Vadimezan (ASA404)

For research use only. Not for use in humans.

目录号：S1537 别名： NSC 640488, DMXAA 中文名称：2,5-己酮可可碱

CAS No. 117570-53-3

Vadimezan (ASA404, NSC 640488, DMXAA)是一种vascular disrupting agents (VDA)，也是一种DT-diaphorase的竞争性抑制剂，无细胞试验中Ki为20 μM ，IC50为62.5 μM。DMXAA (Vadimezan) 也是一种STING 激动剂，具有潜在的抗肿瘤活性。DMXAA (Vadimezan) 在体外可有效诱导 IFN-β 和 TNF-α 的表达，但对 TNF-α 影响相对较低。DMXAA (Vadimezan)具有抗病毒活性。Phase 3。

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产品安全说明书

VDA抑制剂选择性比较

生物活性

产品描述

特性

DMXAA（ASA404)是DT-心肌黄酶竞争性抑制剂。

靶点

DT-diaphorase ^[1] (Cell-free assay)	DT-diaphorase ^[1] (Cell-free assay)
20 μM(Ki)	20 μM(Ki)

体外研究

在体外, DMXAA（ASA404)抑制纯化的DT-心肌黄酶，IC50为62.5 μM，K_i为20 μM。DMXAA（ASA404)作用于DLD-1人结肠癌细胞, 抑制DT-心肌黄酶活性，IC50为 49.6 μM，而对细胞色素 b5 还原酶和细胞色素P450还原酶没有显著作用效果。^[1] DMXAA（ASA404)为抗病毒药物，作用于RAW 264.7巨噬细胞，抑制VSV-诱导的细胞毒性，也抑制流感病毒复制。^[2] 最新研究显示DMXAA（ASA404)作用于VEGFR几种激酶成员,如人人脐静脉内皮细胞中的VEGFR2信号，具有非免疫调节的抑制效果。^[3]

Cell Data

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HepG2	NYnVelZPSXCxcITvd4l{KGG\|c3H5		Moq0NlQhcHK\|	MV3JcoR2[3Srb36gc4Yh[XCxcITvd4l{KGmwIHj1cYFvKEincFeyJINmdGy\|IHHzd4V{e2WmIHHzJIRwf26{ZXf1cIF1cW:wIH;mJGJkdC26TDDlfJBz\XO\|aX;uJINwNXS{ZXH0[YQhf2m2aDDwfZJidm:6YX70bI9v\SCjdDCxPlEhdW:uYYKgdoF1cW9iYX\0[ZIhOjRiaILzJIJ6KFenc4Tldo4h[myxdDDt[ZRpd2R?	MnfEQIEhfGG{Z3X0QUdg[myjbnunJIhz\WZ;J3j0eJB{Qi9xcIXicYVlNm6lYnmucoxuNm6raD7nc5YwOjlzMkm1NVEoRjJ7MUK5OVEyRC:jPh?=
HepG2	NED5fVFCeG:ydH;zbZMh[XO\|YYm=		NXTrXo9qOjRiaILz	NFjD[GpKdmS3Y4Tpc44hd2ZiYYDvdJRwe2m\|IHnuJIh2dWGwIFjldGczKGOnbHzzJIF{e2W\|c3XkJIF{KHWycnXneYxifGmxbjDv[kBDcWRiZYjwdoV{e2mxbjDjc{11emWjdHXkJJdqfGhicInyZY5wgGGwdHjvcoUh[XRiMUqxJI1wdGG{IILheIlwKGGodHXyJFI1KGi{czDifUBY\XO2ZYLuJIJtd3RibXX0bI9l	NEL2Z3A9[SC2YYLn[ZQ:L1:kbHHub{chcHKnZk2nbJR1eHN8Lz;weYJu\WRwbnPibU5vdG1wbnnoModwfi9{OUGyPVUyOSd-MkmxNlk2OTF:L3G+

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Assay

Methods	Test Index	PMID
Western blot	p-p38 / p38 ; PubMed: 21819972 Biochem Pharmacol Mouse macrophages (MHS) were stimulated with 20 µg/ml DMXAA in culture. At various time points, the culture supernatants and the cells were collected and assayed for amount of p38 phosphorylation with immunoblots. p-MK2 / pERK / p-JNK ; PubMed: 21819972 Biochem Pharmacol Mouse macrophages (MHS) were pre-exposed to IFN-γ, followed by DMXAA treatment at 20 µg/ml. The cells also extracted to determine the effect of IFN-γ priming on DMXAA-induced MAPK pathways activation.	21819972
Growth inhibition assay	Cell proliferation ; PubMed: 30138430 PLoS One 24 h after incubation of co-culture of B16.F10 cells and TAMs with different concentrations of DMXAA;	30138430

体内研究

DMXAA（ASA404)显著延迟化学致癌物诱导的细胞生长, 提高肿瘤倍增时间，且提高从治疗到安乐死的时间。DMXAA（ASA404)处理携带肿瘤的动物后, 平均肿瘤倍增时间,平均肿瘤变三倍时间，及从治疗到安乐死的平均时间分别提高4.4-, 1.8- 2.7-倍。^[4] DMXAA（ASA404)处理显著保护感染200 p.f.u.小鼠适应的H1N1流感 PR8病毒的C57BL/6J小鼠，使存活率达60%, 而对照组存活率只为20%。^[2]

激酶实验：^[1]	- 合并 DT-心肌黄酶活性和酶抑制动力学分析: 通过在Beckman DU 650分光光度计上检测细胞色素 c 在 550 nm处减少量而测定纯化的DT-心肌黄酶活性。每组实验含细胞色素c(70 μM), NADH(多种浓度), 纯化的DT-心肌黄酶(0.032 μg),及溶于含0.14% BSA终体积为1 mL Tris–HCl buffer(50 mM, pH 7.4)的维生素K(多种浓度)。加入NADH开始反应。根据反应曲线初始部分(30秒)计算减少率, 结果表示为μmol 减少的细胞色素/min/mg 蛋白，使用21 mM⁻¹ cm⁻¹ 摩尔消光系数表示减少的细胞色素c。在室温下进行酶反应，所有反应做三次平行。反应中含有的DMXAA（ASA404) (不同浓度) 用来表示纯化的 DT-心肌黄酶抑制活性,通过改变NADH (维生素K不变)维生素K (NADH不变) 的浓度测定抑制特性。获得K_i值。通过测量对Dicumarol敏感的DCPIP在 600 nm处的减少量而测定DT-心肌黄酶作用于DLD-1细胞的活性收集处于指数生长中期的DLD-1细胞，置于冰冻buffer (Tris–HCl, 25 mM, pH 7.4和 250 mM蔗糖)，然后在冰上进行超声处理。酶反应条件为2 mM NADH, 40 μM DCPIP, 溶于含BSA (0.7 mg/mL)终体积为1 mL Tris–HCl (25 mM, pH 7.4) 的 20 μL Dicumarol。使用21 mM⁻¹ cm⁻¹ 的摩尔消光系数表示对Dicumarol敏感的 DCPIP减少量。通过 Bradford检测测定蛋白水平。
细胞实验： ^[1]	- 合并 Cell lines: DLD-1和 H460 Concentrations: 0 到2 mM Incubation Time: 96 小时 Method: DLD-1人结肠癌和H460人非小细胞肺癌细胞单层培养在RPMI 1640培养基中，培养基中补充胎牛血清 (10%), 丙酮酸钠(2 mM), 青霉素/链霉亲和素 (50 IU mL⁻¹/50 μg mL^-1) 及l-谷氨酰胺(2 mM)。在有氧条件下进行MTT 实验和所有其他实验，检测药物敏感性。细胞接种在96孔板上，然后在含5% CO₂的环境下温育过夜。完全移除培养基，使用含多种药物浓度的培养基替代。在只有维生素K时，药物处理时间为1小时,然后细胞在Hanks’平衡盐溶液中冲洗两次，然后在每孔中加入200 μL 新鲜RPMI 1640培养基。在只有DMXAA（ASA404) 存在时，药物处理时间为3小时。随后温育4天，使用MTT检测测定细胞存活情况。为了DMXAA（ASA404)和维生素K联用，初步建立细胞，选择非毒性(细胞存活率>95%)浓度的DMXAA（ASA404)。细胞使用DMXAA（ASA404) (2 mM)先处理2小时，随后移除培养基，使用含抑制剂 (DMXAA（ASA404)，持续浓度为2 mM)和维生素K(多种浓度)的培养基更换。再温育7小时，使用Hanks’平衡盐溶液冲洗细胞，再加入生长培养基。 (Only for Reference)
动物实验： ^[4]	- 合并 Animal Models: 注射化学致癌物 (NMU)的雌性 Wistar大鼠 Dosages: ≤300 mg/kg Administration: 腹腔注射 (Only for Reference)

参考文献

[4] Liu JJ, et al. Cancer Chemother Pharmacol. 2007, 59(5), 661-669.

- 合并

溶解度 (25°C)

体外	DMSO	7 mg/mL (24.79 mM)
	Water	Insoluble
	Ethanol	Insoluble

* 溶解度检测是由Selleck技术部门检测的，可能会和文献中提供的溶解度有所差异，这是由于生产工艺和批次不同产生的正常现象。请按照顺序依次加入各个纯溶剂。

化学数据 Download Vadimezan (ASA404) SDF

分子量	282.29
化学式	C₁₇H₁₄O₄
CAS号	117570-53-3
储存条件	3年-20°C 粉状 2年-80°C 溶于溶剂
别名	NSC 640488, DMXAA

动物体内配方计算器 (澄清溶液)

第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）

给药剂量

mg/kg

动物平均体重

每只动物给药体积

动物数量

只

第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系Selleck为您提供正确的澄清溶液配方）

% DMSO+ % + % Tween 80+ % ddH₂O

计算重置

计算结果:

工作液浓度： mg/ml；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，注：如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请先联系Selleck）；

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH₂O，混匀澄清。

注意：1. 首先保证母液是澄清的；
2. 一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。

计算器

摩尔浓度计算器

本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为:

质量 (mg) = 浓度 (mM) x 体积 (mL) x 分子量 (g/mol)

摩尔浓度计算公式

质量

浓度

体积

分子量
=

×

×

*在配置溶液时，请务必参考Selleck产品标签上、SDS / COA（可在Selleck的产品页面获得）批次特异的分子量使用本工具。

稀释计算器

用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：

开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积

稀释公式

稀释公式一般简略地表示为: C1V1 = C2V2 ( 输入输出 )

C1

V1

C2

V2
×

=

×

在配置溶液时，请务必参考Selleck产品标签上、SDS / COA（可在Selleck的产品页面获得）批次特异的分子量使用本工具。.

连续稀释计算器方程

连续稀释
初始浓度:
稀释倍数:

计算结果

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

分子量计算器

通过输入化合物的化学式来计算其分子量：

注：化学分子式大小写敏感。C10H16N2O2 c10h16n2o2

摩尔浓度计算器

质量	浓度	体积	分子量
=	×	×
计算

临床试验信息 (data from https://clinicaltrials.gov, updated on 2022-01-17)

NCT Number	Recruitment	interventions	Conditions	Sponsor/Collaborators	Start Date	Phases
NCT00856336	Completed	Drug: DMXAA	Refractory Tumors	Antisoma Research	May 2003	Phase 1
NCT00863733	Completed	Drug: DMXAA	Solid Tumors	Cancer Research UK\|Cancer Society Auckland	May 1996	Phase 1

技术支持

在订购、运输、储存和使用我们的产品的任何阶段，您遇到的任何问题，均可以通过拨打我们的热线电话400-668-6834，或者技术支持邮箱tech@selleck.cn，直接联系到我们。我们会在24小时内尽快联系您。

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VDA抑制剂选择性比较

生物活性

推荐的实验操作(此推荐来自于公开的文献所以Selleck并不保证其有效性)

参考文献

溶解度 (25°C)

化学数据 Download Vadimezan (ASA404) SDF

动物体内配方计算器 (澄清溶液)

计算器

摩尔浓度计算器

质量 (mg) = 浓度 (mM) x 体积 (mL) x 分子量 (g/mol)

摩尔浓度计算公式

稀释计算器

开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积

稀释公式

连续稀释计算器方程

连续稀释

计算结果

分子量计算器

总分子量：g/mol

摩尔浓度计算器

临床试验信息 (data from https://clinicaltrials.gov, updated on 2022-01-17)

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