Selisistat (EX 527)

目录号:S1541 别名: SEN0014196

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Selisistat (EX 527, SEN0014196) 是一种有效的,选择性SIRT1抑制剂,无细胞试验中IC50为38 nM,比作用于SIRT2和SIRT3选择性高200倍以上。Phase 2。

Selisistat (EX 527) Chemical Structure

CAS: 49843-98-3

规格 价格 库存 购买数量
10mM (1mL in DMSO) RMB 647.01 现货
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生物活性

产品描述 Selisistat (EX 527, SEN0014196) 是一种有效的,选择性SIRT1抑制剂,无细胞试验中IC50为38 nM,比作用于SIRT2和SIRT3选择性高200倍以上。Phase 2。
特性 与其他SIRT1抑制剂相比,EX 527有效性,特定性,和稳定性更高,且毒性更低。
靶点
SIRT1 [1]
(Cell-free assay)
38 nM
体外研究

EX 527有效抑制SIRT1去乙酰化酶活性,IC50为38 nM, 这种作用存在浓度依赖性,而抑制SIRT2和SIRT3时,效果低很多,IC50分别为19.6 μM和48.7 μM。EX 527 浓度高达100 μM时也不抑制SIRT4-7和I/II类 HDAC活性。1 μM EX-527 单独作用于NCI-H460 细胞,不能检测p53在lysine 382位点的乙酰化作用。EX-527作用于受遗传毒性试剂Etoposide, Adriamycin, Hydroxyurea, 和H2O2影响的NCI-H460细胞,人类乳腺上皮细胞,U-2 OS 和MCF-7 细胞,显著提高乙酰化p53的量。但是EX 527在p53控制的基因表达, 细胞存活,或细胞增殖方面没有检测效果。[1] EX 527 在0.1% 血清而不是10%血清中处理7天,作用于HCT116细胞,显著提高细胞数,提高达90%,说明在无细胞因子的情况下,SirT1是细胞增殖的显著调节器。[2] EX 527 作用于INS-1E细胞,废除白藜芦醇对葡萄糖的反应的影响,且抑制白藜芦醇诱导的Glut2, 葡萄糖激酶,Pdx-1,和Tfam的上调, 因为EX 527和白藜芦醇作用于SIRT1脱乙酰基酶活性的作用是相反的。[3]

Cell Data
Cell Lines Assay Type Concentration Incubation Time Formulation Activity Description PMID
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BL21 (DE3) Mn\4SpVv[3Srb36gZZN{[Xl? M3\3PWlvcGmkaYTpc44hd2ZiZoXscEBt\W6pdHigbJVu[W5iU1nSWFEh\XiycnXzd4VlKGmwIFXzZ4hmemmlaHnhJINwdGliQlyyNUApTEV|KTDj[YxteyC3c3nu[{BndHWxcn;n[Y5q[yB5LXHtbY5wNTRvbXX0bJlt[2:3bXHybY4hMEGPQzmtcIFj\WynZDDw[ZB1cWSnIHL5JIZtfW:{ZYPj[Y5k\SCjc4PhfUwhUUN3MDC9JFAvOjFizszNMi=> MVu8ZUB1[XKpZYS9K39jdGGwazegbJJm\j1paIT0dJM7Ny:ydXLt[YQvdmOkaT7ucI0vdmmqLnfvek8zPTJ5NUiyOEc,OjV{N{W4NlQ9N2F-
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BL21 (DE3) M3XSSGZ2dmO2aX;uJIF{e2G7 NVnhToNGUW6qaXLpeIlwdiCxZjDmeYxtKGynbnf0bEBpfW2jbjDTTXJVOiCneIDy[ZN{\WRiaX6gSZNkcGW{aXPobYEh[2:uaTDCUFIyKCiGRUOpJINmdGy|IIXzbY5oKG[udX;yc4dmdmmlIEetZY1qdm9vND3t[ZRpgWylb4XtZZJqdiBqQV3DLU1t[WKnbHXkJJBmeHSrZHWgZpkh\my3b4Lld4NmdmOnIHHzd4F6NCCLQ{WwJF0hOS57NDFOwG0v NFfOVGo9[SC2YYLn[ZQ:L1:kbHHub{chcHKnZk2nbJR1eHN8Lz;weYJu\WRwbnPibU5vdG1wbnnoModwfi9{NUK3OVgzPCd-MkWyO|U5OjR:L3G+
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NCI-H460 MojqSpVv[3Srb36gZZN{[Xl? NX7Je2xUPiCqcoO= M{LWUmlvcGmkaYTpc44hd2ZiU1nSWE0zKGmwIHj1cYFvKE6FST3IOFYxKGOnbHzzJIF{e2W|c3XkJIF{KGmwaHnibZRqd25ib3[gdFU{KGSnYXPleJlt[XSrb36gZYZ1\XJiNjDodpMh[nliaX3teY5weHKnY3nwbZRifGmxbj;pcY12dm:kbH;0eIlv\yCjbnHsfZNqeyxiSVO1NEA:KDFizszNMi=> MVG8ZUB1[XKpZYS9K39jdGGwazegbJJm\j1paIT0dJM7Ny:5d4eu[YJqNmGlLoXrM4Np\W2kbD;jc41xd3WwZG;y[ZBwenShY3Hy[E9EUEWPQly0NlA{OTFxJ{7DbGVOSkx:L3G+
Assay
Methods Test Index PMID
Western blot GRP78 / FASL / Bcl-2 / LC3 Ac-H3K9 / Fibronectin / Collagen 1 / α-SMA PCNA / Cyclin D1 / Cyclin E pEGFR / EGFR / pPDGFRβ / PDGFRβ pSTAT3 / STAT3 p27 FOXO3a / SIRT1 / Ac-p53 / p16(INK4a) 29312612 24833701 25143434 31223423
Immunofluorescence p-p38 26824501
Growth inhibition assay Cell viability 24484175
体内研究 EX 527按10 μg剂量作用于大鼠,通过抑制下丘脑SIRT1活性而提高下丘脑乙酰化-p53水平。EX 527和Ghrelin联用处理,通过降低 pAMPK水平,提高ACC水平,及废除转录因子FoxO1, pCREB,和 Bsx,以及下丘脑弓状核中的神经肽NPY和AgRP的更高水平表达,而显著减弱生长素的促进食欲功效。[4]

推荐的实验操作(此推荐来自于公开的文献所以Selleck并不保证其有效性)

激酶实验:[1]
  • GST-SIRT1脱乙酰基酶实验:

    在pDEST27 Gateway载体中使用FuGENE-6使293T细胞短暂转染GST标记的人SIRT1。 48小时后,用50 mM Tris, pH 8.0, 120 mM NaCl, 1 mM EDTA,和 0.5% Nonidet P-40溶解细胞,加入完整Mini蛋白酶抑制剂片。使用谷胱甘肽-琼脂糖凝胶珠从溶解物中纯化GST-SIRT1,然后在以上buffer 中进行冲洗。在EX 527 (48 pM 到100 μM)存在时,使用30 ng GST-SIRT1进行脱乙酰反应。使用Fluor de Lys 试剂盒 ,使用包含p53的379到 382 残基,且在lysine 382位点乙酰化的荧光肽,测定脱乙酰作用。使乙酰化赖氨酸残基与一部分aminomethylcoumarin进行耦合。SIRT1使肽段脱乙酰化,随后加入蛋白水解显影剂,释放荧光aminomethylcoumarin。酶和170 μM NAD+及100 μM p53荧光肽在37oC下温育45分钟,随后在显影剂中温育15分钟。分别在460 nm处测定荧光值,用相对荧光单位表示酶活性。

细胞实验:[1]
  • Cell lines: NCI-H460, MCF-7, U-2 OS和 HMEC
  • Concentrations: 溶于 DMSO, 终浓度为1 μM
  • Incubation Time: 48 或72小时
  • Method: 测定细胞活力, 用 EX 527处理细胞48小时。通过细胞Titer-Glo荧光实验测定细胞活力,测定全部 ATP水平,作为细胞数的一个指数。在Luminoskan Ascent读数仪上测定荧光值。测定增殖实验中,在培养基中加入EX 527,然后立即加入0.5 μCi/mL [14C]胸甘。在Microbeta液体闪烁计数器上测量,在48小时(测定HMEC)或72小时(测定NCI-H460, MCF-7, 和U-2 OS细胞)测定实验板。在Cytostar-T组织培养板上通过接近闪烁体而测定渗透到细胞的胸甘。
动物实验: [4]
  • Animal Models: 雄性Sprague-Dawley大鼠
  • Dosages: 5 μg
  • Administration: 脑室内注射

溶解度(25°C)

体外

体内

从左到右依次将纯溶剂加入产品,现配现用(数据来自Selleck实验检测而非文献):
5% DMSO+30% PEG 300+ddH2O

15mg/mL

* 溶解度检测是由Selleck技术部门检测的,可能会和文献中提供的溶解度有所差异,这是由于生产工艺和批次不同产生的正常现象。请按照顺序依次加入各个纯溶剂。

化学数据

分子量 248.71
化学式

C13H13ClN2O

CAS号 49843-98-3
储存条件 3年 -20°C 粉状
2年 -80°C 溶于溶剂

动物体内配方计算器(澄清溶液)

第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)

mg/kg g μL

第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系Selleck为您提供正确的澄清溶液配方)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

计算结果:

工作液浓度: mg/ml;

DMSO母液配制方法: mg 药物溶于μL DMSO溶液(母液浓度mg/mL,:如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请先联系Selleck);

体内配方配制方法:μL DMSO母液,加入μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入μL ddH2O,混匀澄清。

体内配方配制方法:μL DMSO母液,加入μL Corn oil,混匀澄清。

注意:1. 首先保证母液是澄清的;
2.一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。

摩尔浓度计算器

质量 浓度 体积 分子量

临床试验信息

NCT Number Recruitment interventions Conditions Sponsor/Collaborators Start Date Phases
NCT01485965 Completed Drug: SEN0014196 Huntington''s Disease Siena Biotech S.p.A. November 2011 Phase 1
NCT01521832 Completed Drug: SEN0014196 Huntington''s Disease Siena Biotech S.p.A. October 2009 Phase 1

(data from https://clinicaltrials.gov, updated on 2022-08-01)

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常见问题及建议解决方法

问题 1:
what is the extinction coefficient of S1541 WX527?

回答:
The extinction coefficient of S1541 EX-527 is 1421.650635.

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