Ras (G12D Mutant) Antibody [C11A12]

目录号: F6955

抗体应用：反应性：Human, Mouse

规格	价格	库存
20uL	790	现货
50uL	1240	现货
100uL	1990	现货
100uL*2	3790	现货
400-668-6834 info@selleck.cn

使用信息

稀释比例
WB1:500-1:3000 IHC1:25-1:100

抗体应用
WB, IHC

反应性
Human, Mouse

抗体类型
Rabbit Monoclonal Antibody

储存液配方
PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

储存条件(自收到货起)
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

预测分子量实际分子量
21 kDa 22 kDa
^*为什么预测分子量和实际分子量会有不同？以下原因可能会导致蛋白分子量与预测不同：翻译后修饰（磷酸化/糖基化）；剪接变体和异构体；相对电荷；多聚体。

Datasheet & SDS

生物描述

特异性
Ras (G12D Mutant) Antibody [C11A12] 可检测内源性 Ras (G12D Mutant) 总蛋白水平。

克隆号
C11A12

别名
GTPase Kras, K-Ras 2, Ki-Ras, c-K-ras, c-Ki-ras, KRAS, KRAS2, RASK2

背景
Ras G12D 是小 GTP 酶 K-Ras 的一种致癌突变体，K-Ras 是 RAS 家族的成员，该家族是一类鸟嘌呤核苷酸结合开关，调控受体酪氨酸激酶和其他上游信号下游的促有丝分裂和存活信号通路。该突变将 G 结构域 P 环第 12 位的甘氨酸替换为天冬氨酸，该位点紧邻核苷酸和催化机制，并改变了局部侧链堆积、氢键和静电环境，导致催化位点构象发生变化，在 GTP 酶激活蛋白存在的情况下，无法有效水解 GTP。突变蛋白保留了典型的RAS折叠结构，包含一个结合GTP或GDP的G结构域以及一个介导效应物识别的柔性开关I区和开关II区。然而，G12D突变增加了活性状态构象的占据率，并破坏了过渡态稳定所需的关键接触，从而稳定了GTP结合的信号传导活性形式，并降低了对GAP催化失活的响应。激活的G12D突变体通过RAS结合域与Raf激酶结合，启动Raf-MEK-ERK级联反应，驱动增殖和存活的转录程序；同时，它通过直接相互作用与PI3K偶联，支持促进细胞生长和存活的PI3K-AKT轴。响应RAS G12D的其他效应通路包括Ral鸟嘌呤核苷酸交换因子和其他下游节点，这些通路提供多个相互增强的平行输出，以维持增殖和抗凋亡状态。 K-Ras G12D复合物的结构分析表明，12位天冬氨酸侧链在GTP的γ-磷酸基团和GAP的精氨酸指附近引入了空间位阻和静电冲突，这解释了其催化几何构型受损的原因。尽管如此，该蛋白仍保持了对GTP和GDP的高亲和力，导致其难以循环回到GDP结合的非活性状态，并积累在能够结合效应分子的激活状态。这种突变信号传导行为维持了MAPK和PI3K通路的慢性激活，从而增加了细胞周期启动、对凋亡信号的抵抗力以及分化模式的改变，并使KRAS G12D成为RAS通路调控上皮稳态的组织中肿瘤发生的主要驱动因素。致癌 K-Ras G12D 的内源性表达通过 Raf-MEK-ERK 和 PI3K-AKT 级联的联合输入刺激上皮细胞增殖并扩增祖细胞区室，而无需额外的上游受体过度激活，这一特性使突变体与依赖于严格调控的生长因子信号的野生型 RAS 区分开来。

背景

Ras G12D 是小 GTP 酶 K-Ras 的一种致癌突变体，K-Ras 是 RAS 家族的成员，该家族是一类鸟嘌呤核苷酸结合开关，调控受体酪氨酸激酶和其他上游信号下游的促有丝分裂和存活信号通路。该突变将 G 结构域 P 环第 12 位的甘氨酸替换为天冬氨酸，该位点紧邻核苷酸和催化机制，并改变了局部侧链堆积、氢键和静电环境，导致催化位点构象发生变化，在 GTP 酶激活蛋白存在的情况下，无法有效水解 GTP。突变蛋白保留了典型的RAS折叠结构，包含一个结合GTP或GDP的G结构域以及一个介导效应物识别的柔性开关I区和开关II区。然而，G12D突变增加了活性状态构象的占据率，并破坏了过渡态稳定所需的关键接触，从而稳定了GTP结合的信号传导活性形式，并降低了对GAP催化失活的响应。激活的G12D突变体通过RAS结合域与Raf激酶结合，启动Raf-MEK-ERK级联反应，驱动增殖和存活的转录程序；同时，它通过直接相互作用与PI3K偶联，支持促进细胞生长和存活的PI3K-AKT轴。响应RAS G12D的其他效应通路包括Ral鸟嘌呤核苷酸交换因子和其他下游节点，这些通路提供多个相互增强的平行输出，以维持增殖和抗凋亡状态。 K-Ras G12D复合物的结构分析表明，12位天冬氨酸侧链在GTP的γ-磷酸基团和GAP的精氨酸指附近引入了空间位阻和静电冲突，这解释了其催化几何构型受损的原因。尽管如此，该蛋白仍保持了对GTP和GDP的高亲和力，导致其难以循环回到GDP结合的非活性状态，并积累在能够结合效应分子的激活状态。这种突变信号传导行为维持了MAPK和PI3K通路的慢性激活，从而增加了细胞周期启动、对凋亡信号的抵抗力以及分化模式的改变，并使KRAS G12D成为RAS通路调控上皮稳态的组织中肿瘤发生的主要驱动因素。致癌 K-Ras G12D 的内源性表达通过 Raf-MEK-ERK 和 PI3K-AKT 级联的联合输入刺激上皮细胞增殖并扩增祖细胞区室，而无需额外的上游受体过度激活，这一特性使突变体与依赖于严格调控的生长因子信号的野生型 RAS 区分开来。

参考文献
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26902995/ https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28740607/

PVDF膜孔径规格选择参照表

Protein Size (kDa)	PVDF Transfer Membrane Pore Size (μm)
< 10	0.22
10-20	0.22
20-30	0.45
30-45	0.45
45-70	0.45
80-100	0.45
100-140	0.45
> 140	0.45

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* 必填项

Protein Size (kDa)	Separating Gel Percentage
4-40	20%
12-45	15%
10-70	12.5%
15-100	10%
25-100	8%
60-210	5%