Phospho-Lck (Tyr505) Antibody [P3K14]

目录号: F6281

抗体应用：反应性：Human, Mouse, Rat

Lane 1: Jurkat, Lane 2: Jurkat (phosphatase treated)

规格	价格	库存
20uL	790	现货
50uL	1240	现货
100uL	1990	现货
100uL*2	3790	现货
400-668-6834 info@selleck.cn

使用信息

稀释比例
WB1:1000

抗体应用
WB

反应性
Human, Mouse, Rat

抗体类型
Rabbit Monoclonal Antibody

储存液配方
PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件(自收到货起)
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

预测分子量
56 kDa

Datasheet & SDS

生物描述

特异性
Phospho-Lck (Tyr505) Antibody [P3K14] 仅识别 Tyr505 处磷酸化的内源性 Lck 蛋白水平。

克隆号
P3K14

别名
Tyrosine-protein kinase Lck; Leukocyte C-terminal Src kinase; LSK; Lymphocyte-specific protein tyrosine kinase; Proto-oncogene Lck; T cell-specific protein-tyrosine kinase; p56-LCK; LCK

背景
Tyr505位点的磷酸化Lck代表Lck的非活性形式。Lck是一种Src家族酪氨酸激酶，对启动T淋巴细胞中的T细胞受体信号传导至关重要。Lck具有N端肉豆蔻酰化和棕榈酰化位点，可将其锚定于质膜和高尔基体；其SH3和SH2结构域用于蛋白质相互作用；激酶结构域两侧分别由激活环中的调节性酪氨酸Tyr394和C端尾部的Tyr505侧翼包围。C端Src激酶（Csk）对Tyr505位点的磷酸化诱导磷酸酪氨酸尾部与SH2结构域发生分子内结合，使激酶处于闭合构象，从而抑制其催化活性和底物结合，使Lck在静息T细胞中保持启动但非活性状态。 CD45磷酸酶对Tyr505的去磷酸化暴露了激活环，使得Tyr394位点发生反式自磷酸化，从而稳定开放构象，并在TCR结合后增强其对CD3ζ链上免疫受体酪氨酸激活基序（ITAM）的激酶活性。激活的Lck随后通过其串联的SH2结构域募集并磷酸化磷酸化ITAM上的Zap-70，并通过LAT衔接蛋白的磷酸化传递信号，最终组装成多分子复合物，激活磷脂酶Cγ1、钙离子流、ERK、NF-κB和NFAT通路，进而驱动细胞因子生成、增殖和分化。 Tyr505 磷酸化在未受刺激的状态下占主导地位，TCR 刺激会引发局部去磷酸化，而 Tyr394 磷酸化主要发生在与 TCR 簇结合的质膜附近，其中约 20% 的 Lck 分子发生构象开放。

背景

Tyr505位点的磷酸化Lck代表Lck的非活性形式。Lck是一种Src家族酪氨酸激酶，对启动T淋巴细胞中的T细胞受体信号传导至关重要。Lck具有N端肉豆蔻酰化和棕榈酰化位点，可将其锚定于质膜和高尔基体；其SH3和SH2结构域用于蛋白质相互作用；激酶结构域两侧分别由激活环中的调节性酪氨酸Tyr394和C端尾部的Tyr505侧翼包围。C端Src激酶（Csk）对Tyr505位点的磷酸化诱导磷酸酪氨酸尾部与SH2结构域发生分子内结合，使激酶处于闭合构象，从而抑制其催化活性和底物结合，使Lck在静息T细胞中保持启动但非活性状态。 CD45磷酸酶对Tyr505的去磷酸化暴露了激活环，使得Tyr394位点发生反式自磷酸化，从而稳定开放构象，并在TCR结合后增强其对CD3ζ链上免疫受体酪氨酸激活基序（ITAM）的激酶活性。激活的Lck随后通过其串联的SH2结构域募集并磷酸化磷酸化ITAM上的Zap-70，并通过LAT衔接蛋白的磷酸化传递信号，最终组装成多分子复合物，激活磷脂酶Cγ1、钙离子流、ERK、NF-κB和NFAT通路，进而驱动细胞因子生成、增殖和分化。 Tyr505 磷酸化在未受刺激的状态下占主导地位，TCR 刺激会引发局部去磷酸化，而 Tyr394 磷酸化主要发生在与 TCR 簇结合的质膜附近，其中约 20% 的 Lck 分子发生构象开放。

参考文献
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29262519/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28096507/

PVDF膜孔径规格选择参照表

Protein Size (kDa)	PVDF Transfer Membrane Pore Size (μm)
< 10	0.22
10-20	0.22
20-30	0.45
30-45	0.45
45-70	0.45
80-100	0.45
100-140	0.45
> 140	0.45

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* 必填项

Protein Size (kDa)	Separating Gel Percentage
4-40	20%
12-45	15%
10-70	12.5%
15-100	10%
25-100	8%
60-210	5%