Bafilomycin A1(Baf-A1)

目录号:S1413

Bafilomycin A1(Baf-A1) Chemical Structure

Molecular Weight(MW): 622.83

Bafilomycin A1(Baf-A1)是一种液泡H+-ATPase抑制剂,IC50为0.44 nM。

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Proton Pump抑制剂选择性比较

生物活性

产品描述 Bafilomycin A1(Baf-A1)是一种液泡H+-ATPase抑制剂,IC50为0.44 nM。
靶点
H+-ATPase [1]
(Cell-free assay)
0.44 nM
体外研究

Bafilomycin A1是一种衍生自灰色链霉菌的有毒的大环内酯类抗生素。Bafilomycin A1抑制外套膜上皮细胞(OME)诱导的短路电流。Bafilomycin A1的IC50和最大抑制剂量分别为0.17 μM和0.5 μM。[2]此外,Bilomycin A1抑制酸内流,IC50 值为0.4 nM。Bafilomycin A1剂量依赖性抑制酸化,导致较低的淬灭,从而具有更高的荧光性。[3] Bafilomycin A1防止H. pylori细胞诱导的Hela细胞空泡化,50%最大抑制浓度(ID50)为4 nM。Bafilomycin A1能够有效使空泡细胞恢复到正常形态。[4] Bafilomycin A1也会影响內吞物质从早期到晚期內吞区的的转运。在HeLa 细胞中,Bafilomycin不仅消耗较低的内体PH,也会阻断从早期到晚期内体的转运。[5] BNL CL.2 和 A431细胞中,通过与吖啶橙的培养表明,Bafilomycin A1在0.1-1 μM剂量下完全抑制溶酶体酸化。 [6]将Bafilomycin A1加入Hanks平衡盐溶液时,内源性蛋白质降解被强烈抑制,并且众多自噬体聚集在H-4-II-E细胞中。Bafilomycin A1也会防止自噬泡中內吞HRP的出现。[7]

Cell Data
Cell Lines Assay Type Concentration Incubation Time Formulation Activity Description PMID
human MCF7 cells NEOw[lhHfW6ldHnvckBie3OjeR?= NXfvXIZZPCCq NXrLd5lRUW6qaXLpeIlwdiCxZjDyZZBidXmlaX6tbY5lfWOnZDDheZRweGijZ4mgbY4hcHWvYX6gUWNHPyClZXzsd{BmgHC{ZYPzbY5oKEWJRmCtUGM{KGG|c3Xzd4VlKGG|IHTlZ5Jm[XOnIHnuJGVITlBibHX2[Yx{KGG2IEGwNEBvVSCjZoTldkA1KGi{czDifUBY\XO2ZYLuJIJtd3S2aX7nJJJmdGG2aY\lJJRwKGOxboTyc4w> M{LnSVIxODJ6MUO0
human HeLa cells MljZSpVv[3Srb36gZZN{[Xl? M37SV|QxOCCwTR?= M1LUSGlv\HWldHnvckBw\iCjdYTvdIhi\3liaX6gbJVu[W5iSHXMZUBk\WyuczDlfJBz\XO|aX7nJGVITlBvTFOzJIF{e2W|c3XkJIF{KGmwY4LlZZNmKGmwIFzDN{0zKGyndnXsJIF1KDRyMDDuUS=> NFvwe4MyQDN7MUm0PS=>
mouse RAW264.7 cells MX3BdI9xfG:|aYOgZZN{[Xl? M{fYWVExOCCwTR?= MXuxOkBp NXHYNnFXUW6mdXP0bY9vKG:oIHHwc5B1d3OrczDpckBud3W|ZTDSRXczPjRwNzDj[YxteyCjc4Pld5Nm\CCjczDsZZRmKGGyb4D0c5Rq[yClZXzsd{BifCBzMECgcm0h[W[2ZYKgNVYhcHK|IIXzbY5oKGGwbnX4bY4hXi2ycn;wbYRqfW1iaX;kbYRmKHO2YXnubY5oKGK7IH\sc5ch[3m2b33leJJ6 NXLVdXpFOTl|MEezOVk>
RAW 264.7 cells M4m0b2Z2dmO2aX;uJIF{e2G7 M2T5XVExOCCwTR?= MX7BcpRqdWmlcn;ibYFtKGGldHn2bZR6KGGpYXnud5QhW2GubX;u[Yxt[SCnboTldolk[SCWeYDobY12emm3bTCxOFAzQCCrbn\lZ5Rm\CCrbjDSRXchOjZ2LkegZ4VtdHNiYYPz[ZN{\WRiYYOgbY5kemWjc3XkJI5qfHKrYzDvfIll\SCycn;keYN1cW:wIHnuJIlv\mWldHXkJINmdGy|IHH0JFExOCCwTR?= MWCxPVMxPzN3OR?=
human H4 cells MXHGeY5kfGmxbjDhd5NigQ>? NFLaVlIxNjRizszN M3PZUFI1KGh? M4jvOWlv\HWldHnvckBw\iCuaXfoeEBkcGGrbjCzMWdHWCCuZY\lcEBqdiCqdX3hckBJPCClZXzsd{BifCByLkSgeW0h[W[2ZYKgNlQhcHK|IHL5JIhq\2hidHjyc5VocHC3dDDmcJVwemW|Y3XuZ4UhdWmlcn;zZ49xgSC{ZXzheIl3\SC2bzDjc451em:u NHixVlgyQDB{NEW4OC=>

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Assay
Methods Test Index PMID
Western blot
Ret / EGFR / p75 NGFR; 

PubMed: 21559479     


PC12 cells were treated with various concentrations of bafilomycin A1 for 24 h. Whole cell lysates (40 µg protein) were subjected to SDS–PAGE and immunoblotted with anti-Ret, anti-p75 NGFR, anti-EGFR, and anti-α-tubulin antibodies.

21559479
Growth inhibition assay
Cell viability; 

PubMed: 20534000     


48 h treatment with bafilomycin A1 (BafA1) decreases cell viability at concentrations ≥ 6 nM . *p<0.05 vs. 0 μM vehicle CTL; #p<0.05 vs. 0-3 nM Baf A1.

20534000
Immunofluorescence
AIF; 

PubMed: 25512644     


Confocal microscopic observation of bafilomycin A1-induced AIF subcellular localization. The nucleus was stained with Hoechst 33258 (blue) and AIF by antibody (red). AIF was observed to relocate from cytoplasmic compartments to the nucleus upon bafilomycin A1 treatment. 

LC3; 

PubMed: 24532803     


PANC1 VC and PANC1 N1 cells were preincubated with control medium or this medium containing the late stage autophagy inhibitor bafilomycin A1 (100 nM) for 30 min at 37℃ followed by a 24-h, 37℃Cincubation with either control medium or this medium containing Dp44mT (5 μM) alone, bafilomycin A1 (100 nM) alone, or the combination of Dp44mT (5 μM) and bafilomycin A1 (100 nM).  Immunofluorescence studies with anti-LC3 antibody. Scale, 20 μm.

25512644 24532803
ELISA
TNF-alpha; 

PubMed: 26240140     


BMDMs were incubated with P. falciparumIRBCs in the presence of bafilomycin A1. TNF-α released into culture medium was analyzed by ELISA.

26240140
体内研究 Bafilomycin A1 (1 μM 和 0.1 μM)完全抑制培养的破骨细胞的再摄取活性。[8] Bafilomycin A1剂量依赖性抑制年轻罗非鱼体内Na+的摄取,Ki 为0.16 μM。[9]

推荐的实验操作(此推荐来自于公开的文献所以Selleck并不保证其有效性)

激酶实验:

[2]

+ 展开

ATPase 酶活性试验:

ATPase酶测定培养基包含6 mM MgSO4,50 mM HEPES (pH 7.4),200 mM Na2SO3 (V-ATPase 活化剂),0.5 mM 原钒酸钠(P-ATPase抑制剂),0.5 mM 叠氮化钠(F-ATPase抑制剂)和3 mM Na2ATP。该培养基(1.0 mL)加入或不加入V型ATPase抑制剂bafilomycin A1,与过滤的匀浆(0.1 mL)在23–25 °C下培养60分钟。通过加入1 mL 3%TCA停止反应。广谱测定的空白对照根据酶测定制备,除了组织样本是在酸之后加入。磷酸盐的分析通过加入2 mL正丁醇和0.2 mL 钼酸盐溶液(5 g 钼酸铵,22 mL H2SO4到100 mL)完成。涡旋15秒后,溶液用0.5 mL柠檬酸盐溶液(100 g/500 mL,pH 7.0)中和,再涡旋15秒。然后将溶液离心(2000×g;3分钟)以分离出丁醇相,其吸光度在400 nm下读出。制备标准正磷酸盐(0.1 μM–2.0 μM),并以酶活性检测相同的方式处理。酶活性表示为每小时和每毫克蛋白质释放的正磷酸盐的微摩尔量。V-ATPase活性被认为是Na2SO3,原钒酸钠和叠氮化钠存在下测得的V-ATPase活性,与这些试剂和特定V-ATPases抑制剂Bafilomycin A1存在下测得的ATPase活性之间的差异。
细胞实验:

[4]

+ 展开
  • Cell lines: HeLa细胞
  • Concentrations: ~20 nM
  • Incubation Time: 20小时
  • Method:

    幽门螺旋杆菌加入HeLa细胞之前,用抑制剂处理,如下:10 mM DCCD在30℃下处理1小时;100 μM NBD-CI在30℃下处理1小时,反应用10 mM终浓度的甘氨酸阻断;275 μM NEM在30℃下处理1小时,通过加入275 mM β-巯基乙醇阻断反应;14 μM Mg-ATP在0℃下处理1小时;100 μM KNO3和14 μM Mg-ATP在30℃下处理1小时;100 μM NaCO3,pH 11在0℃下处理1小时。然后将细菌提取物加入细胞,稀释40倍,终浓度为0.65 mg/mL。对照组为HeLa细胞和未处理的细菌提取物,以及细菌提取物处理时相同环境下抑制剂Bafilomycin A1处理的细胞,稀释40倍后在相同的浓度下进行培养。分析细菌提取物的空泡活性。


    (Only for Reference)
动物实验:

[9]

+ 展开
  • Animal Models: 年幼的(大约9天大)莫三鼻口孵鱼,莫桑比克罗非鱼
  • Formulation: 包含0.05 % 二甲基亚砜(DMSO)的鱼缸水
  • Dosages: 10 μM
  • Administration: --
    (Only for Reference)

溶解度 (25°C)

体外 DMSO 6 mg/mL (9.63 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble

* 溶解度检测是由Selleck技术部门检测的,可能会和文献中提供的溶解度有所差异,这是由于生产工艺和批次不同产生的正常现象。请按照顺序依次加入各个纯溶剂。

化学数据

分子量 622.83
化学式

C35H58O9

CAS号 88899-55-2
储存条件 粉状
溶于溶剂
别名 N/A

计算器

摩尔浓度计算器

摩尔浓度计算器

本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:

质量 (mg) = 浓度 (mM) x 体积 (mL) x 分子量 (g/mol)

摩尔浓度计算公式

  • 质量
    浓度
    体积
    分子量

*在配置溶液时,请务必参考Selleck产品标签上、MSDS / COA(可在Selleck的产品页面获得)批次特异的分子量使用本工具。

稀释计算器

稀释计算器

用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:

开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积

稀释公式

稀释公式一般简略地表示为: C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )

  • C1
    V1
    C2
    V2

在配置溶液时,请务必参考Selleck产品标签上、MSDS / COA(可在Selleck的产品页面获得)批次特异的分子量使用本工具。.

连续稀释计算器方程

  • 连续稀释

  • 计算结果

  • C1=C0/X C1: LOG(C1):
    C2=C1/X C2: LOG(C2):
    C3=C2/X C3: LOG(C3):
    C4=C3/X C4: LOG(C4):
    C5=C4/X C5: LOG(C5):
    C6=C5/X C6: LOG(C6):
    C7=C6/X C7: LOG(C7):
    C8=C7/X C8: LOG(C8):
分子量计算器

分子量计算器

通过输入化合物的化学式来计算其分子量:

总分子量:g/mol

注:化学分子式大小写敏感。C10H16N2O2 c10h16n2o2

摩尔浓度计算器

质量 浓度 体积 分子量
计算

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常见问题及建议解决方法

  • 问题 1:

    How to dissolve it?

  • 回答:

    S1413 Bafilomycin A1(Baf-A1) is soluble in DMSO at 0.1 mg/ml. Please do not use alcohols as solvent, because this compound will degrade in alcohols.

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