Nurr1 Antibody [L9M11]

目录号: F2094

抗体应用：反应性：Rat

规格	价格	库存
20uL	790	现货
50uL	1240	现货
100uL	1990	现货
100uL*2	3790	现货
400-668-6834 info@selleck.cn

使用信息

稀释比例
IHC1:200

抗体应用
IHC

反应性
Rat

抗体类型
Mouse Monoclonal Antibody

储存液配方
PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件(自收到货起)
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

阳性对照	Rat cerebral nerve cell
阴性对照

实验方法

IHC
实验步骤：脱蜡/补液 1. 脱蜡/水合切片： 2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。 3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。 4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。 5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾；在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。在工作台上冷却玻片 30 分钟。染色 1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。 2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。 3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。 5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。 6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。 7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。 8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。在加湿室中室温孵育 30 分钟。 9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。 10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。 11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。 12. 将载玻片浸入 dH2O 中。 13. 如果需要，用苏木精复染切片。 14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。 15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒；在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。 16. 用盖玻片和封固剂封固切片。

IHC

实验步骤：

脱蜡/补液

1. 脱蜡/水合切片：

2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。

3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。

4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。

5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾；在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。在工作台上冷却玻片 30 分钟。

染色

1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。

2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。

3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。

5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。

6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。

7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。

8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。在加湿室中室温孵育 30 分钟。

9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。

10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。

11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。

12. 将载玻片浸入 dH2O 中。

13. 如果需要，用苏木精复染切片。

14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。

15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒；在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒；在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。

16. 用盖玻片和封固剂封固切片。

Datasheet & SDS

生物描述

特异性
Nurr1 Antibody [L9M11] 可检测内源性 Nurr1 总蛋白水平。

蛋白定位
细胞质，细胞核

Uniprot ID
P43354

克隆号
L9M11

别名
NOT; NURR1; TINUR; NR4A2; Nuclear receptor subfamily 4 group A member 2; Immediate-early response protein NOT; Orphan nuclear receptor NURR1; Transcriptionally-inducible nuclear receptor

背景
Nurr1 (NR4A2) 是一种孤儿核受体转录因子，对中脑多巴胺能神经元的特化、存活和维持至关重要。它具有模块化结构，包括：N 端 A/B 转录激活结构域 (AF-1)，具有磷酸化位点（ERK 磷酸化 Ser336）；中央 DNA 结合结构域 (DBD)，具有两个锌指基序，可识别单体中的 NGFI-B 反应元件 (NBRE: AAAGGTCA) 或 RXR 异二聚体中的 IR0 半位点；柔性铰链区，有助于辅因子募集；以及 C 端配体结合结构域 (LBD)，缺乏传统的疏水口袋，但在 H11/H12 上暴露带电螺旋槽，可通过疏水斑块与辅调节因子对接。 Nurr1通过AF-1/2的协同作用持续激活，通过染色质环化和CBP/p300共激活，以及RXRα异二聚化增强复合NBRE-DR5元件的转录，从而驱动多巴胺能基因程序（酪氨酸羟化酶、VMAT2、DAT、Pitx3）。同时，翻译后修饰，如ERK磷酸化增强AF-1活性、K185位点的SUMO化通过CtBP抑制活性、GSK3β磷酸化破坏RXR相互作用，在发育和应激反应过程中精细调控其活性，并与Wnt/β-catenin信号通路偶联以促进祖细胞增殖，与BDNF/TrkB信号通路偶联以发挥神经保护作用。杂合突变（R502X）导致遗传性帕金森病，并伴有TH+神经元减少；而年龄相关性衰退会加剧散发性帕金森病中的多巴胺能神经元丢失。

背景

Nurr1 (NR4A2) 是一种孤儿核受体转录因子，对中脑多巴胺能神经元的特化、存活和维持至关重要。它具有模块化结构，包括：N 端 A/B 转录激活结构域 (AF-1)，具有磷酸化位点（ERK 磷酸化 Ser336）；中央 DNA 结合结构域 (DBD)，具有两个锌指基序，可识别单体中的 NGFI-B 反应元件 (NBRE: AAAGGTCA) 或 RXR 异二聚体中的 IR0 半位点；柔性铰链区，有助于辅因子募集；以及 C 端配体结合结构域 (LBD)，缺乏传统的疏水口袋，但在 H11/H12 上暴露带电螺旋槽，可通过疏水斑块与辅调节因子对接。 Nurr1通过AF-1/2的协同作用持续激活，通过染色质环化和CBP/p300共激活，以及RXRα异二聚化增强复合NBRE-DR5元件的转录，从而驱动多巴胺能基因程序（酪氨酸羟化酶、VMAT2、DAT、Pitx3）。同时，翻译后修饰，如ERK磷酸化增强AF-1活性、K185位点的SUMO化通过CtBP抑制活性、GSK3β磷酸化破坏RXR相互作用，在发育和应激反应过程中精细调控其活性，并与Wnt/β-catenin信号通路偶联以促进祖细胞增殖，与BDNF/TrkB信号通路偶联以发挥神经保护作用。杂合突变（R502X）导致遗传性帕金森病，并伴有TH+神经元减少；而年龄相关性衰退会加剧散发性帕金森病中的多巴胺能神经元丢失。

参考文献
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22405837/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35529439/

PVDF膜孔径规格选择参照表

Protein Size (kDa)	PVDF Transfer Membrane Pore Size (μm)
< 10	0.22
10-20	0.22
20-30	0.45
30-45	0.45
45-70	0.45
80-100	0.45
100-140	0.45
> 140	0.45

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* 必填项

Protein Size (kDa)	Separating Gel Percentage
4-40	20%
12-45	15%
10-70	12.5%
15-100	10%
25-100	8%
60-210	5%