DBeQ

For research use only. Not for use in humans.

目录号:S7199 别名: JRF 12

DBeQ Chemical Structure

CAS No. 177355-84-9

DBeQ (JRF 12)是一种选择性的,有效的,可逆的,ATP竞争性的p97抑制剂,IC50为1.5 μM。

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产品安全说明书

p97抑制剂选择性比较

生物活性

产品描述 DBeQ (JRF 12)是一种选择性的,有效的,可逆的,ATP竞争性的p97抑制剂,IC50为1.5 μM。
特性 DBeQ快速有效地诱导caspase激活和细胞死亡。
靶点
p97 [1]
1.5 μM
体外研究

DBeQ作用于HeLa细胞,抑制UbG76V-GFP, ODD-Luc和Luc-ODC 降解,IC50分别为2.6 μM, 56 μM 和45 μM。DBeQ作用于N-ethylmaleimide-敏感因子(NSF)和26S蛋白酶,效果至少低50倍。DBeQ与ATP竞争性抑制P97,Ki为3.2 μM,说明DBeQ结合到D2域的活性位点。DBeQ (10 μM) 作用于HEK293细胞,有效抑制TCRα-GFP降解。DBeQ作用于HEK293细胞,3小时内诱导CHOP,但不增加p21水平,这种作用存在浓度依赖性。DBeQ (15 μM) 作用于Hela细胞,诱导LC3-II 在在细胞核及浓缩膜和胞质级组分中大量积累。DBeQ作用于HeLa细胞,通过抑制LC3-II自噬降解,而不是诱导自噬,而发挥作用。DBeQ (10 μM) 作用于HeLa细胞,快速促进caspases-3和-7激活。比激活外在caspase-8通路,DBeQ更有效激活内在caspase-9凋亡途径,而STS激活两种途径程度相似。DBeQ作用于 多发性骨髓瘤细胞(RPMI8226)比作用于正常人胚肺成纤维细胞(MRC5)效果强5倍,HeLa细胞和Hek293细胞具有中等的敏感性。[1] 在ERAD和自噬途径内,DBeQ干扰底物降解。[2]DBeQ (12 μM) 作用于HeLa细胞中。抑制细胞中和,这种作用存在剂量依赖性。DBeQ(10 μM)完全抑制病毒和抗体的降解,但不抑制IgG Fc的降解。[3]DBeQ作用于U20S细胞,降低基本的和营养刺激的MTOR靶点磷酸化,与Rapamycin 效果类似。[4]

推荐的实验操作(此推荐来自于公开的文献所以Selleck并不保证其有效性)

激酶实验:[1]
- 合并

手动ATP酶实验:

实验 Buffer [20 μL 2.5×浓度, 1×= 50 mM Tris (pH 7.4), 20 mM MgCl2, 1 mM EDTA, 和 0.5 mM tris(2-carboxyethyl)phosphine (TCEP)] 加到96孔板中。纯化的p97(25 μL 50 μM) 975 μL 1× 实验 Buffer中稀释,然后每孔中加入10 μL。每孔加入DBeQ (10 μL) 或 5% DMSO (10 μL) ,实验板在室温下温育10分钟。按如下进行ATP酶实验:每孔加入10 μL 500 μM ATP (pH 7.5), 在室温下温育60分钟, 然后加入50 μL Kinase Glo Plus 试剂,随后在室温下黑暗环境中温育10分钟。使用 Analyst AD读取发光值。在一个浓度范围(0, 0.048, 0.24, 1.2, 6, 和30 μM)按一式三份测定DBeQ。
细胞实验:[1]
- 合并
  • Cell lines: MRC-5, Hek293, HeLa 和 RPMI8226 细胞
  • Concentrations: 33 μM
  • Incubation Time: 48 小时
  • Method: 细胞按每孔5,000个接种于384孔白色固体板中。使用荧光素酶siRNA或p97siRNA(10 nM)进行细胞转染48小时,或在指定时间使用DBeQ处理。每孔加入Caspase-3/7 Glo, caspase-6 Glo, caspase-8 Glo, 或 caspase-9 ,按500rpm震荡混合 1分钟。在室温下温育1小时后,测定发光信号。使用CellTiter-Glo试剂测定细胞存活力。为了测定细胞活力的IC50,使用七种浓度的MG132或DBeQ(开始于μM的三倍连续稀释液)处理细胞48小时。拟合发光信号归一化DMSO处理细胞的百分比,计算IC50值。
    (Only for Reference)

溶解度 (25°C)

体外 DMSO 68 mg/mL (199.75 mM)
Ethanol 5 mg/mL (14.68 mM)
Water Insoluble

* 溶解度检测是由Selleck技术部门检测的,可能会和文献中提供的溶解度有所差异,这是由于生产工艺和批次不同产生的正常现象。请按照顺序依次加入各个纯溶剂。

化学数据

分子量 340.42
化学式

C22H20N4

CAS号 177355-84-9
储存条件 粉状
溶于溶剂
别名 JRF 12

动物体内配方计算器 (澄清溶液)

第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
给药剂量 mg/kg 动物平均体重 g 每只动物给药体积 ul 动物数量
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系Selleck为您提供正确的澄清溶液配方)
% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
计算重置

计算器

摩尔浓度计算器

摩尔浓度计算器

本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:

质量 (mg) = 浓度 (mM) x 体积 (mL) x 分子量 (g/mol)

摩尔浓度计算公式

  • 质量
    浓度
    体积
    分子量

*在配置溶液时,请务必参考Selleck产品标签上、SDS / COA(可在Selleck的产品页面获得)批次特异的分子量使用本工具。

稀释计算器

稀释计算器

用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:

开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积

稀释公式

稀释公式一般简略地表示为: C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )

  • C1
    V1
    C2
    V2

在配置溶液时,请务必参考Selleck产品标签上、SDS / COA(可在Selleck的产品页面获得)批次特异的分子量使用本工具。.

连续稀释计算器方程

  • 连续稀释

  • 计算结果

  • C1=C0/X C1: LOG(C1):
    C2=C1/X C2: LOG(C2):
    C3=C2/X C3: LOG(C3):
    C4=C3/X C4: LOG(C4):
    C5=C4/X C5: LOG(C5):
    C6=C5/X C6: LOG(C6):
    C7=C6/X C7: LOG(C7):
    C8=C7/X C8: LOG(C8):
分子量计算器

分子量计算器

通过输入化合物的化学式来计算其分子量:

总分子量:g/mol

注:化学分子式大小写敏感。C10H16N2O2 c10h16n2o2

摩尔浓度计算器

质量 浓度 体积 分子量
计算

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操作手册

如果有其他问题,请给我们留言。

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