酸化，稳定了活性构象，使激酶活性比野生型 BRAF 提高数百倍，并促进单体信号传导，从而有效磷酸化 MEK1/2。 BRAF V600E持续激活MEK-ERK通路，改变调控细胞增殖、分化和凋亡的基因转录，并通过上调细胞周期蛋白D1、下调p27^Kip1以及调节促凋亡和抗凋亡因子，促进黑素细胞存活和细胞周期进程。同时，BRAF V600E还影响细胞衰老程序，并与其他损伤协同作用，克服黑色素瘤发生过程中癌基因诱导的生长停滞。BRAF V600E重塑染色质和基因表达模式，广泛改变与细胞黏附、侵袭、免疫逃逸和细胞因子信号传导相关的基因，表明该突变驱动细胞增殖，并通过MAPK依赖性转录程序重塑肿瘤微环境和转移行为。在黑色素瘤中，约一半的病例存在BRAF激活突变，其中超过90%的突变涉及V600E，这定义了一个具有特征性临床病理特征且高度依赖MAPK信号通路的主要分子亚型。BRAF V600E也存在于一种独特的结直肠癌亚型中，该亚型起源于锯齿状途径，在肿瘤发生早期即出现，并与高水平的微卫星不稳定性、CpG岛甲基化表型和右侧结肠位置相关。由于MAPK通路占主导地位，这些肿瘤通常预后不良，且对标准抗EGFR疗法的获益有限。在结直肠癌中，BRAF V600E与WNT信号通路相互作用，在缺乏常见APC突变的情况下增强WNT活性，并依赖RNF43和其他改变来维持β-catenin驱动的转录，这凸显了MAPK和WNT级联在这种侵袭性亚型中的相互作用。 BRAF V600E 在 MAPK 通路激活中的核心作用使其成为一个重要的治疗靶点，而选择性抑制剂如维莫非尼和达拉非尼，通常与 MEK 抑制剂联合使用，可显著抑制 BRAF V600 突变型黑色素瘤和转移性结直肠癌的肿瘤，而获得性耐药通常涉及通过继发性 RAS/RAF 改变重新激活 MAPK 信号传导，或激活平行通路如 PI3K。

背景

BRAF V600E 是 RAF 家族丝氨酸/苏氨酸激酶 BRAF 的一种致癌变体，其激酶结构域激活区第 600 位密码子上的缬氨酸被谷氨酸取代，产生一种组成型活性酶，该酶能够持续驱动 MAPK/ERK 信号通路，且不依赖于上游 RAS 信号输入。该激酶保留了 RAF 蛋白典型的调控和催化结构，包括 N 端 RAS 结合和调控区以及 C 端激酶结构域；V600E 突变模拟了激活区内的磷酸化，稳定了活性构象，使激酶活性比野生型 BRAF 提高数百倍，并促进单体信号传导，从而有效磷酸化 MEK1/2。 BRAF V600E持续激活MEK-ERK通路，改变调控细胞增殖、分化和凋亡的基因转录，并通过上调细胞周期蛋白D1、下调p27^Kip1以及调节促凋亡和抗凋亡因子，促进黑素细胞存活和细胞周期进程。同时，BRAF V600E还影响细胞衰老程序，并与其他损伤协同作用，克服黑色素瘤发生过程中癌基因诱导的生长停滞。BRAF V600E重塑染色质和基因表达模式，广泛改变与细胞黏附、侵袭、免疫逃逸和细胞因子信号传导相关的基因，表明该突变驱动细胞增殖，并通过MAPK依赖性转录程序重塑肿瘤微环境和转移行为。在黑色素瘤中，约一半的病例存在BRAF激活突变，其中超过90%的突变涉及V600E，这定义了一个具有特征性临床病理特征且高度依赖MAPK信号通路的主要分子亚型。BRAF V600E也存在于一种独特的结直肠癌亚型中，该亚型起源于锯齿状途径，在肿瘤发生早期即出现，并与高水平的微卫星不稳定性、CpG岛甲基化表型和右侧结肠位置相关。由于MAPK通路占主导地位，这些肿瘤通常预后不良，且对标准抗EGFR疗法的获益有限。在结直肠癌中，BRAF V600E与WNT信号通路相互作用，在缺乏常见APC突变的情况下增强WNT活性，并依赖RNF43和其他改变来维持β-catenin驱动的转录，这凸显了MAPK和WNT级联在这种侵袭性亚型中的相互作用。 BRAF V600E 在 MAPK 通路激活中的核心作用使其成为一个重要的治疗靶点，而选择性抑制剂如维莫非尼和达拉非尼，通常与 MEK 抑制剂联合使用，可显著抑制 BRAF V600 突变型黑色素瘤和转移性结直肠癌的肿瘤，而获得性耐药通常涉及通过继发性 RAS/RAF 改变重新激活 MAPK 信号传导，或激活平行通路如 PI3K。

参考文献
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22554099/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30598662/

PVDF膜孔径规格选择参照表

Protein Size (kDa)	PVDF Transfer Membrane Pore Size (μm)
< 10	0.22
10-20	0.22
20-30	0.45
30-45	0.45
45-70	0.45
80-100	0.45
100-140	0.45
> 140	0.45

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* 必填项

Protein Size (kDa)	Separating Gel Percentage
4-40	20%
12-45	15%
10-70	12.5%
15-100	10%
25-100	8%
60-210	5%