ML323

目录号:S7529

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ML323 是强效的选择性的USP1-UAF1抑制剂,其IC50为76 nM。

ML323 Chemical Structure

CAS: 1572414-83-5

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DUB抑制剂选择性比较

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生物活性

产品描述 ML323 是强效的选择性的USP1-UAF1抑制剂,其IC50为76 nM。
特性 USP1-UAF1选择性抑制剂。
靶点
USP1-UAF1 [1]
(Cell-free assay)
76 nM
体外研究

ML323通过抑制H596细胞中USP1–UAF1活性而抑制PCNA 和 FANCD2去泛素化。此外,ML323通过以两个主要的DNA损伤应答途径(TLS 和 FA)为靶点,增强顺铂在H596细胞和U2OS骨肉瘤细胞中的毒性。[1]

推荐的实验操作(此推荐来自于公开的文献所以Selleck并不保证其有效性)

激酶实验:

[1]

  • 高通量筛选:

    对于HTS,USP1-UAF1活性使用泛素-罗丹明110为底物进行检测,泛素的C端甘氨酸和罗丹明之间的酰胺键水解作用导致荧光增加。该测定被小型化为4微升体积,在1,536孔中以定量的HTS模式筛选大约402,701种化合物,每种测试化合物以4到5种浓度范围测定。试验显示出很强的性能,整个筛选中因子Z的平均值为0.8。

细胞实验:

[1]

  • Cell lines: H596 细胞
  • Concentrations: ~30 μM
  • Incubation Time: 7-12天
  • Method:

    对于细胞集落形成实验,细胞以300–500细胞每孔接种于6孔板,并生长过夜。然后将细胞用单独的ML323,单独的顺铂或顺铂与ML323(1:1或 1:4)的组合以指示浓度处理。细胞用等体积的DMSO和生理盐水处理,作为对照组。处理48小时后,加入新鲜的生长培养基,细胞再培养5-10天以形成集落。对于UV联合治疗,细胞用指示浓度的ML323或等体积的DMSO处理。48小时后,移除培养基,细胞在254nm下以指示剂量被照射。加入新鲜生长培养基,细胞再培养5-10天以形成集落。没有被UV照射过,但被ML323或等体积DMSO处理过的细胞作为对照组,并指定为100%。细胞集落形成后,细胞用甲醇固定,并用0.5%结晶紫着色。大于50个细胞的集落被计数。集落的数量通过三个重复的板测定。剂量反应曲线使用GraphPad Prism产生,使用CalcuSyn计算复合指数进行分析,以测定加入固定比率顺铂和USP1-UAF1抑制剂所影响的细胞分数。

溶解度(25°C)

体外

* 溶解度检测是由Selleck技术部门检测的,可能会和文献中提供的溶解度有所差异,这是由于生产工艺和批次不同产生的正常现象。请按照顺序依次加入各个纯溶剂。

化学数据

分子量 384.48
化学式

C23H24N6

CAS号 1572414-83-5
储存条件 3年 -20°C 粉状
2年 -80°C 溶于溶剂

动物体内配方计算器(澄清溶液)

第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)

mg/kg g μL

第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系Selleck为您提供正确的澄清溶液配方)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

计算结果:

工作液浓度: mg/ml;

DMSO母液配制方法: mg 药物溶于μL DMSO溶液(母液浓度mg/mL,:如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请先联系Selleck);

体内配方配制方法:μL DMSO母液,加入μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入μL ddH2O,混匀澄清。

体内配方配制方法:μL DMSO母液,加入μL Corn oil,混匀澄清。

注意:1. 首先保证母液是澄清的;
2.一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。

摩尔浓度计算器

质量 浓度 体积 分子量

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