EPZ004777
EPZ004777是一种有效的，选择性的DOT1L抑制剂，无细胞试验中IC50为0.4 nM。
EPZ004777 Chemical Structure
CAS: 1338466-77-5
客户使用Selleck的EPZ004777发表文献31篇
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Histone Methyltransferase抑制剂选择性比较
细胞实验数据示例
| 细胞系 | 实验类型 | 给药浓度 | 孵育时间 | 活性描述 | 文献信息 |
|---|---|---|---|---|---|
| BHK | Antiviral assay | 8 days | Antiviral activity against Zika virus SMGC infected in BHK cells assessed as inhibition of virus induced cytopathic effect after 8 days by CellTiter-Glo luminescent cell viability assay, IC50=35.19μM. | 30170321 | |
| MV4-11 | Function assay | 6 days | Inhibition of DOT1L in human MV4-11 cells assessed as downregulation of HOXA9/MEIS1 mRNA expression after 6 days by real-time PCR analysis, IC50=0.7μM. | ChEMBL | |
| MOLM13 | Function assay | 6 days | Inhibition of DOT1L in human MOLM13 cells assessed as downregulation of HOXA9/MEIS1 mRNA expression after 6 days by real-time PCR analysis, IC50=0.7μM. | ChEMBL | |
| MCF10A | Function assay | Inhibition of DOT1L in human MCF10A cells assessed as reduction of H3K79 level, IC50=0.084μM. | 25406853 | ||
| THP1 | Antiproliferative assay | Antiproliferative activity against human THP1 cells containing MLL-AF9, EC50=0.004μM. | 23879463 | ||
| MV4-11 | Antiproliferative assay | Antiproliferative activity against human MV4-11 cells containing MLL-AF4, EC50=0.004μM. | 23879463 | ||
| MOLM13 | Antiproliferative assay | Antiproliferative activity against human MOLM13 cells containing MLL-AF9, EC50=0.004μM. | 23879463 | ||
| MLL | Function assay | Inhibition of Meis1 gene expression in human MLL cells, EC50=0.7μM. | 23879463 | ||
| MLL | Function assay | Inhibition of Hoxa9 gene expression in human MLL cells, EC50=0.7μM. | 23879463 | ||
| Sf9 | Function assay | Inhibition of human full length PRMT7 expressed in Sf9 cells, IC50=7.5μM. | 25893041 | ||
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生物活性
| 产品描述 | EPZ004777是一种有效的，选择性的DOT1L抑制剂，无细胞试验中IC50为0.4 nM。 | ||
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| 靶点 |
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| 体外研究(In Vitro) | ||||
| 体外研究活性 | EPZ004777选择性抑制细胞H3K79甲基化，并抑制关键MLL融合靶基因的表达。DOT1L受抑制后，EPZ004777选择性抑制MLL基因重排的细胞系和MLL-AF9转化的小鼠造血细胞增殖。此外, EPZ004777作用于MLL基因重排的细胞系，也诱导分化和凋亡。[1] EPZ004777选择性抑制MLL-AF10和CALM-AF10转化的小鼠造血细胞增殖。[2]EPZ004777 抑制DOT1L后，显著降低增殖，降低MLL-AF6靶基因表达，和MLL-AF6转化的小鼠造血细胞的细胞周期停滞。[3] | |||
|---|---|---|---|---|
| 激酶实验 | 测定抑制剂IC50值 | |||
| EPZ004777在DMSO中连续稀释3倍，起始浓度为1 mM，形成全部10种浓度。1 μL 等份的每种抑制剂稀释液接种到384孔微量滴定板中。100％抑制对照包括2.5 mM 终浓度的产品抑制剂S-adenosyl-L-homocysteine(SAH)。化合物与每孔40 ml 0.25 nM DOT1L(1-416) 在实验缓冲液(20 mM TRIS [pH 8.0] 10 mM NaCl, 0.002% Tween 20, 0.005% Bovine Skin Gelatin, 100 mM KCl, 和 0.5 mM DTT)中温育30分钟。每孔加入10 ml 底物开始反应，底物包括实验缓冲液（含200 nM 3H-SAM(80 Ci/mmol), 600 nM 未标记的SAM）和 20 nM 核小体 (终反应混合物中的底物都处于其各自Km值)。反应在室温下进行120分钟，然后每孔使用10 ml 800 mM SAM淬火。测量渗透进核小体的放射性。在类似的平衡试验条件下，使用处于其各自Km值的SAM和蛋白质/肽底物，测量一组组蛋白甲基转移酶的IC50值 。 | ||||
| 细胞实验 | 细胞系 | 人类白血病细胞系 MV4-11, THP-1, RS4;11, Kasumi-1, HL-60, REH, 和 Jurkat. SEM, KOPN-8, 697, U937 和 MOLM-13 细胞 | ||
| 浓度 | ~50 μM | |||
| 孵育时间 | 14-18 天 | |||
| 方法 | 测评人类细胞系增殖和活力，呈指数生长的细胞接种按一式三份接种在96孔板中，终体积为150 ml。在3 μM (增殖曲线), 或浓度不断增加(测定IC50) EPZ004777（高达50 μM）时，进行细胞温育。每隔3-4天，通过Guava Viacount实验测定活存细胞，最多至18天，然后使用Guava EasyCyte Plus 仪器分析。进行细胞计数时，更换生长培养基和EPZ004777，细胞分裂回每孔5×104。总细胞数表现为每孔分裂调整后的活细胞。根据浓度依赖性曲线每个时间点，使用Graphpad Prism 软件，测定每种细胞系的IC50值。测定IC50值直到IC50值稳定（THP-1细胞需18天，所有其它细胞系需14天）。测评EPZ004777对转化的小鼠造血祖细胞的作用效果，两个独立转导各自病毒的细胞按每孔0.5-1×105个细胞接种在24孔板，孔中含1 ml 培养基，然后使用浓度高达30 mM EPZ004777处理。进行细胞计数，每隔3-4天，在含新鲜化合物的新鲜培养基中再接种等量细胞数。MTT法检测中，第10天，收获成排再接种的细胞，然后按每孔 2×104各细胞一式三份接种在含适当浓度EPZ004777的100 ml培养基中。细胞温育2.5天，然后使用10 ml MTT试剂处理3小时，在100 ml MTT-增溶缓冲液 (来自Cell Proliferation Kit I [MTT])中裂解过夜。 |
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| 实验图片 | 检测方法 | 检测指标 | 实验图片 | PMID |
| Western blot | H3K79me2 H3K79me1 / H3K4me3 / H3K9me3 / H3R17me2a / H3K27me2 / H3K27me3 / H3K36me2 / H4R3me2s / H4K20me2 |
|
23138183 | |
| Growth inhibition assay | Cell viability |
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25596271 | |
| 体内研究(In Vivo) | ||
| 体内研究活性 | EPZ004777处理MLL白血病小鼠移植瘤模型，产生有效的抗肿瘤功效，且显著提高平均寿命。[1] | |
|---|---|---|
| 动物实验 | Animal Models | 患MLL小鼠的移植瘤MV4-11模型 |
| Dosages | 含100 和 150 mg/mL EPZ004777溶液的微型泵 | |
| Administration | 渗透泵 | |
化学信息&溶解度
| 分子量 | 539.67 | 分子式 | C28H41N7O4 |
| CAS号 | 1338466-77-5 | SDF | Download EPZ004777 SDF |
| Smiles | CC(C)N(CCCNC(=O)NC1=CC=C(C=C1)C(C)(C)C)CC2C(C(C(O2)N3C=CC4=C(N=CN=C43)N)O)O | ||
| 储存条件(自收到货起) | |||
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体外溶解度 |
DMSO : 100 mg/mL ( (185.29 mM)； DMSO吸湿会降低化合物溶解度，请使用新开封DMSO) Ethanol : 100 mg/mL Water : Insoluble |
摩尔浓度计算器 |
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体内溶解度 现配现用，请按从左到右的顺序依次添加，澄清后再加入下一溶剂 |
动物体内配方计算器 | ||||
实验计算
动物体内配方计算器（澄清溶液）
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系Selleck为您提供正确的澄清溶液配方）
计算结果：
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于μL DMSO溶液（母液浓度mg/mL，注：如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请先联系Selleck）；
体内配方配制方法：取μL DMSO母液，加入μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入μL ddH2O，混匀澄清。
体内配方配制方法：取μL DMSO母液，加入μL Corn oil，混匀澄清。
注意：1. 首先保证母液是澄清的；
2.一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
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