Purmorphamine

For research use only. Not for use in humans.

目录号:S3042 别名: Shh Signaling Antagonist VI

Purmorphamine Chemical Structure

CAS No. 483367-10-8

Purmorphamine (Shh Signaling Antagonist VI)直接结合并激活Smoothened,阻断BODIPY-cyclopamine与Smo结合,在HEK293T细胞中IC50约为1.5 μM,也诱导成骨细胞分化,EC50为1μM。Purmorphamine 可减少基础和诱导的自噬。

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产品安全说明书

Hedgehog/Smoothened抑制剂选择性比较

生物活性

产品描述 Purmorphamine (Shh Signaling Antagonist VI)直接结合并激活Smoothened,阻断BODIPY-cyclopamine与Smo结合,在HEK293T细胞中IC50约为1.5 μM,也诱导成骨细胞分化,EC50为1μM。Purmorphamine 可减少基础和诱导的自噬。
靶点
Smoothened [1]
(HEK293T cells)
~1.5 μM
体外研究

Purmorphamine与Cyclopamine(一种Smo拮抗剂)竞争,直接结合和激活Smoothened,而激活Hedgehog通路,IC50为1.5 μM。[1] Purmorphamine作用于全能C3H10T1/2 细胞,是有效的骨生成诱导剂。Purmorphamine作用于C3H10T1/2细胞的EC50(根据ALP表达) 为1 μM。Purmorphamine (1 μM) 和BMP-4 (100 ng/mL)联用,作用于3T3-L1细胞,使ALP活性增强90多倍。[2]与BMP-4相比, Purmorphamine作用于多能间充质祖细胞,诱导骨生成,通过激活Hedgehog信号。[3]

Cell Data
Cell Lines Assay Type Concentration Incubation Time Formulation Activity Description PMID
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Assay
Methods Test Index PMID
Western blot
Patch1 / Gli1 / LC3 / p62 ; 

PubMed: 26609469     


Autophagy was induced in LX-2 and T-6 cells by culturing in EBSS for 4 h. Cells were then treated with Purmorphamine (Pur, 10 µm) for 72 h. Endogenous Patch1, Gli1, LC3B and p62 were detected by immunoblotting from total cell lysates, quantified by densitometric analysis and normalized to GAPDH. 

26609469
Immunofluorescence
SOX18; 

PubMed: 26588701     


The effect of purmorphamine treatment on SOX18 protein leveldetected by immunocytochemistry. Cell nuclei were counterstained with DAPI. Scale bars: 50 μm.

26588701
Growth inhibition assay
Cell viability; 

PubMed: 26588701     


MTT viability assay performed after 1 and 3 days of treatment with 10μM purmorphamine or DMSO. Relative cell viability was calculated as a percentage of HeLa cells viability after DMSO treatment that was set as 100%. Results were presented as the means ± SEM of at least five independent experiments. P values were calculated using Student’s t-test, *p ≤ 0.05, **p ≤ 0.01

26588701
体内研究 Purmorphamine作用于基于大鼠结构的人间充质干细胞,上调ALP表达。[4]

推荐的实验操作(此推荐来自于公开的文献所以Selleck并不保证其有效性)

激酶实验:[1]
- 合并

结合实验:

使用BODIPY-Cyclopamine和过表达Smo的细胞进行Smo结合实验,使用CMV启动子, 含SV40起点的表达载体,获得Smo-Myc3,缺失突变体Smo CRD (68到182位氨基酸缺失), 和Smo CT (556到793位氨基酸缺失)。HEK 293T细胞在12孔板中的聚-D-赖氨酸处理的玻璃盖玻片上生长,直到70%汇合,然后使用FuGene 6,通过适当的表达载体(每孔0.5g)进行转染。转染两天后,HEK 293T细胞与含0.5%小牛血清,5 nM BODIPY-Cyclopamine,和不同浓度的Purmorphamine (0, 1.5, 或5 M) (每孔1 mL)的 DMEM培养基在37°C下温育1小时。然后使用1×PBS缓冲液(每孔1 mL)洗涤过表达Smo的细胞,置于含DAPI的培养基,使用Leica DM4500B荧光显微镜观察。使用固定细胞进行结合检测,使用溶于1×PBS缓冲液(每孔1 mL)的3%多聚甲醛在室温下固定过表达Smo的HEK293T细胞10分钟,然后使用含10mM甘氨酸和0.2%叠氮化钠的1×PBS缓冲液(每孔1 mL)处理5分钟,使用1×PBS缓冲液(每孔1 mL)洗涤,然后再使用含Purmorphamine的培养基在室温下处理4小时。
细胞实验:[2]
- 合并
  • Cell lines: C3H10T1/2 细胞
  • Concentrations: 0.5-10 μM
  • Incubation Time: 4 天
  • Method: C3H10T1/2细胞在T175烧瓶中扩增,第13通道的细胞通过胰蛋白酶/EDTA分离,然后在生长培养基中稀释。使用Multi-dropTM液体传输系统,将产生的细胞悬浮液按每孔2500个细胞接种到黑色透明底384孔板中,孔中为100 µL生长培养基。温育过夜后,细胞附着到孔的底部。使用Mini TrakTM多位分配系统,将溶于DMSO (500 nL)的每组Purmorphamine储存液输送到对应孔中,确保Purmorphamine终浓度为5μM。然后细胞置于37°C下含5% CO2的空气中温育。4天后,除去培养基,10 μL被动裂解缓冲液加入到每孔中。5分钟后,10 μL碱性磷酸酶底物溶液添加到每孔中。在室温下温育15分钟后,在Acquest高通量酶标仪上对实验板进行读数。
    (Only for Reference)

溶解度 (25°C)

体外 DMSO 4 mg/mL warmed (7.68 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
体内 从左到右依次将纯溶剂加入产品,现配现用(数据来自Selleck实验检测而非文献):
2% DMSO+30% PEG 300+5% Tween 80+ddH2O
1mg/mL

* 溶解度检测是由Selleck技术部门检测的,可能会和文献中提供的溶解度有所差异,这是由于生产工艺和批次不同产生的正常现象。请按照顺序依次加入各个纯溶剂。

化学数据

分子量 520.62
化学式

C31H32N6O2

CAS号 483367-10-8
储存条件 粉状
溶于溶剂
别名 Shh Signaling Antagonist VI

动物体内配方计算器 (澄清溶液)

第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
给药剂量 mg/kg 动物平均体重 g 每只动物给药体积 ul 动物数量
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系Selleck为您提供正确的澄清溶液配方)
% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
计算重置

计算器

摩尔浓度计算器

摩尔浓度计算器

本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:

质量 (mg) = 浓度 (mM) x 体积 (mL) x 分子量 (g/mol)

摩尔浓度计算公式

  • 质量
    浓度
    体积
    分子量

*在配置溶液时,请务必参考Selleck产品标签上、SDS / COA(可在Selleck的产品页面获得)批次特异的分子量使用本工具。

稀释计算器

稀释计算器

用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:

开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积

稀释公式

稀释公式一般简略地表示为: C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )

  • C1
    V1
    C2
    V2

在配置溶液时,请务必参考Selleck产品标签上、SDS / COA(可在Selleck的产品页面获得)批次特异的分子量使用本工具。.

连续稀释计算器方程

  • 连续稀释

  • 计算结果

  • C1=C0/X C1: LOG(C1):
    C2=C1/X C2: LOG(C2):
    C3=C2/X C3: LOG(C3):
    C4=C3/X C4: LOG(C4):
    C5=C4/X C5: LOG(C5):
    C6=C5/X C6: LOG(C6):
    C7=C6/X C7: LOG(C7):
    C8=C7/X C8: LOG(C8):
分子量计算器

分子量计算器

通过输入化合物的化学式来计算其分子量:

总分子量:g/mol

注:化学分子式大小写敏感。C10H16N2O2 c10h16n2o2

摩尔浓度计算器

质量 浓度 体积 分子量
计算

技术支持

在订购、运输、储存和使用我们的产品的任何阶段,您遇到的任何问题,均可以通过拨打我们的热线电话400-668-6834,或者技术支持邮箱tech@selleck.cn,直接联系到我们。我们会在24小时内尽快联系您。

操作手册

如果有其他问题,请给我们留言。

  • * 必填项
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