Pancreatic Polypeptide Antibody (Rabbit mAb) [L20N2]
目录号: F5352
抗体应用：
反应性：
-
Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human pancreatic tissue with F5352 at 1:2000 dilution. -
Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human pancreatic tissue with F5352 at 1:2000 dilution.
使用信息
| 稀释比例 |
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| 抗体应用 |
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| IHC |
| 反应性 |
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| Mouse, Rat, Human |
| 抗体类型 |
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| Rabbit Monoclonal Antibody |
| 储存液配方 |
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| PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3 |
| 储存条件(自收到货起) |
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| -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years |
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预测分子量
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10 kDa
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| 阳性对照 | Rat pancreas tissue; Mouse pancreas tissue; Human pancreas tissue |
|---|---|
| 阴性对照 |
实验方法
| IHC |
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实验步骤：
脱蜡/补液
1. 脱蜡/水合切片：
2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。
3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。
4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。
5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾； 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
染色
1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。
2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
13. 如果需要，用苏木精复染切片。
14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒； 在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒； 在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。
16. 用盖玻片和封固剂封固切片。
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生物描述
| 特异性 |
|---|
| Pancreatic Polypeptide Antibody (Rabbit mAb) [L20N2] 可检测内源性 Pancreatic Polypeptide 总蛋白水平。 |
| 蛋白定位 |
|---|
| 细胞外环境 |
| Uniprot ID |
|---|
| P01298 |
| 克隆号 |
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| L20N2 |
| 别名 |
|---|
| PNP, PPY, Pancreatic polypeptide prohormone, PH, Pancreatic polypeptide Y, PNP, PPY, Pancreatic polypeptide, Pancreatic polypeptide Y, Pancreatic prohormone, prepro-PP (prepropancreatic polypeptide) |
| 背景 |
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| 胰多肽（PP）是一种由36个氨基酸组成的神经肽Y（NPY）家族成员，主要在内分泌胰腺的PP（F）细胞中合成和储存，主要分布于胰腺头部腹侧区域。在营养刺激和迷走神经胆碱能输入的响应下，PP被释放到血液循环中，作为消化功能和能量稳态的系统性调节因子。该肽具有典型的PP折叠结构，即一个紧凑的聚脯氨酸II型螺旋和一个α螺旋，其关键侧链能够高亲和力地结合Y4受体，并以较低亲和力结合Y5受体，在某些物种中还能结合Y6受体，从而选择性地激活脑干、下丘脑和胰岛中的G蛋白偶联受体信号通路。餐后，PP的分泌呈双相模式，早期由迷走神经介导，后期则由胆囊收缩素和其他肠道激素驱动。胆碱能迷走神经刺激是胰岛肽（PP）释放的主要驱动因素，也是许多其他促分泌剂的必要通道，因此PP可作为迷走神经张力和内分泌胰腺自主神经调节的敏感指标。循环中的PP反过来作用于外分泌胰腺，抑制其分泌液体、碳酸氢盐和消化酶，并拮抗胆囊收缩素诱导的胰腺分泌；同时，PP还作用于胆道和胃，减少胆囊收缩，改变胃排空，从而协调餐后消化效率并限制胰腺过度分泌。在中枢能量平衡层面，PP通过迷走神经传入纤维和下丘脑核团（包括弓状核、腹内侧核和外侧核）上的Y4受体发挥作用，抑制食物摄入，降低外侧下丘脑“摄食中枢”中食欲素的表达，并增加腹内侧核“饱腹中枢”中脑源性神经营养因子的表达，从而产生净厌食效应，降低外源性PP给药或PP过表达动物模型的体重和脂肪含量。PP还直接作用于胰岛，其α细胞上的Y4/Y1家族受体介导对胰高血糖素分泌的抑制作用，将餐后PP水平升高与肝脏葡萄糖输出的调节联系起来，并与胰岛素和生长抑素共同参与葡萄糖稳态的精细调控。低 PP 反应与迷走神经功能障碍和慢性胰腺炎有关，而 PP 水平显著升高与分泌 PP 的神经内分泌肿瘤有关，同时，在人体中进行药理学或超生理剂量的 PP 输注会改变饱腹感、胃容受性和食物耐受性，这凸显了其作为探测肠脑信号传导的工具以及作为抗肥胖和代谢疗法候选靶点的潜力。 |
| 参考文献 |
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