R406 (free base)

目录号:S1533

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R406 (free base) 是一种有效的Syk抑制剂,无细胞试验中IC50为41 nM,强效抑制Syk而不能抑制Lyn,对Flt3作用效果低5倍。R406 (free base) 可触发凋亡。Phase 1。

R406 (free base) Chemical Structure

CAS: 841290-80-0

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Syk抑制剂选择性比较

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生物活性

产品描述 R406 (free base) 是一种有效的Syk抑制剂,无细胞试验中IC50为41 nM,强效抑制Syk而不能抑制Lyn,对Flt3作用效果低5倍。R406 (free base) 可触发凋亡。Phase 1。
靶点
FLT3 [1] Syk [1]
(Cell-free assay)
41 nM
体外研究

R406是ATP竞争性Syk抑制剂,Ki为30 nM。在不同细胞中R406选择性抑制 Syk依赖的信号通路,EC50为33 nM 到171 nM,比作用于 Syk非依赖性通路效果高很多。[1] R406作用于多种弥漫性巨大细胞淋巴瘤,抑制细胞增殖,EC50 为0.8 μM 到 8.1 μM。1 μM 或 4 μM R406处理DLBCL细胞系,诱导caspases 9 和3激活, 而不激活caspase 8,导致大部分细胞凋亡。用R406预处理B细胞受体(BCR)交联的对R406 敏感的DLBCLs,完全抑制 SYK525/526磷酸化和BLNK依赖SYK的磷酸化。[2] R406有效降低MMP-9 mRNA水平,处理24和48小时,比对照组分别降低2.8和4.3倍,并降低RL细胞侵袭能力。[3]

Cell Data
Cell Lines Assay Type Concentration Incubation Time Formulation Activity Description PMID
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体内研究 R406有效作用于多种免疫系统紊乱的动物模型。R406口服给药患免疫复合物导致炎症反应的小鼠,显著抑制皮肤反向被动Arthus反应,按1 mg/kg和 5 mg/kg剂量处理, 与对照组相比则抑制分别为72% 和86%。R406按 10 mg/kg 剂量处理用胶原抗体处理的鼠,显著降低炎症和肿胀, 使渐进性关节炎降低到较低水平,且延迟发病,且作用于K/BxN血清转移小鼠模型,降低临床关节炎达 50% 。[1]

推荐的实验操作(此推荐来自于公开的文献所以Selleck并不保证其有效性)

激酶实验:

[1]

  • 体外荧光偏振激酶实验:

    R406在DMSO中连续稀释,然后在激酶buffer(20 mM HEPES, pH 7.4, 5 mM MgCl2, 2 mM MnCl2, 1 mM DTT, 0.1 mg/mL 乙酰化BGG)中稀释到DMSO浓度为1%。室温下加入溶于激酶buffer的ATP和底物, 终DMSO浓度为0.2%。在含 5 μM HS1肽底物 和4 μM ATP的混合物中进行激酶反应,终体积为20 μL,在激酶buffer中加入0.125 ng Syk 开始反应。反应在室温下进行40分钟。加入20 μL 含EDTA/磷酸抗体(1X)/荧光蛋白磷酸肽示踪(0.5X)(在FP稀释buffer中稀释)的PTK猝灭混合物终止反应。然后实验板在室温下黑暗温育30分钟,然后在Polarion荧光偏振读数板上进行读数。R406按11种浓度进行平行实验,使用Prism GraphPad 软件通过回归曲线分析进行曲线拟合而测定IC50值。

细胞实验:

[2]

  • Cell lines: DHL4, DHL6, DHL8, DHL10, Wsu-NHL, Karpas422 (K422), OCI LY1, LY3, LY4, LY7, LY10, LY18, LY19, Pfeiffer, 和 Toledo
  • Concentrations: 溶于DMSO,浓度为10 mM,终浓度为5 μM
  • Incubation Time: 72或96小时
  • Method:

    用连续稀释的R406 (0.3, 0.6, 1.25, 2.5, 或5 μM) 处理DLBCL 细胞系72 或 96小时。通过MTT实验测定细胞增殖,使用annexin V–FITC/碘化丙啶(PI)染色测定细胞凋亡。为了测定caspase9,8和3,细胞裂解,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)进行大小分离,然后进行免疫印迹。

动物实验:

[1]

  • Animal Models: 静脉注射 1% 卵清蛋白(OVA)的雌性C57BL/6 小鼠,卵清蛋白 (OVA)溶于含1% Evans 蓝染料的盐水(10 mg/kg)中;携带抗胶原抗体诱导型关节炎的雌性Balb/c小鼠;腹腔注射成年K/BxN鼠血清而诱发关节炎的雌性 C57BL/6小鼠
  • Dosages: ~10 mg/kg/day
  • Administration: 口服处理

溶解度(25°C)

体外

体内

从左到右依次将纯溶剂加入产品,现配现用(数据来自Selleck实验检测而非文献):
1% DMSO+30% polyethylene glycol+1% Tween 80

30 mg/mL

* 溶解度检测是由Selleck技术部门检测的,可能会和文献中提供的溶解度有所差异,这是由于生产工艺和批次不同产生的正常现象。请按照顺序依次加入各个纯溶剂。

化学数据

分子量 470.45
化学式

C22H23FN6O5

CAS号 841290-80-0
储存条件 3年 -20°C 粉状
2年 -80°C 溶于溶剂

动物体内配方计算器(澄清溶液)

第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)

mg/kg g μL

第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系Selleck为您提供正确的澄清溶液配方)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

计算结果:

工作液浓度: mg/ml;

DMSO母液配制方法: mg 药物溶于μL DMSO溶液(母液浓度mg/mL,:如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请先联系Selleck);

体内配方配制方法:μL DMSO母液,加入μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入μL ddH2O,混匀澄清。

体内配方配制方法:μL DMSO母液,加入μL Corn oil,混匀澄清。

注意:1. 首先保证母液是澄清的;
2.一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。

摩尔浓度计算器

质量 浓度 体积 分子量

临床试验信息

NCT Number Recruitment interventions Conditions Sponsor/Collaborators Start Date Phases
NCT01725230 Completed Drug: Fostamatinib|Drug: Rosuvastatin|Drug: Simvastatin Rheumatoid Arthritis AstraZeneca November 2012 Phase 1
NCT01598571 Completed Drug: Fostamatinib Healthy AstraZeneca May 2012 Phase 1
NCT01387308 Completed Drug: Fostamatinib Healthy AstraZeneca August 2011 Phase 1
NCT01355354 Completed Drug: Digoxin|Drug: Fostamatinib Healthy Volunteers|Rheumatoid Arthritis AstraZeneca June 2011 Phase 1

(data from https://clinicaltrials.gov, updated on 2022-08-01)

技术支持

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