Strep-tag II Antibody [C20H20]
目录号: F3174
抗体应用：
反应性：
-
Lane 1: 293T, Lane 2: 293T (GNA13(human)-EGFP-StrepII transfected)
使用信息
| 稀释比例 |
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| 抗体应用 |
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| WB, IP, IHC, IF, FCM, ChIP |
| 反应性 |
|---|
| All |
| 抗体类型 |
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| Rabbit Monoclonal Antibody |
| 储存液配方 |
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| PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3 |
| 储存条件(自收到货起) |
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| -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years |
生物描述
| 特异性 |
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| Strep-tag II Antibody [C20H20] 可检测外源性 Strep-tag II 总水平。 |
| 克隆号 |
|---|
| C20H20 |
| 背景 |
|---|
| Strep-tag II 是一种短的合成肽亲和标签，源自链霉亲和素配体的核心结合表位，可与重组蛋白融合，从而在接近生理条件下与工程化的链霉亲和素衍生物实现高度特异性、可逆的相互作用，用于纯化、固定和检测。该标签由一段八至九个氨基酸的序列（WSHPQFEK 或其密切相关的变体）组成，该序列位于蛋白质的 N 端或 C 端。这种线性肽提供了一个明确的结合界面，能够以微摩尔级的亲和力嵌入 Strep-Tactin 或优化的链霉亲和素突变体的生物素结合口袋中，其亲和力比相同肽与野生型链霉亲和素的相互作用高约两个数量级。与 Strep-Tactin 的相互作用具有高度选择性，且很大程度上独立于融合蛋白的结构，这使得 Strep-tag II 融合蛋白能够通过将样品通过偶联 Strep-Tactin 的琼脂糖或 Sepharose 基质，从复杂的裂解液中捕获；Strep 标签蛋白特异性结合，而大多数宿主蛋白则流过或被生理缓冲液短暂洗涤去除。洗脱采用竞争性方法，使用脱硫生物素或生物素，无需强 pH 值或变性剂即可将标签从 Strep-Tactin 结合口袋中置换出来，从而保持天然构象、酶活性、不稳定的辅因子和多蛋白复合物的完整性，并使洗脱液能够直接用于功能和结构研究。这种温和的一步富集方法可获得高纯度的目标蛋白，并且对于敏感靶标或金属酶靶标，其性能通常优于固定化金属亲和层析。例如，在氢化酶前体和碱性螺旋-环-螺旋-拉链结构域的纯化中，Strep-tag II 纯化方法能够提供活性蛋白和完整的复合物，适用于下游结合实验和结构分析。该标签的应用范围不仅限于批量纯化：将 Strep-tag II 盒引入内源位点或添加到天然复合物的亚基中，可以温和地从酵母或哺乳动物细胞中分离大型多蛋白组装体和功能复合物；此外，相同的标签-配体对还可用于在生物传感、酶工程和单分子实验中定向固定在固相载体上。 |
| 参考文献 |
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