Puromycin Antibody (Mouse mAb) [M15P20]
目录号: F4408
抗体应用：
反应性：
使用信息
| 稀释比例 |
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| 抗体应用 |
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| WB, IP, IHC, IF |
| 反应性 |
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| Human |
| 抗体类型 |
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| Mouse Monoclonal Antibody |
| 储存液配方 |
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| PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3 |
| 储存条件(自收到货起) |
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| -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years |
生物描述
| 特异性 |
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| Puromycin Antibody (Mouse mAb) [M15P20] 可检测经 Puromycin 实验处理后掺入新生多肽链中的 Puromycin。 |
| 克隆号 |
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| M15P20 |
| 背景 |
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| 嘌呤霉素是一种由白链霉菌（Streptomyces alboniger）产生的氨基核苷类抗生素，其结构模拟了氨酰化酪氨酰-tRNA的3'端，由一个修饰的腺苷碱基与一个类似酪氨酸的氨基酸部分共价连接而成；它与真正的氨酰-tRNA的关键结构区别在于连接氨基酸和核苷的键，嘌呤霉素中是稳定的肽键，而带电tRNA中则是不稳定的酯键。在翻译延伸过程中，嘌呤霉素取代进入核糖体的氨酰-tRNA进入核糖体A位点，其游离氨基在核糖体肽基转移酶中心的催化作用下，接受来自P位点肽酰-tRNA的新生多肽链，这与真正的氨酰-tRNA在正常肽键形成过程中的作用完全相同。由于连接新生肽链和嘌呤霉素的肽键无法被后续到达的氨酰tRNA切割，因此这种掺入事件是不可逆的：肽链无法进一步延伸，核糖体解离，释放出截短的新生肽链，该肽链的C端共价连接着嘌呤霉素，形成肽基-嘌呤霉素加合物。这种机制是一种竞争性的、浓度依赖性的过程。高浓度的嘌呤霉素会在整个延伸过程中与氨酰tRNA广泛竞争A位点，导致广泛的肽链过早终止和蛋白质合成的普遍抑制；而低浓度的嘌呤霉素与标准的延伸循环竞争效率低下，反而倾向于优先在翻译暂停点（例如终止密码子）附近发生反应，从而实现对近全长或全长蛋白质的选择性标记，而不是无差别地截短。过早终止过程中产生的肽基-嘌呤霉素加合物被识别为异常翻译产物，并以剂量和时间依赖的方式通过蛋白酶体快速清除。在低嘌呤霉素浓度下，这些过早终止的多肽进入蛋白酶体降解途径，增加了细胞表面肽-MHC I类复合物的回收率，从而将嘌呤霉素诱导的翻译脱落产物与抗原呈递途径直接联系起来；然而，在持续较高浓度的嘌呤霉素暴露下，随着多聚泛素化蛋白的积累，MHC I类分子的表面输出受到抑制，表明处理这些加合物的蛋白水解和转运机制已达到饱和。 |
| 参考文献 |
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