Phospho-Bim (Ser69) Antibody (Rabbit mAb) [C24C5]

目录号: F0796

抗体应用：反应性：Human, Mouse

规格	价格	库存
20uL	790	现货
50uL	1240	现货
100uL	1990	现货
100uL*2	3790	现货
400-668-6834 info@selleck.cn

使用信息

稀释比例
WB1:1000 IP1:50

抗体应用
WB, IP

反应性
Human, Mouse

抗体类型
Rabbit Monoclonal Antibody

储存液配方
PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件(自收到货起)
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

预测分子量
22 kDa

Datasheet & SDS

生物描述

特异性
Phospho-Bim (Ser69) Antibody (Rabbit mAb) [C24C5] 仅识别 Ser69 处磷酸化的内源性 Bim 蛋白水平。

克隆号
C24C5

别名
B2L11; BAM; bcl-2 interacting mediator of cell death; BCL2 like 11; Bcl2-interacting mediator of cell death; Bcl2-L-11; BCL2L11; BIM; BIM-alpha6; BIM-beta6; BIM-beta7; BimEL; BimL; BOD

背景
Bim是Bcl-2家族中一种仅含BH3结构域的促凋亡蛋白，它拮抗促生存的Bcl-2蛋白并促进线粒体凋亡。BimEL剪接变体包含一个N端调控区，其中人类的Ser69（小鼠和大鼠的Ser65）是一个关键的磷酸化位点，它通过ERK1/2 MAPK通路整合生存信号。BimEL携带一个BH3结构域，该结构域介导其与抗凋亡蛋白（如Bcl-2、Bcl-xL和Mcl-1）的高亲和力结合；其相邻的C端疏水区段支持其线粒体定位；而Ser69附近的N端区域包含一个ERK结合位点和一个磷酸化降解子，该降解子控制蛋白质周转，而非直接与Bcl-2家族靶蛋白结合。生长因子或佛波酯刺激激活ERK1/2，导致BimEL在Ser69位点直接磷酸化，该残基是ERK介导修饰的必要且充分条件；磷酸化BimEL（Ser69）以迁移速度较慢的形式积累，随后快速发生多聚泛素化和蛋白酶体依赖性降解，从而降低BimEL的稳态浓度，并在生长因子撤离后通常有利于细胞凋亡的情况下，使细胞存活的平衡发生转变。ERK1/2通路的激活是驱动BimEL磷酸化和加速周转的必要且充分条件。蛋白酶体抑制或泛素激活酶E1的破坏会阻断这种降解，而BimEL的Ser69突变为甘氨酸的突变体能够抵抗ERK诱导的丢失，并且比野生型BimEL表现出更强的凋亡活性，这表明Ser69位点在促有丝分裂条件下作为关键开关，控制着Bim依赖性死亡信号的强度。Ser69的磷酸化与ERK最小反应区域中其他邻近的磷酸化位点协同作用，该区域能够募集泛素化机制。这种修饰还能促进BimEL与抗凋亡伴侣（如Mcl-1和Bcl-xL）的解离，使BimEL暴露于βTrCP和相关的E3连接酶复合物的识别之下，这些复合物催化多聚泛素化和随后的蛋白酶体加工。因此，磷酸化Bim（Ser69）状态在功能上标记BimEL，使其从线粒体死亡复合物和细胞中移除。在信号网络层面，磷酸化Bim（Ser69）作为受体酪氨酸激酶、BCR-ABL或其他维持MAPK信号通路的致癌驱动因子下游ERK1/2活性的读数；生存因子通路利用此机制维持BimEL的低水平，而ERK1/2的抑制、上游激酶（如MEK）的阻断或致癌驱动因子的中断会导致Ser69磷酸化丧失、未磷酸化BimEL的积累、caspase激活和细胞凋亡的执行。ERK-磷酸化Bim（Ser69）轴对于控制成纤维细胞和上皮细胞在血清或细胞因子撤离期间的细胞凋亡至关重要，在淋巴组织中，它有助于抗原或细胞因子信号与Bim依赖性细胞死亡之间的偶联，尽管其他机制也可以在体内维持Bim的功能。在疾病环境中，许多具有组成型 ERK 激活的癌症通过增强 Ser69 磷酸化和降解而表现出 BimEL 蛋白减少，而减弱 MAPK 信号的靶向治疗通常可以恢复 BimEL 并触发细胞凋亡，因此磷酸化 Bim (Ser69) 被广泛用作机制生物标志物，以监测 ERK 通路活性、Bim 调节以及在激酶抑制剂或应激反应中存活和内在凋亡之间的平衡。

背景

Bim是Bcl-2家族中一种仅含BH3结构域的促凋亡蛋白，它拮抗促生存的Bcl-2蛋白并促进线粒体凋亡。BimEL剪接变体包含一个N端调控区，其中人类的Ser69（小鼠和大鼠的Ser65）是一个关键的磷酸化位点，它通过ERK1/2 MAPK通路整合生存信号。BimEL携带一个BH3结构域，该结构域介导其与抗凋亡蛋白（如Bcl-2、Bcl-xL和Mcl-1）的高亲和力结合；其相邻的C端疏水区段支持其线粒体定位；而Ser69附近的N端区域包含一个ERK结合位点和一个磷酸化降解子，该降解子控制蛋白质周转，而非直接与Bcl-2家族靶蛋白结合。生长因子或佛波酯刺激激活ERK1/2，导致BimEL在Ser69位点直接磷酸化，该残基是ERK介导修饰的必要且充分条件；磷酸化BimEL（Ser69）以迁移速度较慢的形式积累，随后快速发生多聚泛素化和蛋白酶体依赖性降解，从而降低BimEL的稳态浓度，并在生长因子撤离后通常有利于细胞凋亡的情况下，使细胞存活的平衡发生转变。ERK1/2通路的激活是驱动BimEL磷酸化和加速周转的必要且充分条件。蛋白酶体抑制或泛素激活酶E1的破坏会阻断这种降解，而BimEL的Ser69突变为甘氨酸的突变体能够抵抗ERK诱导的丢失，并且比野生型BimEL表现出更强的凋亡活性，这表明Ser69位点在促有丝分裂条件下作为关键开关，控制着Bim依赖性死亡信号的强度。Ser69的磷酸化与ERK最小反应区域中其他邻近的磷酸化位点协同作用，该区域能够募集泛素化机制。这种修饰还能促进BimEL与抗凋亡伴侣（如Mcl-1和Bcl-xL）的解离，使BimEL暴露于βTrCP和相关的E3连接酶复合物的识别之下，这些复合物催化多聚泛素化和随后的蛋白酶体加工。因此，磷酸化Bim（Ser69）状态在功能上标记BimEL，使其从线粒体死亡复合物和细胞中移除。在信号网络层面，磷酸化Bim（Ser69）作为受体酪氨酸激酶、BCR-ABL或其他维持MAPK信号通路的致癌驱动因子下游ERK1/2活性的读数；生存因子通路利用此机制维持BimEL的低水平，而ERK1/2的抑制、上游激酶（如MEK）的阻断或致癌驱动因子的中断会导致Ser69磷酸化丧失、未磷酸化BimEL的积累、caspase激活和细胞凋亡的执行。ERK-磷酸化Bim（Ser69）轴对于控制成纤维细胞和上皮细胞在血清或细胞因子撤离期间的细胞凋亡至关重要，在淋巴组织中，它有助于抗原或细胞因子信号与Bim依赖性细胞死亡之间的偶联，尽管其他机制也可以在体内维持Bim的功能。在疾病环境中，许多具有组成型 ERK 激活的癌症通过增强 Ser69 磷酸化和降解而表现出 BimEL 蛋白减少，而减弱 MAPK 信号的靶向治疗通常可以恢复 BimEL 并触发细胞凋亡，因此磷酸化 Bim (Ser69) 被广泛用作机制生物标志物，以监测 ERK 通路活性、Bim 调节以及在激酶抑制剂或应激反应中存活和内在凋亡之间的平衡。

参考文献
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14555991/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17525735/

PVDF膜孔径规格选择参照表

Protein Size (kDa)	PVDF Transfer Membrane Pore Size (μm)
< 10	0.22
10-20	0.22
20-30	0.45
30-45	0.45
45-70	0.45
80-100	0.45
100-140	0.45
> 140	0.45

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* 必填项

Protein Size (kDa)	Separating Gel Percentage
4-40	20%
12-45	15%
10-70	12.5%
15-100	10%
25-100	8%
60-210	5%