Polycystin 1/PC1 Antibody [B20F13]
目录号: F2579
抗体应用：
反应性：
-
Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded human liver tissue with F2579 at 1:200 dilution.
使用信息
| 稀释比例 |
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| 抗体应用 |
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| IHC |
| 反应性 |
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| Human |
| 抗体类型 |
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| Mouse Monoclonal Antibody |
| 储存液配方 |
|---|
| PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3 |
| 储存条件(自收到货起) |
|---|
| -20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years |
| 阳性对照 | Normal Human Bone Marrow; Human Normal Liver; Normal human kidney tissue |
|---|---|
| 阴性对照 |
实验方法
| IHC |
|---|
实验步骤：
脱蜡/补液
1. 脱蜡/水合切片：
2. 将切片在二甲苯中孵育 3 次，每次 5 分钟。
3. 将切片在 100% 乙醇中孵育两次，每次 10 分钟。
4. 将切片在 95% 乙醇洗涤液中孵育两次，每次 10 分钟。
5. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
6.抗原修复：对于柠檬酸盐：将载玻片浸入 1X 柠檬酸盐暴露溶液中，在微波炉中加热，直至开始沸腾； 在亚沸温度 (95°-98°C) 下继续煮 10 分钟。 在工作台上冷却玻片 30 分钟。
染色
1. 用 dH2O 清洗切片 3 次，每次 5 分钟。
2. 将切片在 3% 过氧化氢中孵育 10 分钟。
3. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
4. 在洗涤缓冲液中洗涤切片 5 分钟。
5. 用 100–400 µl 封闭液在室温下封闭每个切片 1 小时。
6. 除去封闭液，并向每个切片中添加 100–400 µl 一抗稀释液。 4°C 孵育过夜。
7. 去除抗体溶液，用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
8. 用 1-3 滴所需的 HRPA 覆盖切片。 在加湿室中室温孵育 30 分钟。
9. 用洗涤缓冲液洗涤切片 3 次，每次 5 分钟。
10. 使用前将 DAB 显色剂浓缩液加入 DAB 稀释液中并充分混合。
11. 在每个切片上涂抹 100–400 µl DAB 并密切监测。 1-10 分钟通常可提供可接受的染色强度。
12. 将载玻片浸入 dH2O 中。
13. 如果需要，用苏木精复染切片。
14. 用 dH2O 清洗切片两次，每次 5 分钟。
15. 切片脱水：95%乙醇孵育切片两次，每次 10 秒； 在 100% 乙醇中重复，孵育切片两次，每次 10 秒； 在二甲苯中重复，孵育切片两次，每次 10 秒。
16. 用盖玻片和封固剂封固切片。
|
生物描述
| 特异性 |
|---|
| Polycystin 1/PC1 Antibody [B20F13] 可检测内源性 Polycystin 1/PC1 总蛋白水平。 |
| 蛋白定位 |
|---|
| 细胞膜，细胞突起，纤毛，内质网，高尔基体，内膜系统，细胞外环境 |
| Uniprot ID |
|---|
| P98161 |
| 克隆号 |
|---|
| B20F13 |
| 别名 |
|---|
| Polycystin‑1; PC1; Autosomal dominant polycystic kidney disease 1 protein; PKD1 |
| 背景 |
|---|
| 由PKD1基因编码的多囊蛋白1 (PC1) 是一种大型跨膜蛋白，在肾小管、肝脏和胰腺的上皮细胞中作为机械敏感受体发挥作用，调节细胞-基质黏附、管腔结构和机械转导。其延伸的胞外结构域整合了多种结构基序，这些基序能够与细胞表面的机械应变和配体依赖性信号相互作用，并通过细胞膜与多囊蛋白2 (PC2) 偶联，形成钙离子通透性通道复合物。该复合物定位于纤毛和顶端膜，并将管腔内的流动和剪切应力转化为梯度变化的细胞内钙信号。这些依赖于PC1-PC2的钙离子流与钙调磷酸酶、mTORC1、ERK和JAK-STAT通路相互作用，从而调节细胞增殖、分化、液体分泌和细胞骨架重塑。同时，PC1还参与Wnt-平面细胞极性和整合素相关信号通路，协调肾小管上皮细胞的纺锤体平面取向、顶底极化和细胞外基质组织。在常染色体显性多囊肾病中，种系或体细胞PKD1失活突变会损害PC1-PC2复合物的形成、转运或通道门控，导致钙依赖性生长抑制信号的持续抑制以及mTORC1和增殖激酶级联的异常激活，进而驱动上皮增生和细胞分裂方向异常。这种改变的信号环境促进了肾小管逐渐扩张、液体分泌错位和基质重塑，导致肾脏和肝脏囊肿扩张，类似的 PC2 病变产生类似的表型，表明两种多囊蛋白在维持肾小管完整性方面具有重要的相互依赖性，因此 PC1 依赖性信号最终在囊性上皮中失调。 |
| 参考文献 |
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