Phospho-BTK (Tyr551) Antibody [D4E1]

目录号: F3973

抗体应用：反应性：Human

规格	价格	库存
20uL	790	现货
50uL	1240	现货
100uL	1990	现货
100uL*2	3790	现货
400-668-6834 info@selleck.cn

使用信息

稀释比例
WB1:1000 IF1:500

抗体应用
WB, IF

反应性
Human

抗体类型
Rabbit Monoclonal Antibody

储存液配方
PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件(自收到货起)
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

预测分子量实际分子量
76 kDa 75 kDa
^*为什么预测分子量和实际分子量会有不同？以下原因可能会导致蛋白分子量与预测不同：翻译后修饰（磷酸化/糖基化）；剪接变体和异构体；相对电荷；多聚体。

Datasheet & SDS

生物描述

特异性
Phospho-BTK (Tyr551) Antibody [D4E1] 仅识别 Tyr551 处磷酸化的内源性 BTK 蛋白水平。

克隆号
D4E1

别名
AGMX1, ATK, BPK, BTK, Tyrosine-protein kinase BTK, Agammaglobulinemia tyrosine kinase, B-cell progenitor kinase, Bruton tyrosine kinase

背景
磷酸化BTK（Tyr551）是指布鲁顿酪氨酸激酶在其C端激酶结构域的激活环酪氨酸残基上发生磷酸化修饰。这种修饰标志着抗原和固有免疫受体下游的催化激活，并将BTK定位为B细胞和其他造血谱系中的中心信号节点。BTK属于Tec家族，其N端包含一个pleckstrin同源结构域，该结构域可结合磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸酯（PI3P），随后是Tec同源区、介导蛋白质-蛋白质相互作用的SH3和SH2结构域，以及一个C端激酶结构域，该结构域的激活环包含关键调控残基Tyr551。 B细胞受体或其他免疫受体的激活导致PI3K依赖性的PIP3生成，BTK通过其PH结构域募集至细胞膜，并使Tyr551暴露于Src家族激酶Lyn和Syk，后者对Tyr551进行反式磷酸化，从而诱导活性酪氨酸激酶特有的构象重排。Tyr551的磷酸化增强了BTK的催化活性，并促进SH3结构域中Tyr223的有效自磷酸化，从而稳定开放的、完全活性的酶构象。该酶构象通过磷酸化PLCγ2等底物来传递B细胞受体信号，并促进下游Ca²⁺动员、PKC激活、NF-κB和MAPK通路激活，以及B细胞活化、存活和分化的转录程序。 Tyr551 的突变会消除 BCR 诱导的钙离子内流，而 Tyr223 的突变则不会，这表明 Tyr551 的磷酸化是功能性 BCR 信号传导的主要决定因素。生化分析表明，激活环的磷酸化直接调节激酶动力学和底物识别。仅在 Tyr551 磷酸化时识别 BTK 的磷酸化特异性抗体表明，BCR 交联或 TLR4 刺激后 Tyr551 的磷酸化迅速增加，并且与膜定位的、具有信号传导能力的 BTK 相关。而 PKCβ 介导的 Ser180 磷酸化会降低 PH 结构域依赖的膜募集，从而限制 Tyr551 的跨磷酸化，为 BTK 激活设定一个负反馈阈值。Tyr551 位点调控的 BTK 活性对于正常的 B 细胞发育至关重要。 BTK 的种系功能丧失会导致 X 连锁无丙种球蛋白血症，并阻碍前 B 细胞的成熟；而异常或组成性 BTK 激活则有助于慢性淋巴细胞白血病和套细胞淋巴瘤等疾病中恶性 B 细胞的存活和增殖，其中 Tyr551 磷酸化提供了通路激活和对共价和非共价 BTK 抑制剂的药效学反应的机制读数。

背景

磷酸化BTK（Tyr551）是指布鲁顿酪氨酸激酶在其C端激酶结构域的激活环酪氨酸残基上发生磷酸化修饰。这种修饰标志着抗原和固有免疫受体下游的催化激活，并将BTK定位为B细胞和其他造血谱系中的中心信号节点。BTK属于Tec家族，其N端包含一个pleckstrin同源结构域，该结构域可结合磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸酯（PI3P），随后是Tec同源区、介导蛋白质-蛋白质相互作用的SH3和SH2结构域，以及一个C端激酶结构域，该结构域的激活环包含关键调控残基Tyr551。 B细胞受体或其他免疫受体的激活导致PI3K依赖性的PIP3生成，BTK通过其PH结构域募集至细胞膜，并使Tyr551暴露于Src家族激酶Lyn和Syk，后者对Tyr551进行反式磷酸化，从而诱导活性酪氨酸激酶特有的构象重排。Tyr551的磷酸化增强了BTK的催化活性，并促进SH3结构域中Tyr223的有效自磷酸化，从而稳定开放的、完全活性的酶构象。该酶构象通过磷酸化PLCγ2等底物来传递B细胞受体信号，并促进下游Ca²⁺动员、PKC激活、NF-κB和MAPK通路激活，以及B细胞活化、存活和分化的转录程序。 Tyr551 的突变会消除 BCR 诱导的钙离子内流，而 Tyr223 的突变则不会，这表明 Tyr551 的磷酸化是功能性 BCR 信号传导的主要决定因素。生化分析表明，激活环的磷酸化直接调节激酶动力学和底物识别。仅在 Tyr551 磷酸化时识别 BTK 的磷酸化特异性抗体表明，BCR 交联或 TLR4 刺激后 Tyr551 的磷酸化迅速增加，并且与膜定位的、具有信号传导能力的 BTK 相关。而 PKCβ 介导的 Ser180 磷酸化会降低 PH 结构域依赖的膜募集，从而限制 Tyr551 的跨磷酸化，为 BTK 激活设定一个负反馈阈值。Tyr551 位点调控的 BTK 活性对于正常的 B 细胞发育至关重要。 BTK 的种系功能丧失会导致 X 连锁无丙种球蛋白血症，并阻碍前 B 细胞的成熟；而异常或组成性 BTK 激活则有助于慢性淋巴细胞白血病和套细胞淋巴瘤等疾病中恶性 B 细胞的存活和增殖，其中 Tyr551 磷酸化提供了通路激活和对共价和非共价 BTK 抑制剂的药效学反应的机制读数。

参考文献
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9188445/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19206206/

PVDF膜孔径规格选择参照表

Protein Size (kDa)	PVDF Transfer Membrane Pore Size (μm)
< 10	0.22
10-20	0.22
20-30	0.45
30-45	0.45
45-70	0.45
80-100	0.45
100-140	0.45
> 140	0.45

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* 必填项

Protein Size (kDa)	Separating Gel Percentage
4-40	20%
12-45	15%
10-70	12.5%
15-100	10%
25-100	8%
60-210	5%