Puromycin Antibody [H12G14]
目录号: F6534
抗体应用：
反应性：
使用信息
| 稀释比例 |
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| 抗体应用 |
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| WB, IP, IHC, IF, FCM |
| 反应性 |
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| Chemical |
| 抗体类型 |
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| Rabbit Monoclonal Antibody |
| 储存液配方 |
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| PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3 |
| 储存条件(自收到货起) |
|---|
| -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years |
生物描述
| 特异性 |
|---|
| Puromycin Antibody [H12G14] 可检测外源性 Puromycin 总水平。 |
| 克隆号 |
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| H12G14 |
| 别名 |
|---|
| Puromycin-sensitive aminopeptidase, PSA, Cytosol alanyl aminopeptidase (AAP-S), NPEPPS, PSA |
| 背景 |
|---|
| 嘌呤霉素是一种天然存在的氨基核苷类抗生素，来源于链霉菌（Streptomyces alboniger）。它是一种小分子，模拟氨酰-tRNA的3′末端，通过直接与原核细胞和真核细胞中的核糖体延伸机制相互作用，发挥强效的通用翻译抑制剂作用。该分子由一个腺苷样核苷通过其核糖3′位点与一个酪氨酸样氨基酸部分共价连接而成，形成带电tRNA 3′-CCA末端的结构类似物。其中，tRNA与氨基酸之间的天然酯键被不可水解的酰胺键取代，从而抵抗肽酰-tRNA的水解，这正是其链终止活性的基础。嘌呤霉素与氨酰-tRNA竞争进入核糖体A位点，将其氨基对准肽酰转移酶中心，并从P位点肽酰-tRNA接受正在生长的多肽，形成肽酰-嘌呤霉素缀合物；所得产物缺乏tRNA部分，无法稳定地锚定在核糖体上，导致截短的肽酰-嘌呤霉素从P位点解离，蛋白质合成过早终止，而核糖体则保持完整的70S（或80S）单体，可以作为一个整体从mRNA上脱落，而不是像正常终止时那样解离成亚基。这种机制使嘌呤霉素成为一种延伸阶段抑制剂，它不需要特定的起始环境，因此可以掺入任何正在翻译的核糖体上的新生肽链中，并产生一群在其C端共价连接该抗生素的嘌呤霉素化新生肽链。分子生物学广泛利用这一特性，通过SUnSET和核糖体谱分析等方法标记和定量新生蛋白质合成。嘌呤霉素的核糖体催化掺入遵循与两个tRNA之间肽基转移相同的化学原理，其有效性源于细菌和真核生物中肽基转移酶中心和A位点的保守结构，这使得即使核糖体蛋白组成存在差异，也能实现广谱抑制。该抗生素通过占据A位点并将正在延伸的肽链从其tRNA载体上移除，阻断了肽链的进一步延伸循环，导致后续的EF-Tu/eEF1A依赖性氨酰tRNA递送无效，整体翻译水平迅速下降，细胞经历蛋白质稳态应激，激活整合应激反应、未折叠蛋白反应，并在高浓度或长时间暴露的情况下激活细胞凋亡和坏死途径。嘌呤霉素也可用作哺乳动物细胞培养中的强效筛选试剂，其中细菌嘌呤霉素N-乙酰转移酶（pac）基因的共表达通过酶促乙酰化嘌呤霉素上的氨基赋予细胞抗性，从而阻止其参与肽酰转移，并使转染细胞在持续的抗生素压力下存活。 |
| 参考文献 |
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